意大利蜜蜂amPGAM2基因的克

发布时间：2021-08-04 06:50

　　【目的】磷酸甘油酸变位酶（PGAM）是糖酵解和葡萄糖异生途径中一种发挥重要作用的蛋白酶,本研究拟明确amPGAM2基因的序列特征及表达模式。【方法】以意大利蜜蜂Apismellifera为研究对象,克隆了amPGAM2基因的cDNA序列,分析了其序列特征及其在工蜂、雄蜂、蜂王的不同发育时期的表达模式。【结果】序列特征分析表明,克隆所得序列全长976 bp,包含1个完整的开放阅读框,共编码254个氨基酸。该基因核苷酸序列与中华蜜蜂Apiscerana（98.4%）高度相似,并存在15个潜在抗原表位、9个磷酸化位点和5个组氨酸磷酸酶域活性部位,属于组氨酸磷酸酶超家族,是一种二磷酸甘油酸依赖性的可溶中性稳定蛋白。荧光定量PCR结果表明,amPGAM2基因在不同品级、不同发育时期的表达差异显著（P<0.05）。工蜂卵期3日龄、幼虫期5日龄表达最高,雄蜂成虫期表达最高,蜂王幼虫期4日龄表达最高,且工蜂、雄蜂及蜂王由卵孵化成幼虫阶段和由红眼蛹羽化至成虫阶段,其表达都呈上升趋势。【结论】本研究结果推测amPGAM2基因在卵的孵化及精卵发生过程中具有重要作用,为进一步认识意大利蜜蜂生殖发育过程中... 

【文章来源】：应用昆虫学报. 2020,57(04)北大核心CSCD

【文章页数】：9 页

【部分图文】：

意大利蜜蜂amPGAM2基因PCR扩增结果

利用DNAstar软件将amPGAM2基因核苷酸序列与其他同源物种核苷酸序列进行同源性分析,发现其与中华蜜蜂Apis cerana、大蜜蜂Apis dorsata、小蜜蜂Apis florea、美洲熊蜂Bombus impatiens、欧洲熊蜂Bombus terrestris、苜蓿切叶峰Megachile rotundata、墨西哥兰花蜂Eufriesea mexicana、回条蜂Habropoda laboriosa和梭鱼草蜂Dufourea novaeangliae等物种的序列相似度分别为98.4%、97.6%、96.1%、88.1%、87.8%、87.5%、86.8%、85.9%和83.7%，将各个物种的PGAM2基因核苷酸序列进行多序列比对，并使用MEGA6.0软件构建系统进化树，发现amPGMA2基因在分子进化上首先与中华蜜蜂聚为一支，然后与大蜜蜂和小蜜蜂聚在一起（图2）。2.4 意大利蜜蜂amPGAM2理化性质分析

利用PredictProtein程序分析amPGAM2蛋白的二级结构，结果显示该蛋白可能存在α-螺旋（H)10个（42.13%），β-折叠（E)5个（11.02%），无规则卷曲（L）占46.85%，为混合组成型。通过SWISS-MODEL程序同源建模（模板：4emb.1.A；同源率55.56）预测蛋白三级结构，再经Rasmol软件处理，得出该蛋白三级结构（图3），图3中3个绿色区域为组氨酸磷酸酶催化核心活性部位（10R、11H、62R、187H、188G），且三级结构与二级结构预测结果相符。2.7 意大利蜜蜂amPGAM2蛋白B细胞抗原表位分析

【参考文献】：
期刊论文
[1]抑制糖酵解活性限制雄性原始生殖细胞的增殖[J]. 徐瑜珊,陈丽,王娜,臧春燕,彭凡珂,张军.  现代生物医学进展. 2019(10)
[2]荷斯坦牛TLR6基因CDS区的生物信息学分析[J]. 李强子,朱国强,刘吴鑫,刘丽霞,张丽.  江苏农业学报. 2016(03)
[3]SARS病毒基因组所编码的E蛋白的二级结构和B细胞表位预测[J]. 吕燕波,万瑛,吴玉章.  免疫学杂志. 2003(06)



本文编号：3321227