结缕草转录因子基因ZjDREB 1.4功能研究

发布时间：2021-09-19 03:40

　　高温、低温、干旱和高盐等非生物胁迫是影响草坪种植和观赏性的重要因素,因而非生物胁迫抗性及其机制一直是草坪草研究的重要内容。结缕草属（Zoysia Willd.）是我国重点开发的暖季型草种之一,具有抗旱、耐热、耐盐碱、抗病等特点,其抗逆性的分子机制有待深入研究。植物转录因子DREB（Dehydration responsive element binding）与多种非生物胁迫响应密切相关,通过激活多个抗逆相关基因的表达使植物获得抗逆能力。结缕草DREB转录因子的功能尚未有系统的研究报道。本研究以日本结缕草’Meyer’（Zoysia japonica Steud.）为材料对DREB类转录因子基因ZjDREB1.4开展研究,主要研究结果如下:（1）ZjDREB1.4基因编码区长681 bp,无内含子,推测编码226个氨基酸,含有一个AP2结构域,其上下游具有DREB转录因子A-1亚组的典型特征序列。在禾本科植物DREB1同源基因的系统进化树中,ZjDREB1.4基因属于在暖季型植物中得到选择性扩张的Ⅲa分支。根据qRT-PCR分析结果,ZjDREB1.4基因的表达受高温、低温和干旱胁迫诱导... 

【文章来源】：中央民族大学北京市 211工程院校 985工程院校

【文章页数】：88 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图１－１研究技术流程图??Ｆｉｇ．?１－１?Ｔｈｅ?ｆｌｏｗｔｈａｒｔ?ｏｆ?ｒｅｓｅａｒｃｈ??

Ｍ：?ＤＬ２０００Ｍａｒｋｅｒ；ａ：基因扩增结果，１：模板为ｃＤＮＡ；２：模板为基因组ＤＮＡ；?ｂ：菌液ＰＣＲ结果：??＼－４：?ＺｊＤＲＥＢＵ?基面??结缕草冷基因编码区全长为６８１个碱基，推测编码２２６个氨基酸（图２－２），??其中含量最高的两种氨基酸分别是甘氨酸（Ｇｌｙ?３５．４％）和半胱氨酸（Ｃｙｓ?３５．１％），蛋白??分子式为Ｃｉ９０ｇＨ３１２ｉＮ６８１〇７８〇Ｓ２３９，相对分子量大小为２４．６ｋＤａ，等电点为４．９，不稳定指数为??５０．６８?（＞４０），总平均疏水指数为０．９０７，推测为不稳定的疏水性蛋白。ＮＣＢＩ保守结构域??在线预测结果表明，该基因编码的蛋白有一个保守的ＡＰ２结构域（Ｅ－ＶａｌｕｅｉＳＡＳｅ－１１），在??其上、下游含有ＤＲＥＢ１类基因的特征性序列ＰＫＫＰＡＧＲＴＫＦＲＥＴＲＨ和ＤＳＡＷ，因而属于??中的Ａ－１亚组。??１７??

?１Ｇ０?１５０??图２－３?ＺｊＤＲＥＢ１．４蛋白二级结构预测??Ｆｉｇ．?２－３?Ｔｈｅ?ｐｒｅｄｉｃｔｅｄ?ｓｅｃｏｎｄａｒｙ?ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ?ｏｆ?ＺｊＤＲＥＢ?１．４??横坐标代表氨基酸所在位置；长竖线为ａ－螺旋，中长竖线为０－折叠片，短竖线为无规则卷曲。??Ｃ?端Ｃ－ｔｅｒｍｉｎａｌ?Ｖ???ｊ?Ｎ?端Ｎ－ｔｅｒｍｉｎａｉ??图２－４?ＺｊＤＲＥＢ１．４蛋白三级结构模型预测??Ｆｉｇ．?２－４?Ｔｈｅ?ｐｒｅｄｉｃｔｅｄ?ｔｅｒｔｉａｒｙ?ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ?ｏｆ?ＺｊＤＲＥＢ１．４??虚线框内为ＡＰ２结构域??３．２?ＺｊＤＲＥＢ１．４的系统进化分析??为进一步研究ＺｙＴ）狀５／．？／在ＤＲＥＢ１家族中的系统进化地位，按照ＤＲＥＢ１组的分类特??征［９３】，筛选出来自于玉米、水稻、高梁、小米、小麦、大麦和短柄草等７种植物（表２－２）??的ＤＲＥＢ１同源基因的氨基酸序列，利用ＭＥＧＡ７．０软件对包括基因在内的９１??个基因的全长序列构建系统进化树。如图２－５所示，禾本科植物中的ＤＲＥＢ１同源物被分为??１１个单系分支，１０个分支与Ｂａｄａｗｉ文章中的分类一致，其中水稻的和??ＣＷＭ五５Ａ７基因与玉米ＺｍＤ狀５７．６、高粱劭Ｃ５Ｆ９基因共同组成第Ｈ个分支，名为ＣＢＦ??Ｖ。狀５／．＊／基因被分配到ＤＲＥＢ１家族的Ｉｌｉａ分支中


本文编号：3400939