上调CRPC细胞Numb基因通过Hedgehog信号通路对细胞周期的影响

发布时间：2021-10-19 22:59

　　目的Numb基因是新发现的细胞命运决定因素。它与多种肿瘤的发生和发展密切相关,在之前的实验当中,我们课题小组在前期的实验中证明了将SaRNA导入人去势抵抗性前列腺癌PC-3细胞,Numb基因高表达后,通过Hedgehog信号通路将人前列腺癌PC-3细胞的细胞周期阻滞在G0/G1期。本实验进一步通过将Numb高表达的PC-3细胞于裸鼠体表成瘤,并应用HE染色、RT-qPCR技术、Western Blot技术及流式细胞技术,验证Numb高表达后对前列腺恶性肿瘤生长的影响,以及其通过Hedgehog信号通路对人前列腺癌PC-3细胞的细胞周期的影响。方法1.将30只裸鼠随机分成三组,收集生长对数期的三组PC-3细胞扩增培养,并分别对三组裸鼠进行皮下注射Numb基因高表达的重组人PC-3细胞（重组PC-3细胞）作为实验组、空转染病毒的PC-3细胞作为对照组和未转染的PC-3细胞作为空白组,进行皮下成瘤实验。2.14d后取三组肿瘤组织分别进行HE染色。3.采用Real-time quantitative PCR（RT-qPCR）法检测三组肿瘤组织中Numb、SHH、GLi及CyclinE的mRNA... 

【文章来源】：福建医科大学福建省

【文章页数】：47 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

裸鼠瘤组织HE染色结果

18而转染组SHh、Gli-1和CyclinE基因表达水平显著低于空白对照组和空载组，且差异有统计学意义（p＜0.05）。而空白对照组与空载组之间无明显差异（p＞0.05）。（表1）表1裸鼠成瘤组织Numb、SHh、CyclinE和Gli1的RT-qPCR结果4.裸鼠成瘤组织Numb、SHh、CyclinE和Gli1的蛋白表达水平WesternBlot结果显示：裸鼠成瘤组织中，转染组Numb蛋白表达水平显著高于空白对照组和空载组，而SHh、Gli-1和CyclinE蛋白表达水平显著低于空白对照组和空载组，且差异有统计学意义（p＜0.05）。而空白对照组和空载组之间无显著差异（p＞0.05）。（图2）图2裸鼠瘤组织中Numb、SHh、CyclinE和Gli1的WesternBlot结果NumbSHhGli-1CyclinEActin空白对照组空载组转染组

【参考文献】：
期刊论文
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[3]阻断Sonic Hedgehog信号对不同人肝癌细胞生长的影响[J]. 刘爱梅,余功旺,黄莉霞,孙艳,迟作华.  中国病理生理杂志. 2016(02)
[4]saRNA上调人前列腺癌PC-3细胞中Numb基因表达的研究[J]. 陈金飚,颜醒愚.  重庆医学. 2016(04)
[5]NUMB调控肿瘤增殖的机制研究[J]. 俞谦,邵喜明,李华顺.  四川大学学报(医学版). 2014(05)
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硕士论文
[1]saRNA激活AIPC细胞Numb基因对Hedgehog信号通路重要因子SHh、GLi和CyclinE表达的影响[D]. 张河淦.福建医科大学 2017



本文编号：3445760