大白菜金黄叶色突变基因lcm2的克隆及鉴定
发布时间：2021-09-06 12:35
大白菜（Brassica rapa ssp.pekinensis）是中国种植面积最大的蔬菜作物。叶片是它的主要食用部分,而且叶片也是白菜进行光合作用的场所,所以对大白菜尤其是叶片的多种性状进行研究就显得尤为重要。随着白菜基因组序列的测序完成,为白菜功能基因组学的研究提供了大量可靠信息（Wang et al.,2011）,叶色突变体越来越多的应用于对基因功能的研究中,本文以通过EMS诱变所获得了一个大白菜叶片黄化突变体lcm2,在确定其稳定遗传后,对突变体与野生型的生理特性进行分析,利用改良的Mutmap技术,确定了突变位点,并克隆了相应的突变基因lcm2,利用转录组测序技术,对突变位点进行进一步的验证,找到可能参与叶片黄化的相关代谢通路,主要研究结果如下:1.大白菜黄化突变体lcm2在整个生长阶段均表现出叶色黄化这一特征,对二者体内的光合色素进行测定,发现lcm2中叶绿素以及类胡萝卜素含量显著降低,但不同时期突变体植株的干重较同时期的野生型相比能稍微偏低一些,并没有出现特别明显的光合能力减弱,能正常生长发育。2.对lcm2和FT植株的叶绿体结构进行观察,lcm2叶绿体发育异常,形状不规...
【文章来源】：沈阳农业大学辽宁省
【文章页数】：54 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
大白菜黄化突变体‘lcm1’和野生型‘FT’的外在形态观察图中a、b分别为黄化突变体‘lcm2’与野生型‘FT’
光适应下的最小荧光Fo'105.31±6.97 72.67±4.87*光适应下的最大荧光Fm'250.76±4.36 179.81±7.21*暗适应下 PSII 最大光化学效率Fv/Fm0.84±0.03 0.84±0.10光适应下 PSII 最大光化学效率Fv'/Fm'0.65±0.18 0.60±0.24光适应下 PSII 实际光化学效率ФPSII0.49±0.02 0.49±0.14光化学淬灭系数QP0.70±0.01 0.63±0.02非光化学淬灭系数NPQ0.65±0.03 0.54±0.04*注：* 表示t检验显著性水平＜0.05，**表示显著性水平＜0.01。Note: * indicates t-test significance level <0.05, ** indicates significance level <0.01.2.2.5 黄化突变体 lcm2 与野生型 FT 叶绿体超微结构如图 2-3 所示，野生型和突变体的叶绿体超微结构差异明显。左边野生型 FT 中叶绿体发育良好，类囊体堆积紧密，具有明显的基粒结构，但是突变体 lcm2 类囊体持为单个的原片层体（prolamellar body），无明显基粒结构存在。
章 大白菜叶片黄化突变基因的定位及候选基因中在该基因的 2801192 这一位点上发生单ATG,其编码的氨基酸从 V<->M。cm2 克隆测序验证周围特异性引物，结合高保真 Taq 扩增，位点（图 3-1），发现其克隆产物与野生突变体之间真实存在，验证了之前的pecific PCR）技术对定位群体单株进行基因型均为 AA，进一步验证定位结果。
【参考文献】：
期刊论文
[1]拟南芥盐敏感突变体EMS85的快速基因定位与分析[J]. 罗兰迪,关艳龙,柯学,胡向阳,孔祥翔. 云南大学学报(自然科学版). 2018(01)
[2]植物基因功能验证技术概述[J]. 杨诗怡,周小利,陈志芸,顾菁,廖菊够,陈穗云. 安徽农业科学. 2017(34)
[3]转录组学及其在蔬菜学上应用研究进展[J]. 廉洁,张喜春,谷建田. 中国农学通报. 2015(08)
[4]非模式生物转录组研究[J]. 刘红亮,郑丽明,刘青青,权富生,张涌. 遗传. 2013(08)
[5]烟草基因组知识篇:5.功能基因组学[J]. 李凤霞. 中国烟草科学. 2010(05)
[6]植物功能基因组学研究进展[J]. 常敬礼,郭玉双,杨德光,李丽文. 玉米科学. 2008(02)
[7]植物功能基因组学及其研究技术[J]. 崔兴国. 衡水学院学报. 2007(01)
[8]基因表达系列分析技术及其在植物抗病性研究中的应用[J]. 李星,李亚宁,杨文香,刘大群. 农业生物技术学报. 2006(05)
[9]水稻叶绿素合成缺陷突变体及其生物学研究进展[J]. 黄晓群,赵海新,董春林,孙业盈,王平荣,邓晓建. 西北植物学报. 2005(08)
[10]黄化西瓜叶片叶绿体结构与光合作用特性[J]. 张建农,满艳萍,燕丽萍. 果树学报. 2004(01)
博士论文
[1]小孢子培养结合诱变处理创制大白菜突变体及其功能基因组学研究[D]. 黄胜楠.沈阳农业大学 2016
[2]小麦黄绿突变体特性研究与遗传分析[D]. 李宁.中国农业科学院 2012
[3]三个水稻叶色突变体的鉴定与基因克隆[D]. 刘文真.浙江大学 2006
硕士论文
[1]基于转录组测序的枣成花和果实品质重要基因的研究[D]. 魏琦琦.中南林业科技大学 2017
[2]青梗菜黄化突变体生理特性及转录组分析[D]. 迟鸣雨.沈阳农业大学 2017
[3]水稻黄绿叶突变体ygl13的鉴定和候选基因分析[D]. 王亚琴.西南大学 2016
[4]西藏野生大麦产量与农艺性状的相关分析与大麦叶色黄化突变体的基因定位[D]. 李志勇.浙江大学 2016
[5]全生育期整株黄化玉米新材料的遗传分析及其基因定位[D]. 汪宏维.四川农业大学 2014
[6]芝麻突变体的诱发及黄化突变体遗传规律的研究[D]. 尤超.南京农业大学 2013
[7]水稻黄化突变体jw22的遗传特性和基因定位[D]. 朱成强.南京农业大学 2010
[8]一个玉米叶色突变体的遗传研究[D]. 陈甲法.河南农业大学 2009
[9]一份新的水稻黄化突变体的遗传分析及基因定位[D]. 黄晓群.四川农业大学 2006
本文编号：3387472
【文章来源】：沈阳农业大学辽宁省
【文章页数】：54 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
大白菜黄化突变体‘lcm1’和野生型‘FT’的外在形态观察图中a、b分别为黄化突变体‘lcm2’与野生型‘FT’
光适应下的最小荧光Fo'105.31±6.97 72.67±4.87*光适应下的最大荧光Fm'250.76±4.36 179.81±7.21*暗适应下 PSII 最大光化学效率Fv/Fm0.84±0.03 0.84±0.10光适应下 PSII 最大光化学效率Fv'/Fm'0.65±0.18 0.60±0.24光适应下 PSII 实际光化学效率ФPSII0.49±0.02 0.49±0.14光化学淬灭系数QP0.70±0.01 0.63±0.02非光化学淬灭系数NPQ0.65±0.03 0.54±0.04*注：* 表示t检验显著性水平＜0.05，**表示显著性水平＜0.01。Note: * indicates t-test significance level <0.05, ** indicates significance level <0.01.2.2.5 黄化突变体 lcm2 与野生型 FT 叶绿体超微结构如图 2-3 所示，野生型和突变体的叶绿体超微结构差异明显。左边野生型 FT 中叶绿体发育良好，类囊体堆积紧密，具有明显的基粒结构，但是突变体 lcm2 类囊体持为单个的原片层体（prolamellar body），无明显基粒结构存在。
章 大白菜叶片黄化突变基因的定位及候选基因中在该基因的 2801192 这一位点上发生单ATG,其编码的氨基酸从 V<->M。cm2 克隆测序验证周围特异性引物，结合高保真 Taq 扩增，位点（图 3-1），发现其克隆产物与野生突变体之间真实存在，验证了之前的pecific PCR）技术对定位群体单株进行基因型均为 AA，进一步验证定位结果。
【参考文献】：
期刊论文
[1]拟南芥盐敏感突变体EMS85的快速基因定位与分析[J]. 罗兰迪,关艳龙,柯学,胡向阳,孔祥翔. 云南大学学报(自然科学版). 2018(01)
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[7]植物功能基因组学及其研究技术[J]. 崔兴国. 衡水学院学报. 2007(01)
[8]基因表达系列分析技术及其在植物抗病性研究中的应用[J]. 李星,李亚宁,杨文香,刘大群. 农业生物技术学报. 2006(05)
[9]水稻叶绿素合成缺陷突变体及其生物学研究进展[J]. 黄晓群,赵海新,董春林,孙业盈,王平荣,邓晓建. 西北植物学报. 2005(08)
[10]黄化西瓜叶片叶绿体结构与光合作用特性[J]. 张建农,满艳萍,燕丽萍. 果树学报. 2004(01)
博士论文
[1]小孢子培养结合诱变处理创制大白菜突变体及其功能基因组学研究[D]. 黄胜楠.沈阳农业大学 2016
[2]小麦黄绿突变体特性研究与遗传分析[D]. 李宁.中国农业科学院 2012
[3]三个水稻叶色突变体的鉴定与基因克隆[D]. 刘文真.浙江大学 2006
硕士论文
[1]基于转录组测序的枣成花和果实品质重要基因的研究[D]. 魏琦琦.中南林业科技大学 2017
[2]青梗菜黄化突变体生理特性及转录组分析[D]. 迟鸣雨.沈阳农业大学 2017
[3]水稻黄绿叶突变体ygl13的鉴定和候选基因分析[D]. 王亚琴.西南大学 2016
[4]西藏野生大麦产量与农艺性状的相关分析与大麦叶色黄化突变体的基因定位[D]. 李志勇.浙江大学 2016
[5]全生育期整株黄化玉米新材料的遗传分析及其基因定位[D]. 汪宏维.四川农业大学 2014
[6]芝麻突变体的诱发及黄化突变体遗传规律的研究[D]. 尤超.南京农业大学 2013
[7]水稻黄化突变体jw22的遗传特性和基因定位[D]. 朱成强.南京农业大学 2010
[8]一个玉米叶色突变体的遗传研究[D]. 陈甲法.河南农业大学 2009
[9]一份新的水稻黄化突变体的遗传分析及基因定位[D]. 黄晓群.四川农业大学 2006
本文编号：3387472
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