利用RNAi技术调控GhCAD1-A基因创制低酚棉材料

发布时间：2021-08-21 11:32

　　棉酚作为棉花的主要植保素之一,抵抗病虫害侵害的同时也对单胃动物和人具有毒害性。本研究利用RNAi技术结合种子特异启动子,降低杜松烯合酶GhCAD1-A基因在种子中的表达,可用于选育棉花种子低酚而植株其它组织棉酚含量正常的材料。此类棉花既可以控制病虫害的侵害,又可以消除棉酚对棉籽的抗营养作用,对充分利用棉籽副产品、增加人类植物营养来源具有积极意义。 

【文章来源】：中国棉花. 2020,47(07)

【文章页数】：8 页

【部分图文】：

T3转基因株系中Gh CAD1-A及相关基因的表达量检测

分别提取T3不同转基因植株的叶片、花萼、花蕾、花瓣4个组织中的棉酚，测定结果如图4所示，不同转基因植株中叶片、花萼、花蕾、花瓣4个组织的棉酚含量，与野生型Jin668相比并没有显著性降低。在同一单株的不同组织中，棉酚含量有比较大的差异，叶片和花萼中的棉酚含量最少，棉酚含量平均仅为0.3μg·mg-1，而花蕾和花瓣组织中棉酚含量较高，其中花瓣中的棉酚含量可达叶片棉酚含量的百倍。这种只降低种子中的棉酚含量而不影响其它组织棉酚含量的结果跟预期是一致的。2.4 转基因植株农艺性状考察

取6个T1转基因单株（R4-1、R4-5、R4-7、R7-3、R9-1、R12-1）的种子进行田间种植至T3，取6个T3转基因植株开花后35 d的胚珠和叶片组织，分别提取RNA，反转录成cDNA后通过qRT-PCR对转基因植株中的GhCAD1-A基因及其上游基因Gh FPS、下游基因Gh CYP706B1进行表达量的测定。结果如图2所示，在转基因植株的胚珠中GhCAD1-A及上游GhFPS基因表达量在干涉株系中表达量均显著降低（图2A―B）,下游GhCYP706B1基因表达量有一定程度的降低（图2C）。不同转化事件中干涉效果有所差异，且在同一转化事件的不同单株间干涉效果也存在一定的差异。而GhCAD1-A、Gh FPS、GhCYP706B1基因在转基因植株的叶片中均没有显著性降低（图2D―F），说明种子特异性启动子在转基因胚珠中发挥了作用。图2 T3转基因株系中Gh CAD1-A及相关基因的表达量检测

【参考文献】：
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本文编号：3355516