低强度超声联合载HSV 1 -TK/GCV自杀基因阳离子微泡对高强度聚焦超声不完全消融后残余肝癌细胞的抑制作用

发布时间：2021-10-08 02:55

　　目的探讨载单纯疱疹病毒Ⅰ型胸苷激酶/更昔洛韦（HSV1-TK/GCV）自杀基因的阳离子微泡联合低强度超声对高强度聚焦超声（HIFU）辐照后残留肝癌SMCC-7721细胞的抑制作用。方法以低功率HIFU辐照肝癌SMCC-7721细胞,选取最佳残存细胞亚系并稳定培养。通过低强度超声辐照载TK基因的阳离子微泡转染细胞。分为对照组（残余癌）、残余癌+超声+TK/GCV组、残余癌+微泡+TK/GCV组及残余癌+微泡+超声+TK/GCV组。以Western Blot法检测TK基因是否成功转入并稳定表达。采用流式细胞仪观察并检测基因转染效率。筛选适宜前药GCV浓度,并检测各组别相同条件下细胞存活率。以流式细胞仪检测细胞周期及凋亡率。结果HIFU功率为5 W,频率为10.20 MHz,持续辐照40s,可获得残癌稳定模型。前药GCV的最适浓度为100μg/ml。相同条件下残余癌+微泡+超声+TK/GCV组癌细胞存活率最低（P<0.05）,仅为（43.16±3.18）%,且TK蛋白的表达明显高于其他各组（P均<0.05）。结论低强度超声联合载HSV1-TK/GCV自杀基因阳离子微泡对高强度聚焦... 

【文章来源】：中国介入影像与治疗学. 2017,14(01)北大核心CSCD

【文章页数】：5 页

【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 材料与仪器
    1.2 SMCC-7721细胞培养与处理
    1.3 建立HIFU辐照残癌细胞模型
    1.4 质粒DNA提取及阳离子微泡制取
    1.5 不同浓度前药GCV细胞毒性检测
    1.6 超声介导载基因阳离子微泡转染细胞及杀伤效应观察
    1.7 Western Blot检测各组TK蛋白表达
    1.8 统计学分析
2 结果
    2.1 HIFU辐照细胞悬液的时间与温度、急性杀伤率
    2.2 载基因微泡
    2.3 不同浓度前药GCV的细胞毒性
    2.4 低强度超声联合载HSV1-TK/GCV阳离子微泡对残癌细胞的杀伤效应
    2.5 TK蛋白表达
3 讨论


【参考文献】：
期刊论文
[1]诊断超声介导微泡提高肝纤维化通透性及促进基因传递[J]. 杨丹,陈礼波,张莉,高云华,谭开彬.  中国医学影像技术. 2016(06)
[2]超声微泡造影剂介导基因转染的研究进展[J]. 沈宇宙,刘俐.  中国介入影像与治疗学. 2016(06)
[3]对比观察脂质纳泡与微泡在高强度聚焦超声消融兔肝中的增效作用[J]. 姚元志,王志刚,杨珂,李攀,周璇,徐芬芬,王琦,王冬.  中国介入影像与治疗学. 2015(08)
[4]载药超声微泡研究进展[J]. 杨世艳,何兵,李明星.  中国中西医结合影像学杂志. 2015(01)
[5]KDR启动子驱动的CD/TK双自杀基因联合survivin基因干扰抑制肝癌细胞生长的体内研究[J]. 杨六成,吴凯,黄宗海,徐帅,王健俊,赵海军.  中国普通外科杂志. 2015(01)
[6]高强度聚焦超声不完全消融对体外培养肝癌细胞的影响[J]. 张映林,陈蛟,吴涯昆,张文锋,周世骥,李生伟.  第三军医大学学报. 2015(03)
[7]一种载基因阳离子微泡的制备及与SonoVue的对比研究[J]. 杨未晓,王翔,杨丹,谭开彬,刘平,高云华.  中国超声医学杂志. 2013 (04)
[8]HIFU治疗肝脏恶性肿瘤的临床观察[J]. 王琨,刘鲁明,孟志强,周振华,陈颢,王伯华,陈震,林钧华.  肿瘤. 2008(10)



本文编号：3423290