VEGF165、BMP2双基因转染SD大鼠BMSCs的实验研究

发布时间：2021-08-08 18:43

　　目的探究血管内皮生长因子165（VEGF165）、骨形态发生蛋白（BMP2）双基因转染SD大鼠骨髓基质干细胞（BMSCs）及其基因表达与体外成骨能力。方法提取SD大鼠胫骨骨髓,原代培养获得BMSCs并进行流式细胞学鉴定。通过脂质体（Lipofect-amine2000）介导VEGF165、BMP2基因转染SD大鼠BMSCs,并分为pIRES-hBMP2-hVEGF165转染组（双基因转染）、pIRES-hBMP2转染组（单基因转染）、pIREShVEGF165转染组（单基因转染）、空载转染组（空白对照）。采用四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法（MTT）、酶联免疫吸附试验、组织学染色方法评估基因转染BMSCs的增殖情况、基因表达及体外成骨能力。结果流式细胞鉴定培养的BMSCs表面Marker示CD44和CD90标志物阳性,CD34和CD45标志物为阴性,证实成功获取大鼠BMSCs。通过荧光显微镜观察各转染组BMSCs,24h后可见绿色荧光发出,表明转染成功。MTT结果显示:随着时间的延长,各转染组BMSCs细胞的数量呈上升趋势,与未转染BMSCs的相比,细胞数量峰值无明显差异,证实转染后BM... 

【文章来源】：重庆医学. 2020,49(20)

【文章页数】：6 页

【部分图文】：

pIRES-hBMP2-hVEGF165转染组转染后不同时间BMSCs免疫荧光

除空载转染组外，通过荧光显微镜观察转染后BMSCs，转染24h后，pIRES-hBMP2-hVEGF165转染组可见少量绿色荧光，证实转染成功；转染3d后，镜下荧光强度明显增强，转染率明显提高，见图1。图3 各转染组细胞BMP2蛋白水平

各转染组细胞BMP2蛋白水平

【参考文献】：
期刊论文
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本文编号：3330479