Tet-on调控BMP-2基因表达的腺病毒载体构建

发布时间：2021-07-31 23:02

　　目的构建Tet-on调控BMP-2基因腺病毒载体,并对其相关指标进行鉴定,为骨质疏松性骨折的基因治疗提供新的方法。方法以含有目的基因的pDC315-BMP-2质粒为模板,将目的基因克隆至pAdenoX-Tet-On 3G Vector中,构建pAdenoBMP-2-Tet-On表达质粒。将构建的pAdenoBMP-2-Tet-On表达质粒转染Adeno-X 293细胞,完成腺病毒扩增,PCR鉴定扩增产物,并利用Adeno-X Rapid Titer Kit检测病毒滴度。结果酶切及PCR结果显示BMP-2被成功导入Tet-on腺病毒载体中,并成功转染Adeno-X 293细胞,包装及扩增后得到Tet-on调控BMP-2基因的腺病毒载体,滴度为1x1010ifu/ml。结论成功构建了Tet-on调控BMP-2基因的腺病毒载体。 

【文章来源】：江西医药. 2020,55(12)

【文章页数】：4 页

【部分图文】：

对p DC315-BMP-2质粒酶切后成功获得1233bp BMP-2基因片段（产物1)

Pac I酶消化后得到特征DNA条带

CTG083-P4 Adenovirus (2014.01.02),1000ul,6x109ifu/ml图4 重组腺病毒转染细胞后，培养1周取细胞裂解产物行3%琼脂凝胶电泳，表明重组腺病毒所含目的基因成功转入细胞内

【参考文献】：
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本文编号：3314342