三角帆蚌Smads基因的表达及对创伤修复的探究
发布时间：2021-10-19 02:15
TGF-β/Smads信号通路在早期胚胎发育、组织修复、细胞增殖与分化、凋亡和迁移、内分泌和免疫等多种生理过程中扮演着重要的角色。研究表明,TGF-βs与细胞外基质沉着有着密切的关系,并且是创伤愈合及瘢痕形成的主要因素之一。三角帆蚌是优良的淡水育珠蚌,由于插核育珠环节对蚌造成严重损伤并影响育珠质量,造成极大的经济损失,因此开展三角帆蚌TGF-β/smads信号通路的研究将有利于了解贝类的免疫及创伤修复机制,为其健康养殖提供理论基础。1.根据前期构建的三角帆蚌转录组文库中筛选出Smad3及Smad4基因片段设计特异性引物,利用RACE-PCR技术成功克隆出了HcSmad3及HcSmad4基因的cDNA序列全长。HcSmad3的5’端非编码区的大小为162bp,3’端非编码区的大小为633bp,开放阅读框为1257bp,共编码418个氨基酸,包含两个终止信号序列（AATAAA）以及一个PolyA尾巴,经预测其理论的等电点为6.09,分子量大小为47.28 kDa。HcSmad4的5’UTR大小为119bp,3’UTR大小为876bp,开放阅读框长度为1548bp编码515个氨基酸,预测其理...
【文章来源】：南昌大学江西省 211工程院校
【文章页数】：79 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
TGF-β/smads信号通路机制[39]
图 1.2 Smads 的结构示意图[39]Fig.1.2 Schematic diagram of Smads[39]1.3 TGF-β/Smad 研究进展1.3.1 Smads 基因的亚细胞定位调控近年来的研究强调了 Smad 核质穿梭在 TGF-β信号调控中的重要性,在未诱导的细胞中，Smad2 和 Smad3 主要分布在细胞质中，而 Smad4 则分布在细胞核和细胞质中。然而，Smad 并不是静止的，而是不断地在细胞质和细胞核之间穿梭[40-42]。在 TGF-β的刺激下，Smad 复合物在细胞核内形成并积累，在那里它们可以停留数个小时，然而，详细的研究表明，R-Smad 正以较低的速率被一种尚未确认的磷酸酶持续地去磷酸化,这种去磷酸化使它们能够与 Smad4 分离并被输出到细胞质中[40, 43]。如果受体仍然活跃，R-Smads 被再磷酸化，与 Smad4 形成复
2.3. 结果2.3.1 总RNA的提取三角帆蚌血细胞提取的总RNA结果电泳检测图如图2.1所示，有5s，18s，28s三条明显的条带。紫外分光光度计检测其A280/A260在1.8-2.0之间，表明提取的RNA的质量较好。图2.1 总RNA 检测Fig.2.1 Total RNA detection2.3.2 三角帆蚌 HcSmad3 和 HcSmad4 基因全长的克隆根据构建的三角帆蚌血细胞转录组文库筛选出了HcSmad3和HcSmad4基因片段，设计特异性引物 HcSmad3-F，HcSmad3-R 和 HcSmad4-F，HcSmad4-R 扩增其中间片段
【参考文献】：
期刊论文
[1]Identification and expression of amphioxus AmphiSmad1/5/8 and AmphiSmad4[J]. YU XueSong 1,LI JianWei 2,LIU Hui 1,LI XiaoDan 1,CHEN ShangWu 1,ZHANG HongWei 2 & XU AnLong 1 1 State Key Laboratory of Biocontrol,Open Laboratory for Marine Functional Genomics of State High-Tech Development Program,Guangdong Key Laboratory of Pharmaceutical Functional Genes,College of Life Sciences,Sun Yat-Sen University,Guangzhou 510275,China;2 Institute of Developmental Biology,College of Life Sciences,Shandong University,Jinan 250100,China. Science China（Life Sciences）. 2011(03)
[2]Effect of TGF-β/Smad signaling pathway on lung myofibroblast differentiation[J]. Li GU~2 Yuan-jue ZHU~(2,4) Xiao YANG~3 Zi-Jian GUO~2 Wen-bing XU~2 Xin-lun TIAN~22 Department of Pulmonary Medicine,Peking Union Medical College Hospital,Chinese Academy of Medical Sciences,Beijing 100071 China;3 Genetic Laboratory of Development and Diseases,Institute of Biotechnology,Beijing 100070,China. Acta Pharmacologica Sinica. 2007(03)
本文编号：3443958
【文章来源】：南昌大学江西省 211工程院校
【文章页数】：79 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
TGF-β/smads信号通路机制[39]
图 1.2 Smads 的结构示意图[39]Fig.1.2 Schematic diagram of Smads[39]1.3 TGF-β/Smad 研究进展1.3.1 Smads 基因的亚细胞定位调控近年来的研究强调了 Smad 核质穿梭在 TGF-β信号调控中的重要性,在未诱导的细胞中，Smad2 和 Smad3 主要分布在细胞质中，而 Smad4 则分布在细胞核和细胞质中。然而，Smad 并不是静止的，而是不断地在细胞质和细胞核之间穿梭[40-42]。在 TGF-β的刺激下，Smad 复合物在细胞核内形成并积累，在那里它们可以停留数个小时，然而，详细的研究表明，R-Smad 正以较低的速率被一种尚未确认的磷酸酶持续地去磷酸化,这种去磷酸化使它们能够与 Smad4 分离并被输出到细胞质中[40, 43]。如果受体仍然活跃，R-Smads 被再磷酸化，与 Smad4 形成复
2.3. 结果2.3.1 总RNA的提取三角帆蚌血细胞提取的总RNA结果电泳检测图如图2.1所示，有5s，18s，28s三条明显的条带。紫外分光光度计检测其A280/A260在1.8-2.0之间，表明提取的RNA的质量较好。图2.1 总RNA 检测Fig.2.1 Total RNA detection2.3.2 三角帆蚌 HcSmad3 和 HcSmad4 基因全长的克隆根据构建的三角帆蚌血细胞转录组文库筛选出了HcSmad3和HcSmad4基因片段，设计特异性引物 HcSmad3-F，HcSmad3-R 和 HcSmad4-F，HcSmad4-R 扩增其中间片段
【参考文献】：
期刊论文
[1]Identification and expression of amphioxus AmphiSmad1/5/8 and AmphiSmad4[J]. YU XueSong 1,LI JianWei 2,LIU Hui 1,LI XiaoDan 1,CHEN ShangWu 1,ZHANG HongWei 2 & XU AnLong 1 1 State Key Laboratory of Biocontrol,Open Laboratory for Marine Functional Genomics of State High-Tech Development Program,Guangdong Key Laboratory of Pharmaceutical Functional Genes,College of Life Sciences,Sun Yat-Sen University,Guangzhou 510275,China;2 Institute of Developmental Biology,College of Life Sciences,Shandong University,Jinan 250100,China. Science China（Life Sciences）. 2011(03)
[2]Effect of TGF-β/Smad signaling pathway on lung myofibroblast differentiation[J]. Li GU~2 Yuan-jue ZHU~(2,4) Xiao YANG~3 Zi-Jian GUO~2 Wen-bing XU~2 Xin-lun TIAN~22 Department of Pulmonary Medicine,Peking Union Medical College Hospital,Chinese Academy of Medical Sciences,Beijing 100071 China;3 Genetic Laboratory of Development and Diseases,Institute of Biotechnology,Beijing 100070,China. Acta Pharmacologica Sinica. 2007(03)
本文编号：3443958
本文链接：https://www.wllwen.com/kejilunwen/jiyingongcheng/3443958.html
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