拟南芥MAC1基因的克隆与功能分析

发布时间：2021-10-13 11:45

　　隐花色素（CRYPTOCHROME,简称CRY）是一类在植物和动物体内普遍存在的蛋白,具有感受蓝光和调节重力感应等功能。在植物中,CRYs作为蓝光受体,能够影响蓝光诱导的花发育、生物钟、昼夜节律调控和幼苗形态建成等过程。在模式植物拟南芥中,CRY1主要介导蓝光抑制下胚轴的伸长,CRY2则主要介导蓝光促进光周期控制的开花,为了进一步研究隐花色素CYR2的调控功能,通过筛选带有CRY2-LUC转基因的EMS诱变突变体库,分离鉴定出一个SUS2/PRP8基因的等位基因突变体,我们将突变体命名为mac1（more abundant of cry2 1）,并对MAC1基因的功能进行初步的探索。主要的实验结果如下:1、筛选EMS诱变库并获得一个具有早花表型,并且CRY2表达量上调的突变体植株,将其命名为mac1。通过多态性分子标记对mac1突变体进行图位克隆,确定突变位点位于MAC1基因第六个外显子发生了碱基突变,一个鸟嘌呤核苷酸（G）突变成了腺嘌呤核苷酸（A）,导致甘氨基酸变成了精氨基酸。2、构建MAC1基因的CRISPR/Cas9敲除载体并转化拟南芥,获得mac-cr突变体材料,对获得的突变体... 

【文章来源】：山西大学山西省

【文章页数】：63 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
中文摘要
ABSTRACT
第一章 文献综述
    1.1 隐花色素
        1.1.1 隐花色素的简介
        1.1.2 隐花色素的结构
        1.1.3 隐花色素的功能
        1.1.4 隐花色素的信号转导途径
    1.2 PRP8 的简介
    1.3 CRISPR/Cas9 基因编辑技术
    1.4 研究内容和意义
第二章 实验材料与方法
    2.1 材料、试剂和仪器
        2.1.1 实验材料
        2.1.2 实验试剂
        2.1.3 实验器材
    2.2 实验方法
        2.2.1 突变体mac1/CRY2-LUC的筛选
        2.2.2 突变体mac1基因定位
        2.2.3 拟南芥mac1基因克隆及遗传转化
        2.2.4 拟南芥mac1中CRY2 基因的表达分析
        2.2.5 拟南芥mac1开花时间表型分析
        2.2.6 拟南芥mac1突变体下胚轴长度分析
        2.2.7 实验所用引物列表
第三章 结果与分析
    3.1 mac1突变体的获得
    3.2 mac1是SUS2/PRP8 基因的等位突变体
    3.3 MAC1 基因的克隆与功能分析
    3.4 mac1基因突变导致内源CRY2 蛋白降解变慢
    3.5 mac1突变体表现早花表型
    3.6 mac1突变体表现下胚轴变短表型
第四章 讨论与展望
第五章 结论
参考文献
攻读硕士期间取得的研究成果
致谢
个人简况及联系方式


【参考文献】：
期刊论文
[1]拟南芥隐花色素CRY2调控因子PRP8基因的功能分析[J]. 郭亚蓉,王艳艳,刘军,裴雁曦.  生物技术进展. 2019(02)
[2]农作物EMS诱变研究进展[J]. 黄冬福,付文婷,韩世玉,何建文.  北方园艺. 2015(24)



本文编号：3434598