ARAF基因沉默对胆囊癌恶性表型的影响

发布时间：2021-09-06 21:02

　　目的:明确胆囊癌与正常胆囊中ARAF基因的表达差异,探讨该基因对胆囊肿瘤恶性表型的调控作用,为临床治疗该疾病提供新的理论依据。临床资料与方法:连续收集绍兴市人民医院2018年2月至9月经病理学检查证实的胆囊癌患者肿瘤组织及胆囊息肉患者息肉旁正常胆囊组织各12例。以RT-qPCR及Western blot检测两组组织中ARAF mRNA和编码蛋白的表达水平。构建ARAF siRNA组和siRNA control组胆囊癌细胞,以细胞增殖实验、增殖细胞核抗原蛋白（PCNA）检测、集落形成实验验证ARAF对其增殖能力的调控作用;以划痕实验、transwell实验验证ARAF对其迁移、侵袭能力的调控作用;以化疗耐药实验验证ARAF对其化疗敏感性的影响。最后通过建立移植瘤动物模型,研究在体条件下,ARAF异常表达对胆囊癌生长的影响。对实验数据行Student’st-检验,比较统计学差异。结果:实验结果显示,胆囊癌组织中ARAF mRNA表达水平与A-Raf蛋白含量显著高于非肿瘤组织（P<0.05）。相较siRNA control组,ARAF siRNA可有效降低胆囊癌细胞的增殖能力、PCNA... 

【文章来源】：浙江大学浙江省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

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【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图１?基因在胆囊癌组织和细胞系中表达上调

２Ａ－Ｂ），即可证明ｄ／＾ＩＦｓｉＲＮＡ可有效沉默胆囊癌细胞中的基因，使其表达??下调，细胞模型构建成功。??如图２Ｃ－Ｄ所示，ＣＣＫ－８测定显示Ｊ／ＭＦｓｉＲＮＡ组的细胞活力在４８小时后逐??渐弱于ｓｉＲＮＡｃｏｎｔｒｏ丨组，反应其增殖速度相对减缓，这说明基因表迗下调??可导致胆囊癌细胞系增殖能力的减弱，且统计学分析显示存在明显差异。同时，??与ＵＦｓｉＲＮＡ组相比，ｓｉＲＮＡ?ｃｏｎｔｒｏｌ组的增殖细胞梭抗原蛋白（ＰＣＮＡ）表达量??相对更高（图２Ｅ），同样说明该组细胞的增殖状态更加良好。??Ａ??＊?ＡＲＡＦｓｉＲＮＡ??？?ｆｔｉ－ｃｏｎｔｒｏｌ??Ｉ?１５１?？?？??ｓ?？?Ｂ??Ｉ１０?？“?？？?ＧＢＣ－ＳＤ?ＳＧＣ－９９６??ａ?一＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿??＜?ｏｓ?？．?ｓｉＲＮＡ?ｓｉ－ｃｏｎｔｒｏｌ?ｓｉＲＮＡ?ｓｉ－ｃｏｎｔｒｏｌ??ＳｊＡ－Ｒａｆ?參｜??￡?ＧＢＣ－ＳＤ?ＳＧＣ．Ｓ９６?６８ＫＤ??????ｒ?Ｐ－

图３?表迗下调抑制胆囊癌细胞的集落形成能力

【参考文献】：
期刊论文
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本文编号：3388168