LDOC1基因对结肠癌细胞功能的影响和机制研究

发布时间：2021-07-30 21:21

　　目的检测LDOC1在结肠癌中的表达情况,并研究其对结肠癌的生物学功能的影响及相关分子机制。为结肠癌的早期诊断和有效治疗提供新的靶点。方法通过实时荧光定量PCR和免疫组化方法检测LDOC1在结肠癌组织中的表达情况,再利用RT-PCR方法检测LDOC1在结肠癌细胞中的表达情况。将LDOC1过表达慢病毒和空病毒转染至Caco2和HCT-116结肠癌细胞后,通过RT-PCR和western-bolt检测转染效率,运用CCK-8、克隆形成、流式细胞术、Transwell等实验,分别检测LDOC1对细胞增殖、周期、凋亡、迁移和侵袭的影响。通过Western-blot和细胞免疫荧光检测凋亡相关蛋白、Wnt/β-catenin信号通路及EMT相关分子的表达。最后加入Wnt通路激活剂IM-12后,通过Western-blot实验再次检测Wnt/β-catenin信号通路及EMT相关分子的表达。结果LDOC1在结肠癌组织和4株结肠癌细胞中均呈现出低表达。过表达LDOC1后,Caco2和HCT-116细胞的增殖、迁移和侵袭能力明显降低,细胞周期阻滞而凋亡率明显增加。同时,过表达LDOC1后,促凋亡蛋白明显增... 

【文章来源】：重庆医科大学重庆市

【文章页数】：49 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

LDOC1在结肠癌组织及正常结肠组织中的表达Figure1:TheexpressionlevelsofLDOC1incoloncancertissuesandnormalcolontissues.

图 1：LDOC1 在结肠癌组织及正常结肠组织中的表达igure 1: The expression levels of LDOC1 in colon cancer tissues and normal colon tiss LDOC1 在结肠癌细胞中表达呈显著下降通过 RT-PCR 的方法，我们检测了 LDOC1 在 4 株结肠癌细胞中的表达显示相对于正常结肠组织，LDOC1mRNA 在结肠癌细胞中表达呈显著下.05，图 2）。

重庆医科大学硕士研究生学位论文3.3 慢病毒转染效率的验证通过慢病毒感染构建了稳定表达 LDOC1 的结肠癌细胞株（HCT-116、Caco2），分别提取两株细胞的总 mRNA 和总蛋白，通过 RT-PCR 和 Western-bolt 实验验证慢病毒的转染效率。结果显示，相较于对照组（Lv-NC），实验组（Lv-LDOC1）的 LDOC1mRNA 和蛋白表达明显上调(*P＜0.05，**P＜0.01，图 3 A-B)。


本文编号：3312148