棉花促分裂原活化蛋白激酶基因GhMPK4的分离及抗病功能分析
发布时间：2021-10-12 00:02
棉花作为我国重要的经济作物,常遭受多种病原菌的侵袭,从而影响棉花的产量和品质问题。其中,棉花枯萎病由棉花枯萎病菌引起,是影响棉花生产的主要病害。为了抵御病害的侵袭,植物在长期的进化过程中形成了一系列的应答机制。促分裂原活化蛋白激酶（MAPK）级联途径普遍存在于真核生物中,是一类高度保守的信号转导途径,在病原物诱导的抗病反应中发挥着重要的作用。到目前为止,关于MAPK调控棉花对枯萎病抗性的研究鲜有报道。因此,利用分子生物学的方法研究MAPK对棉花枯萎病的调控,对于提高棉花对枯萎病的抗性有着重要的理论及实践意义。在本研究中,我们从陆地棉中分离出一个MAPK基因GhMPK4,通过对其进行表达特性分析和生物学功能分析,初步发现GhMPK4在抵抗棉花枯萎病胁迫过程中发挥着重要作用。具体结果如下:（1）通过PCR的方法获得GhMPK4的编码区序列,其长度为1137bp,编码378个氨基酸多肽,预测蛋白分子量为43.37kDa,等电点为6.6。通过氨基酸序列比对以及进化树分析发现,GhMPK4属于B组MAPK。（2）亚细胞定位实验发现GhMPK4定位于细胞质和细胞核中。说明GhMPK4可能在细胞质和...
【文章来源】：山东农业大学山东省
【文章页数】：72 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
真核生物中MAPK级联途径的概述（Camilleetal.,2017）
图 1-2 MAPK 级联途径在响应病原菌反应中参与多种信号通路（Meng et al., 2013）Fig. 1-2 MAPK cascade pathway participated in multiple signaling pathways in response to pathogen defense (Meng et al.,2013)1.3.2 MAPK 级联途径介导的植物抗病信号通路近年来，有研究报道 MAPK 级联途径在植物抗病信号通路中发挥着重要作用，而且是病原触发信号转导的重要通路（Zhang and Klessig, 2001；Nakagami et al., 2005）。在 拟 南 芥 中 ， 第 一 个 分 离 出 的 比 较 完 整 的 信 号 转 导 通 路 是FLS2-MEKK1-MKK4/5-MPK3/6-WRKY22/29，该信号转导通路可以有效地抵抗各种病原菌，主要包括细菌和真菌病原葡萄球孢菌（Asai et al., 2002；Galletti et al., 2011）。在拟南芥中，分离出的 MEKK1-MKK1/2-MPK4 信号转导通路主要参与调控对病原菌的应答反应，该信号转导通路不仅参与对活体病原菌的负调控反应，而且参与对死体病原菌的正调控反应（Petersen et al., 2000；Ichimura et al., 2002；Qiu et al., 2008）。有研究报
K4 基因的分离公布的陆地棉核苷酸序列（FJ966893.1），设计引物 M为模板进行 PCR 扩增实验，通过琼脂糖凝胶电泳检测。从图 3-1 中可以看出，以 Marker（DL10000）为对 2000bp 之间，约为 1137bp，并与两条引物之间的序胶回收，与克隆载体 pEASY-T1 simple 连接，然后转克隆菌液送公司进行测序。用 DNAman 和 DNAclu物，序列比对后发现与克隆的片段完全一致，并且可过 PCR 扩增实验说明，分离的目的片段就是陆地棉
【参考文献】：
期刊论文
[1]棉花枯萎病的发生与防治[J]. 何海旗. 农业科技与信息. 2012(10)
[2]棉花枯萎病的研究[J]. 李明桃. 农业灾害研究. 2012(04)
[3]棉花枯萎病的发生影响因子浅析[J]. 刘方志. 安徽农业科学. 2010(24)
[4]西瓜枯萎病菌镰刀菌酸对西瓜苗作用机制的初步探讨[J]. 马国斌,林德佩,王叶筠,郭庆元. 植物病理学报. 2000(04)
[5]我国棉花枯萎病研究进展[J]. 潘光照,何旭平,张敏健,冷苏凤,承泓良. 中国棉花. 1999(03)
本文编号：3431498
【文章来源】：山东农业大学山东省
【文章页数】：72 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
真核生物中MAPK级联途径的概述（Camilleetal.,2017）
图 1-2 MAPK 级联途径在响应病原菌反应中参与多种信号通路（Meng et al., 2013）Fig. 1-2 MAPK cascade pathway participated in multiple signaling pathways in response to pathogen defense (Meng et al.,2013)1.3.2 MAPK 级联途径介导的植物抗病信号通路近年来，有研究报道 MAPK 级联途径在植物抗病信号通路中发挥着重要作用，而且是病原触发信号转导的重要通路（Zhang and Klessig, 2001；Nakagami et al., 2005）。在 拟 南 芥 中 ， 第 一 个 分 离 出 的 比 较 完 整 的 信 号 转 导 通 路 是FLS2-MEKK1-MKK4/5-MPK3/6-WRKY22/29，该信号转导通路可以有效地抵抗各种病原菌，主要包括细菌和真菌病原葡萄球孢菌（Asai et al., 2002；Galletti et al., 2011）。在拟南芥中，分离出的 MEKK1-MKK1/2-MPK4 信号转导通路主要参与调控对病原菌的应答反应，该信号转导通路不仅参与对活体病原菌的负调控反应，而且参与对死体病原菌的正调控反应（Petersen et al., 2000；Ichimura et al., 2002；Qiu et al., 2008）。有研究报
K4 基因的分离公布的陆地棉核苷酸序列（FJ966893.1），设计引物 M为模板进行 PCR 扩增实验，通过琼脂糖凝胶电泳检测。从图 3-1 中可以看出，以 Marker（DL10000）为对 2000bp 之间，约为 1137bp，并与两条引物之间的序胶回收，与克隆载体 pEASY-T1 simple 连接，然后转克隆菌液送公司进行测序。用 DNAman 和 DNAclu物，序列比对后发现与克隆的片段完全一致，并且可过 PCR 扩增实验说明，分离的目的片段就是陆地棉
【参考文献】：
期刊论文
[1]棉花枯萎病的发生与防治[J]. 何海旗. 农业科技与信息. 2012(10)
[2]棉花枯萎病的研究[J]. 李明桃. 农业灾害研究. 2012(04)
[3]棉花枯萎病的发生影响因子浅析[J]. 刘方志. 安徽农业科学. 2010(24)
[4]西瓜枯萎病菌镰刀菌酸对西瓜苗作用机制的初步探讨[J]. 马国斌,林德佩,王叶筠,郭庆元. 植物病理学报. 2000(04)
[5]我国棉花枯萎病研究进展[J]. 潘光照,何旭平,张敏健,冷苏凤,承泓良. 中国棉花. 1999(03)
本文编号：3431498
本文链接：https://www.wllwen.com/kejilunwen/jiyingongcheng/3431498.html
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