Twinfilin-1基因对H9C2心肌细胞凋亡和增殖的影响

发布时间：2021-09-22 11:44

　　目的探究Twinfilin-1（Twf-1）基因对H9C2心肌细胞凋亡和增殖的影响。方法构建Twf-1 siRNA、pCXN2-Flag空质粒、pCXN2-Flag-h Twf-1过表达质粒,将实验用H9C2心肌细胞分为5组,即空白对照组、阴性对照组、Twf-1沉默组、Twf-1沉默+空质粒组、Twf-1沉默+过表达Twf-1组,分别用空白试剂、Twf-1 siRNA慢病毒、Twf-1 siRNA慢病毒+pCXN2-Flag空质粒、Twf-1 siRNA慢病毒+pCXN2-Flag-h Twf-1过表达质粒转染H9C2心肌细胞。转染72 h后,采用荧光定量聚合酶链式反应（RT-PCR）检测目的基因Twf-1表达情况,采用CCK8检测不同组别心肌细胞增殖情况,采用流式细胞术检测心肌细胞凋亡情况。结果荧光显微镜下可见慢病毒转染48 h后,阴性对照组和Twf-1沉默组80%以上细胞均有绿色荧光标记。与空白对照组和阴性对照组相比,Twf-1沉默组、Twf-1沉默+空质粒组心肌细胞中Twf-1基因的表达水平及细胞增殖率均明显降低（P<0.05）,心肌细胞凋亡率均明显增加（P<0.05... 

【文章来源】：中西医结合心脑血管病杂志. 2020,18(23)

【文章页数】：5 页

【部分图文】：

H9C2心肌细胞慢病毒感染情况(×100)

RT-PCR结果显示,进行慢病毒转染后,与空白对照组和阴性对照组相比,Twf-1沉默组、Twf-1沉默+空质粒组心肌细胞中Twf-1基因的表达水平均明显降低(P<0.05),Twf-1沉默+过表达Twf-1组心肌细胞中Twf-1基因的表达水平则明显增加,组间差异有统计学意义(P<0.05)。详见图2。2.3 各组心肌细胞增殖情况比较

流式细胞凋亡实验结果显示,与空白对照组和阴性对照组相比,Twf-1沉默组、Twf-1沉默+空质粒组心肌细胞凋亡率均明显增加(P<0.05),Twf-1沉默+过表达Twf-1组心肌细胞凋亡率与空白对照组和阴性对照组比较差异无统计学意义,且与Twf-1沉默组、Twf-1沉默+空质粒组相比则明显降低,组间差异具有统计学意义(P<0.05)。详见图4、图5。图4 各组心肌细胞凋亡率比较

【参考文献】：
期刊论文
[1]COX-2基因通过Notch信号通路介导心肌细胞过度凋亡的机制研究[J]. 李晓鹃,胡鹏,张凯.  南昌大学学报(医学版). 2018(06)
[2]miR-92a对H9C2心肌细胞增殖、凋亡及Wnt信号通路的影响[J]. 厉菁,袁义强,张宇,张华,张传西,宣学习,王明杰.  中国老年学杂志. 2018(10)
[3]GLP-1对AGEs诱导H9C2心肌细胞凋亡的保护作用研究[J]. 张军,谷翔,黄问银,张普华,殷嫦嫦,于欢,张义平,王丽丽,李卫东.  中国药理学通报. 2017(01)
[4]Sirtuin3减少心肌细胞钙超载时细胞色素C的释放并抑制细胞凋亡[J]. 叶璐,杨双强.  细胞与分子免疫学杂志. 2015(08)

硕士论文
[1]肌动蛋白结合蛋白Twinfilin-1在血管平滑肌细胞迁移中的作用及软脉灵对Twinfilin-1的影响[D]. 高若男.福建医科大学 2015



本文编号：3403705