青鱼nanog和oct4基因的鉴定及青鳉肌肉细胞系的建立
发布时间：2021-09-11 18:48
作为“四大家鱼”之首,青鱼（Mylopharyngodon piceus）是我国主要的养殖品种之一,具有重要的经济价值和科研意义。目前,有关青鱼的研究主要集中在人工养殖、营养与饲料和疾病防控等方向而缺乏分子水平上的一些基础研究数据。诱导多功能干细胞（iPS）是一类具有无限自我更新能力且能在特定条件下定向分化的细胞,Nanog和Oct4基因是哺乳动物中维持胚胎干细胞多能性以及自我更新能力的关键性基因,也是成功诱导多功能干细胞的关键因子。为了成功诱导鱼类iPS,本研究分离和鉴定了青鱼nanog和oct4基因及nanog上游启动子序列,初步分析了它们的基因结构、在不同成体组织和早期胚胎发育中的表达模式,证明了它们的表达模式有别于哺乳动物,具有母源性表达特征。此外,本研究还建立了青鳉肌肉细胞系（OLM）,分析和鉴定了它的基本生物学特征,并且通过荧光素酶实验测定了不同区段nanog启动子在OLM中的活性。其主要研究结果如下:1)Mpnanog基因组DNA（genomic DNA,gDNA）全长3295 bp,cDNA全长1550 bp,包括4个外显子,预计编码具有390个氨基酸残基的蛋白;多物种...
【文章来源】：华中农业大学湖北省 211工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：81 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
Mpnanog基因的核苷酸与氨基酸序列
青鱼 nanog 和 oct4 基因的鉴定及青鳉肌肉细胞系的建立以青鱼基因组 DNA 为模板获得全长 3276 bp 的 nanog gDNA 序列，GenBank上登录号为 MF280403，共包含 4 个外显子和 3 个内含子，内含子与外显子交界处均符合 GT-AG 规则。除了基因组大小不同，青鱼 gDNA 的基本结构与各部分长度比例与其它已知物种的 Nanog gDNA 均保持一致，且 HD 所在的位置也都横跨第二个和第三个外显子（图 2-2）。
26图 2-3 多物种 Nanog 蛋白序列比对相同氨基酸显示蓝色，HD 结构域由黑色方框标识，NLS 由黄色方框标识，相较于团头鲂多出的四个氨基酸 PAPS 由红色方框标识，物种名、序列号、蛋白大小、全长和 HD 一致性比对结果在右侧列出Fig 2-3. Multiple sequence alignment of Nanog proteinsIdentical residues are indicated in dark blue, the Hox domain, putative nuclear localizationsignal and additional 12 bp encoding 4 amino acids (PAPS) are noted with black, yellow and redframes, respectively. The species’name, accession numbers, protein size and identity scores of FLand HD are represented on the right
【参考文献】：
期刊论文
[1]青鱼人工繁殖技术[J]. 戴志华,刘湘香. 湖南农业. 2017(11)
[2]青鱼无公害养殖技术[J]. 徐世春,唐玉华. 水产养殖. 2017(09)
[3]Establishment and characterization of a testicular Sertoli cell line from olive flounder Paralichthys olivaceus[J]. 彭丽敏,郑媛,尤锋,吴志昊,邹玉霞,张培军. Chinese Journal of Oceanology and Limnology. 2016(05)
[4]青鱼营养需求研究进展[J]. 张澜澜. 黑龙江水产. 2016(02)
[5]青鱼鱼病概况及其防治策略[J]. 吴宇略. 渔业致富指南. 2010(21)
[6]Functional analysis of two Sp1/Sp3 binding sites in murine Nanog gene promoter[J]. Da Yong Wu Zhen Yao Laboratory of Molecular Cell Biology,Laboratory of Stem Cell Biology,Institute of Biochemistry and Cell Biology,Shanghai Institutes for Biological Sciences,Chinese Academy of Sciences 320 Yue Yang Road,Shanghai 200031,China. Cell Research. 2006(03)
[7]Identification of two distinct transactivation domains in the pluripotency sustaining factor nanog[J]. GUANG Jin PAN, DUAN QING PEI Institute of Pharmacology, Department of Biological Sciences and Biotechnology and State Key Labora tory of Biomembrane and Membrane Biotechnology, Tsinghua Institutes of Biomedicine, Tsinghua University, 100084 Beijing, China. E-mail: duanqing@aol.comDepartment of Pharmacology, University of Minnesota, Minneapolis, MN55455, USA. Cell Research. 2003(06)
本文编号：3393525
【文章来源】：华中农业大学湖北省 211工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：81 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
Mpnanog基因的核苷酸与氨基酸序列
青鱼 nanog 和 oct4 基因的鉴定及青鳉肌肉细胞系的建立以青鱼基因组 DNA 为模板获得全长 3276 bp 的 nanog gDNA 序列，GenBank上登录号为 MF280403，共包含 4 个外显子和 3 个内含子，内含子与外显子交界处均符合 GT-AG 规则。除了基因组大小不同，青鱼 gDNA 的基本结构与各部分长度比例与其它已知物种的 Nanog gDNA 均保持一致，且 HD 所在的位置也都横跨第二个和第三个外显子（图 2-2）。
26图 2-3 多物种 Nanog 蛋白序列比对相同氨基酸显示蓝色，HD 结构域由黑色方框标识，NLS 由黄色方框标识，相较于团头鲂多出的四个氨基酸 PAPS 由红色方框标识，物种名、序列号、蛋白大小、全长和 HD 一致性比对结果在右侧列出Fig 2-3. Multiple sequence alignment of Nanog proteinsIdentical residues are indicated in dark blue, the Hox domain, putative nuclear localizationsignal and additional 12 bp encoding 4 amino acids (PAPS) are noted with black, yellow and redframes, respectively. The species’name, accession numbers, protein size and identity scores of FLand HD are represented on the right
【参考文献】：
期刊论文
[1]青鱼人工繁殖技术[J]. 戴志华,刘湘香. 湖南农业. 2017(11)
[2]青鱼无公害养殖技术[J]. 徐世春,唐玉华. 水产养殖. 2017(09)
[3]Establishment and characterization of a testicular Sertoli cell line from olive flounder Paralichthys olivaceus[J]. 彭丽敏,郑媛,尤锋,吴志昊,邹玉霞,张培军. Chinese Journal of Oceanology and Limnology. 2016(05)
[4]青鱼营养需求研究进展[J]. 张澜澜. 黑龙江水产. 2016(02)
[5]青鱼鱼病概况及其防治策略[J]. 吴宇略. 渔业致富指南. 2010(21)
[6]Functional analysis of two Sp1/Sp3 binding sites in murine Nanog gene promoter[J]. Da Yong Wu Zhen Yao Laboratory of Molecular Cell Biology,Laboratory of Stem Cell Biology,Institute of Biochemistry and Cell Biology,Shanghai Institutes for Biological Sciences,Chinese Academy of Sciences 320 Yue Yang Road,Shanghai 200031,China. Cell Research. 2006(03)
[7]Identification of two distinct transactivation domains in the pluripotency sustaining factor nanog[J]. GUANG Jin PAN, DUAN QING PEI Institute of Pharmacology, Department of Biological Sciences and Biotechnology and State Key Labora tory of Biomembrane and Membrane Biotechnology, Tsinghua Institutes of Biomedicine, Tsinghua University, 100084 Beijing, China. E-mail: duanqing@aol.comDepartment of Pharmacology, University of Minnesota, Minneapolis, MN55455, USA. Cell Research. 2003(06)
本文编号：3393525
本文链接：https://www.wllwen.com/kejilunwen/jiyingongcheng/3393525.html
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