日本三角涡虫SoxB家族基因的功能研究
发布时间：2021-09-17 17:56
日本三角涡虫（Dugesia japonica）隶属扁形动物门（Platyhelminthes）,涡虫纲（Turbellaria）,在动物系统演化中占有重要地位,并且具有极强的损伤修复及再生能力。但到目前为止,其再生机制并不清楚。本实验利用生物信息学、原位杂交、RNAi以及qPCR技术,分析了DjSoxB1、DjSoxB2和DjSoxB3推导的蛋白结构、表达模式和功能,结果如下:利用生物信息学分析了DjSoxB1、DjSoxB2和DjSoxB3推导的氨基酸的结构和进化地位,结果显示:DjSoxB1、DjSoxB2和DjSoxB3属于SOXB亚家族且是不稳定的亲水性蛋白。DjSoxB1、DjSoxB2和DjSoxB3不仅含有SOX家族高度保守的HMG-box区域和标志性基序RPMNAFMVW,而且在HMG-box区域后面还包括8个SoxB亚家族的特征性序列标签。其中,DjSoxB2的特征基序与高等脊椎动物同源性较高且包含了一部分SoxP结构域。整体原位杂交及再生过程中qPCR结果显示:DjSoxB1、DjSoxB2和DjSoxB3基因在整体涡虫身体两侧的实质组织和再生片段的再生芽基处有较...
【文章来源】：河南师范大学河南省
【文章页数】：101 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
涡虫中枢神经结构模式图（右侧为眼点放大图，引自Lapanetal，2012）
图 1-2 涡虫脑再生的前期过程Fig 1-2 The early process of brain regeneration in planarians虫再生研究进展生现象虽然在自然界广泛存在，但主要存在一些低等的无脊椎动物，如水螅被可以再生出完整的个体。脊椎动物包括人类在内仅能实现在一定条件下某些器，如蝾源(newts)断肢后具有再生能力，当人类肝脏被部分切除后依靠残存的肝可以再生[11]。虽然发现许多动物也有或强或弱的再生能力，但到目前为止，没一类动物能与涡虫的再生能力相比[12]。涡虫再生的主要原因是其体内存在多能干细胞（neoblasts）[13]，并且均匀分布于除中枢神经系统和咽以外的所有中。与整体涡虫相比，再生涡虫的伤口处产生伤口信号诱导 neoblasts 的增殖和一步迁移至损伤部位[14]。和其它细胞相比，neoblasts 的主要特征是：体积较形，细胞核很大，细胞质少且有许多游离核糖体，而这些特征与脊椎动物干细
图 2-1 实验技术路线Figure 2-1 Technical route in this experimental角涡虫总 RNA 的提取 条健康的日本三角涡虫于 20℃的恒温培养箱中，饥饿处理 2 涡虫用于总 RNA 的提取。对总 RNA 进行电泳和 OD 值检测条带无降解，无拖带；OD 值介于 1.8-2.2 之间）RNA 进行反转录 cDNA 质量。琼脂糖凝胶电泳后，能出现单一清晰、大小正确带为可用模板。具体步骤见程方方博士论文[54]。NA 模板、3′-cDNA 模板以及一般反转录模板的制备方法参考程方方博士论文[54]。
【参考文献】：
期刊论文
[1]Sox基因家族特点及其功能[J]. 曹慧慧,王昌留. 鲁东大学学报(自然科学版). 2011(01)
博士论文
[1]日本三角涡虫Neurotrophin信号通路关键基因及flotillins基因的克隆及功能分析[D]. 程方方.河南师范大学 2016
[2]离子液体溴化1-辛基-3-甲基咪唑（[C8mim]Br]）对日本三角涡虫的毒性作用研究[D]. 石长应.河南师范大学 2015
硕士论文
[1]日本三角涡虫Spsb基因的克隆及表达分析[D]. 陈静.河南师范大学 2016
本文编号：3399227
【文章来源】：河南师范大学河南省
【文章页数】：101 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
涡虫中枢神经结构模式图（右侧为眼点放大图，引自Lapanetal，2012）
图 1-2 涡虫脑再生的前期过程Fig 1-2 The early process of brain regeneration in planarians虫再生研究进展生现象虽然在自然界广泛存在，但主要存在一些低等的无脊椎动物，如水螅被可以再生出完整的个体。脊椎动物包括人类在内仅能实现在一定条件下某些器，如蝾源(newts)断肢后具有再生能力，当人类肝脏被部分切除后依靠残存的肝可以再生[11]。虽然发现许多动物也有或强或弱的再生能力，但到目前为止，没一类动物能与涡虫的再生能力相比[12]。涡虫再生的主要原因是其体内存在多能干细胞（neoblasts）[13]，并且均匀分布于除中枢神经系统和咽以外的所有中。与整体涡虫相比，再生涡虫的伤口处产生伤口信号诱导 neoblasts 的增殖和一步迁移至损伤部位[14]。和其它细胞相比，neoblasts 的主要特征是：体积较形，细胞核很大，细胞质少且有许多游离核糖体，而这些特征与脊椎动物干细
图 2-1 实验技术路线Figure 2-1 Technical route in this experimental角涡虫总 RNA 的提取 条健康的日本三角涡虫于 20℃的恒温培养箱中，饥饿处理 2 涡虫用于总 RNA 的提取。对总 RNA 进行电泳和 OD 值检测条带无降解，无拖带；OD 值介于 1.8-2.2 之间）RNA 进行反转录 cDNA 质量。琼脂糖凝胶电泳后，能出现单一清晰、大小正确带为可用模板。具体步骤见程方方博士论文[54]。NA 模板、3′-cDNA 模板以及一般反转录模板的制备方法参考程方方博士论文[54]。
【参考文献】：
期刊论文
[1]Sox基因家族特点及其功能[J]. 曹慧慧,王昌留. 鲁东大学学报(自然科学版). 2011(01)
博士论文
[1]日本三角涡虫Neurotrophin信号通路关键基因及flotillins基因的克隆及功能分析[D]. 程方方.河南师范大学 2016
[2]离子液体溴化1-辛基-3-甲基咪唑（[C8mim]Br]）对日本三角涡虫的毒性作用研究[D]. 石长应.河南师范大学 2015
硕士论文
[1]日本三角涡虫Spsb基因的克隆及表达分析[D]. 陈静.河南师范大学 2016
本文编号：3399227
本文链接：https://www.wllwen.com/kejilunwen/jiyingongcheng/3399227.html
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