两个扩张型心肌病家系的致病基因的筛选和鉴定

发布时间：2021-10-20 18:41

　　研究目的:心肌病是指累及心肌并与心脏肌肉功能障碍有关的一组心肌疾病,而扩张型心肌病（扩心病）是心肌病的最常见的表现形式。扩心病是以左心室或双侧心室扩张伴心肌收缩功能障碍为主要特征的心肌病,患者临床预后差,与恶性肿瘤相当,5年生存率约为45%,是导致心力衰竭的第三大病因和心脏移植的最常见原因。近年来的研究表明家族性扩心病与基因突变有关,20-35%扩心病患者有遗传因素。本研究分别对两个家族性扩心病家系成员进行全外显子组测序分析,期于发现新的扩心病致病基因或位点,并尝试构建相应的动物模型,初探其致病机制。研究方法:本研究选取了两个扩心病家系进行遗传学研究。家系一伴有窦性心动过缓,家系二为一个近亲结婚的家族性扩心病家系。对其他家族成员进行心脏相关检查,并根据病人主诉,发现家系一中有6个女性病人而没有男性患病者。接着对家系一的先证者和其家族成员进行遗传分析,对其中2个病人（Ⅱ:5、Ⅲ:11）进行了外显子组测序。家系二中有3个病人,对先证者和其家族成员进行遗传分析,对家系中的4个标本（Ⅲ:3、Ⅲ:4、Ⅳ:1、Ⅳ:5）进行全外显子组测序。对检测出的新的基因或突变进行进一步的功能学研究。研究结果:家... 

【文章来源】：电子科技大学四川省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：56 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
abstract
第一章 绪论
    1.1 研究工作的背景与意义
    1.2 扩张型心肌病遗传学研究的国内外研究历史与现状
    1.3 本文的主要贡献与创新
    1.4 本论文的结构安排
第二章 家系一的致病基因的筛选和鉴定
    2.1 材料
    2.2 方法
        2.2.1 家系一的调查和系谱分析
        2.2.2 全外显子组的测序的具体流程
        2.2.3 过滤和注释
        2.2.4 候选突变位点的验证方法
        2.2.5 线粒体测序
    2.3 结果
        2.3.1 家族成员的临床表现
        2.3.2 突变位点的探索和遗传分析
        2.3.3 突变的功能性预测和线粒体测序
    2.4 讨论
    2.5 本章小结
第三章 家系二的致病基因的筛选和鉴定以及致病机制初探
    3.1 家系二致病基因的筛选
        3.1.1 材料
        3.1.2 方法
            3.1.2.1 家系二的调查和系谱分析
            3.1.2.2 测序步骤
            3.1.2.3 数据分析流程
            3.1.2.4 生物信息分析内容
        3.1.3 结果
            3.1.3.1 家系二的测序结果分析
            3.1.3.2 BICD2基因在散发样本中验证
            3.1.3.3 BICD2基因在正常人群中验证
    3.2 致病基因的鉴定及致病机制初探
        3.2.1 材料
        3.2.2 方法
            3.2.2.1 进化树分析和蛋白质序列比对
            3.2.2.2 KEGG信号通路分析
            3.2.2.3 BICD2基因在小鼠(1周和4周龄)和人心脏组织中表达的检测
            3.2.2.4 斑马鱼BICD2基因原位杂交及RT-PCR检测BICD2基因在斑马鱼胚胎及成体斑马鱼心脏组织中的表达
            3.2.2.5 敲降BICD2基因表达后斑马鱼心脏形态和功能的改变
        3.2.3 结果
            3.2.3.1 进化树分析和蛋白质序列比对
            3.2.3.2 KEGG信号通路分析
            3.2.3.3 BICD2在小鼠(1周和4周龄)和人心脏组织中表达的检测
            3.2.3.4 斑马鱼BICD2原位杂交及qRT-PCR结果
            3.2.3.5 Bicd2基因在成年斑马鱼心脏中的表达(RT-PCR电泳结果)
            3.2.3.6 敲降BICD2表达后斑马鱼心脏形态和功能的改变
    3.3 讨论
    3.4 本章小结
第四章 全文总结与展望
    4.1 全文总结
    4.2 后续工作展望
致谢
参考文献
攻硕期间的研究成果


【参考文献】：
期刊论文
[1]核纤层蛋白基因相关性心肌病[J]. 方位,李小平.  心血管病学进展. 2016(06)
[2]家族性扩张型心肌病常见突变的研究进展[J]. 方位,罗蓉,李小平.  医学综述. 2016(18)
[3]超声心动图检查调查8080例成人肥厚型心肌病患病率[J]. 王志民,邹玉宝,宋雷,马爱群,刘唐威,谷惠敏,卢赛兰,武鹏翥,孙兆明,何国宝,张卫,张颖,沈丽,蔡玉岭,甄一松,刘延玲,惠汝太.  中华心血管病杂志. 2004(12)



本文编号：3447406