雌激素调控乳腺恶性转化细胞GREB1基因表达的信号机制研究

发布时间：2021-10-14 13:56

　　目的探讨雌激素（E2）对人乳腺恶性转化上皮细胞GREB1基因表达、细胞生长的影响及GPER-钙蛋白酶2（CANP2）信号活动在其中的介导作用,深入了解E2生物学作用的信号机制。方法:用自制乳腺癌细胞（E2诱导的乳腺上皮转化细胞）为研究模型,MCF-7细胞为体外实验对照。制备乳腺癌细胞:将MCF-10A细胞用E2连续刺激至第13代,标记为（P13）,显微镜观察细胞转化形态变化,裸鼠实验检测转化细胞恶性程度;将转化细胞和MCF-7加E2刺激后,平板克隆形成实验检测E2对转化细胞增殖水平,qRT-PCR检测GREB1基因表达;转化细胞和MCF-7加GPER特异性抑制剂G15、CANP特异性抑制剂calpeptin（Calp）预处理及shRNA-CANP2转染干预后,平板克隆形成实验、qRT-PCR分别检测G15、Calpeptin、shRNA-Calpain2对E2刺激转化细胞增殖增加和GREB1表达上调的影响。结果（1）E2诱导的恶性转化细胞模型建立:1)以E2连续刺激MCF-10A至P13代细胞形态发生变化:模型细胞接触抑制消失,细胞胞体变大,出现较多克隆小球;2)模型细胞裸鼠乳腺脂肪垫... 

【文章来源】：贵州医科大学贵州省

【文章页数】：47 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

-1E2诱导MCF-10A细胞形态变化（200×）

图 2-1-1E2 诱导 MCF-10A 细胞形态变化（200×）Fig.2-1-1E2 induced morphology changes of MCF-10A cells（200×）E2 诱导的转化细胞在裸鼠体内成瘤将建立好的 MCF-10A 模型细胞 DMSO 组和 E2 组（P13），接种在裸鼠垫上，待皮丘吸收完全 1 周后开始观察裸鼠接种部位成瘤情况。成瘤实对照组无肿块形成（0/5），而 E2 组有肿块形成（7/10）（图 2-1-2a），当至第 11 天，取出肿瘤（图 2-1-2b）。

图 2-2-1E2 促进转化细胞的增殖能力Fig.2-2-1E2 promoted the proliferation of transformed cells.2.2E2 上调转化细胞 GREB1 基因表达E2 可上调转化细胞 GREB1 基因表达，与对照相比表达增加（114.04±7.28）**P<0.01），（图 2-2-2a）。乳腺癌 MCF-7 细胞在 E2 刺激下，GREB1 基因表上调，增加了（52.02±5.39）%（*P<0.05），（图 2-2-2b）。

【参考文献】：
期刊论文
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本文编号：3436293