非小细胞肺癌中MAGE-D4的表达、血清抗体分析及基因沉默细胞株的构建
发布时间：2021-10-21 09:39
目的:检测非小细胞肺癌组织中MAGE-D4蛋白的表达和血清中MAGE-D4抗体,并进一步分析它们与患者临床病理指标之间的关系。构建MAGE-D4真核表达质粒,筛选基因稳定沉默的肺癌细胞株,为后续研究MAGE-D4的生物学功能提供条件。方法:1.采用Oncomine癌基因芯片数据库中两个独立的肺癌数据集Hou Lung（肺癌样本91例,正常肺组织65例）和Okayama Lung（肺癌样本226例,正常肺组织20例）分析MAGE-D4 mRNA的表达。2.通过免疫组织化学染色法检测81例非小细胞肺癌组织和38例癌旁组织中MAGE-D4蛋白的表达及细胞定位,并分析蛋白表达的阳性率与NSCLC患者临床病理参数之间的关系。3.采用酶联免疫吸附试验检测74例非小细胞肺癌患者血清中MAGE-D4抗体的阳性率及效价,并分析其与NSCLC患者临床病理参数的关系。4.通过RT-PCR检测3株肺癌细胞A549、H460、PC9中MAGE-D4的表达情况。使用MAGE-D4 shRNA重组慢病毒感染高表达MAGE-D4的肺癌细胞,经过嘌呤霉素筛选,获得稳定沉默MAGE-D4基因的细胞株;通过RT-qPCR和...
【文章来源】：广西医科大学广西壮族自治区
【文章页数】：114 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
肺癌组织芯片中MAGE-D4mRNA的表达Fig.1-1ExpressionofMAGE-D4mRNAinlungcancertissuemicroarray
21图 1-2 免疫组织化学染色检测 MAGE-D4 蛋白（200×）Fig.1-2 MAGE-D4 protein expression tested by IHC（200×）a: negative control (paracancerous tissue)；b: expression of pre-immune serum in lung adenocarcinoma ；c: co-expression in the nucleus and cytoplasm；d: weak expression in lung adenocarcinoma；e: moderateexpression in lung adenocarcinoma；f: strong expression in adenocarcinoma; g: weak expression in lungsquamous cell carcinoma; h: moderate expression in lung squamous cell carcinoma；i: strong expression inlung squamous cell carcinoma
S 17.0 软件进行数据的统计分析，样本均数的使用 χ2检验或 Fisher 确切概率法，检验水准学意义。的浓度测定 蛋白定量试剂盒测定包被蛋白浓度，标03，决定系数 R2=0.9969（图 2-1）。决定系数高的准确度，可用于计算包被蛋白的浓度。
【参考文献】：
期刊论文
[1]自身抗体在肿瘤及感染性疾病发生、发展中的作用[J]. 王永福,刘媛. 北京大学学报(医学版). 2018(06)
[2]血清NY-ESO-1自身抗体在乳腺癌中的诊断价值[J]. 谢长乐,罗育豪,黄旭纯,许镒洧. 转化医学杂志. 2018(03)
[3]黑色素瘤相关抗原MAGE-D研究进展[J]. 邬慧贤,付骏,张庆梅,谢小薰. 广东医学. 2018(05)
[4]黑素瘤相关抗原D4（MAGE-D4）多克隆抗体的制备和应用[J]. 贺菽嘉,顾永耀,肖绍文,张庆梅,陈芳,罗彬,付骏,谢小薰. 细胞与分子免疫学杂志. 2017(01)
[5]MAGE-C2在肺腺癌中的表达及临床意义[J]. 郭康,刘梦实,徐萍,李红梅. 中国肺癌杂志. 2016(02)
[6]食管鳞癌组织中黑色素瘤相关抗原D4b的表达及临床意义[J]. 吴静,黄俊星,赵国军,詹树东,卢婷,周彤敏,于鸿. 现代肿瘤医学. 2015(15)
[7]转录因子E2F-1的研究进展[J]. 王长青,肖强. 中华肿瘤防治杂志. 2011(04)
[8]MAGE-D4a融合蛋白的原核表达、纯化及鉴定[J]. 贺菽嘉,肖绍文,罗彬,蓝秀万,林文珍,林永达,谢小薰. 中国免疫学杂志. 2010(05)
[9]黑色素瘤抗原编码基因家族新成员MAGE-D1的组织表达谱研究[J]. 张成岗,贺福初. 中国生物化学与分子生物学报. 2002(02)
博士论文
[1]胶质瘤相关抗原MAGE-D4基因重组、表达特性分析及抗体血清学检测[D]. 贺菽嘉.广西医科大学 2010
本文编号：3448725
【文章来源】：广西医科大学广西壮族自治区
【文章页数】：114 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
肺癌组织芯片中MAGE-D4mRNA的表达Fig.1-1ExpressionofMAGE-D4mRNAinlungcancertissuemicroarray
21图 1-2 免疫组织化学染色检测 MAGE-D4 蛋白（200×）Fig.1-2 MAGE-D4 protein expression tested by IHC（200×）a: negative control (paracancerous tissue)；b: expression of pre-immune serum in lung adenocarcinoma ；c: co-expression in the nucleus and cytoplasm；d: weak expression in lung adenocarcinoma；e: moderateexpression in lung adenocarcinoma；f: strong expression in adenocarcinoma; g: weak expression in lungsquamous cell carcinoma; h: moderate expression in lung squamous cell carcinoma；i: strong expression inlung squamous cell carcinoma
S 17.0 软件进行数据的统计分析，样本均数的使用 χ2检验或 Fisher 确切概率法，检验水准学意义。的浓度测定 蛋白定量试剂盒测定包被蛋白浓度，标03，决定系数 R2=0.9969（图 2-1）。决定系数高的准确度，可用于计算包被蛋白的浓度。
【参考文献】：
期刊论文
[1]自身抗体在肿瘤及感染性疾病发生、发展中的作用[J]. 王永福,刘媛. 北京大学学报(医学版). 2018(06)
[2]血清NY-ESO-1自身抗体在乳腺癌中的诊断价值[J]. 谢长乐,罗育豪,黄旭纯,许镒洧. 转化医学杂志. 2018(03)
[3]黑色素瘤相关抗原MAGE-D研究进展[J]. 邬慧贤,付骏,张庆梅,谢小薰. 广东医学. 2018(05)
[4]黑素瘤相关抗原D4（MAGE-D4）多克隆抗体的制备和应用[J]. 贺菽嘉,顾永耀,肖绍文,张庆梅,陈芳,罗彬,付骏,谢小薰. 细胞与分子免疫学杂志. 2017(01)
[5]MAGE-C2在肺腺癌中的表达及临床意义[J]. 郭康,刘梦实,徐萍,李红梅. 中国肺癌杂志. 2016(02)
[6]食管鳞癌组织中黑色素瘤相关抗原D4b的表达及临床意义[J]. 吴静,黄俊星,赵国军,詹树东,卢婷,周彤敏,于鸿. 现代肿瘤医学. 2015(15)
[7]转录因子E2F-1的研究进展[J]. 王长青,肖强. 中华肿瘤防治杂志. 2011(04)
[8]MAGE-D4a融合蛋白的原核表达、纯化及鉴定[J]. 贺菽嘉,肖绍文,罗彬,蓝秀万,林文珍,林永达,谢小薰. 中国免疫学杂志. 2010(05)
[9]黑色素瘤抗原编码基因家族新成员MAGE-D1的组织表达谱研究[J]. 张成岗,贺福初. 中国生物化学与分子生物学报. 2002(02)
博士论文
[1]胶质瘤相关抗原MAGE-D4基因重组、表达特性分析及抗体血清学检测[D]. 贺菽嘉.广西医科大学 2010
本文编号：3448725
本文链接：https://www.wllwen.com/kejilunwen/jiyingongcheng/3448725.html
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