芥菜J3基因克
发布时间：2021-10-23 15:51
芥菜在我国长江中下游地区广泛栽植,其产品器官的产量与品质受开花时间影响。适期开花是保证芥菜正常生长和繁育的关键因素。外在环境条件（如光照和温度）及内在生长状况（如发育阶段和遗传因素）都会影响芥菜开花。开花调控基因分布于光周期途径、春化途径、温敏途径、年龄途径、自主途径和赤霉素途径等六条开花调控途径,并最终整合到关键的开花信号整合子,调控开花时间。通过对拟南芥的分子遗传学研究已鉴定多个参与开花转变的调节因子,其中MADS盒转录因子在开花正调和负调中起着非常重要的作用,如SUPPRESSOR OF OVEREXPRESSION OF CONSTANS1（SOC1）、AGAMOUS-LIKE24（AGL24）。DNAJ HOMOLOG3（J3）蛋白是一个新的开花调控因子,直接与核内的SVP相互作用并阻止体内SVP与SOC1和FT的结合,通过减弱SVP与SOC1和FT的结合直接上调成花转变期间他们的基因表达。但是J3是否可直接作用于开花整合子SOC1和AGL24调节开花时间,目前并不清楚。本研究拟克隆芥菜J3（BjuJ3）基因,转基因研究其对开花的影响,并通过酵母双杂、pull-down以及酵...
【文章来源】：西南大学重庆市 211工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：82 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
实时荧光定量PCR原理示意图
白质与 DNA 互作有酵母单杂交、双荧光素酶、免疫共沉淀相结合等很多方法验证。本文主要以。系统交技术的原理系统（Yeast one-hybrid system，Y1H）是在酵母双来。与酵母双杂系统不同的是当 cDNA 文库构建质由 GAL4AD 和文库蛋白质组成，这相当于用文L4 BD，如该文库蛋白能与 DNA 之间相互作用，达就能验证其相互作用[102, 103]。本实验的主要步骤粒转入到酵母细胞中，通过挑斑检测筛选出带有表达文库中的重组质粒转化入到酵母细胞中；最
杂交技术的应用可以分为两类：一是发现可能与目的蛋白因，并可进一步鉴定 DNA 作用位点。这是主要应用方面就运用该技术筛选出能与大鼠基因 GPE1 核心序列相互作用生物信息学分析 DNA 的结构域，得到结构信息之后再利用构进行分析。1993 年，Wilson 等[105, 106]用该技术分析了两用结构域。素酶报告基因系统光素酶报告基因检测的原理素酶报告基因系统的基本原理就是将重新编码的测试序列光素酶报道基因之间，随后在同一管中测量两种荧光素酶化比率与核糖体“读取”记录信号的效率成正比，从而使换到下一个阅读框。新鲜制备荧光素酶测定缓冲液和海肾萤火虫荧光素酶与固定量的海肾荧光素酶混合，并测定其判断蛋白与 DNA 是否有相互作用。
【参考文献】：
期刊论文
[1]模式植物拟南芥开花时间分子调控研究进展[J]. 舒黄英,郝园园,蔡庆泽,王振,朱国鹏,成善汉,周媛,汪志伟. 植物科学学报. 2017(04)
[2]芥菜AGL18家族成员与开花整合子SOC1的互作分析[J]. 李朝闯,马关鹏,谢婷,陈娇,王志敏,宋明,汤青林. 园艺学报. 2017(03)
[3]实时荧光定量PCR技术研究进展及其应用[J]. 王玉倩,薛秀花. 生物学通报. 2016(02)
[4]芥菜开花整合子SOC1启动子的克隆及其与FLC、SVP蛋白互作的研究[J]. 陈娇,赵夏云,鲜登宇,马关鹏,谢婷,王志敏,宋明,汤青林. 园艺学报. 2015(10)
[5]芥菜开花整合子SOC1与AGL24蛋白K结构域的互作位点鉴定[J]. 谢婷,谷慧英,江为,马关鹏,陈娇,王志敏,宋明,汤青林. 园艺学报. 2015(03)
[6]芥菜开花相关基因AGL24的表达及与SOC1、SVP和FLC蛋白的互作[J]. 江为,杨修勤,谷慧英,鲜登宇,赵夏云,王志敏,宋明,汤青林. 园艺学报. 2014(10)
[7]开花整合子SOC1花期调控的分子机制[J]. 鲜登宇,江为,赵夏云,汤青林,宋明,王志敏. 中国蔬菜. 2013(06)
[8]芥菜开花调控因子SVP与FLC蛋白互作的结构域筛选与鉴定[J]. 汤青林,李念祖,宋明,丁宁,陈竹睿,刘智宇,王志敏. 园艺学报. 2012(12)
[9]植物开花时间:自然变异与遗传分化[J]. 罗睿,郭建军. 植物学报. 2010(01)
[10]酵母双杂交技术研究与应用进展[J]. 李先昆,聂智毅,曾日中. 安徽农业科学. 2009(07)
硕士论文
[1]甘蓝TT8及WD40转录因子影响花青素合成及开花时间的研究[D]. 周雯.西南大学 2017
[2]芥菜AGL6、AGL15与SOC1、AGL24、SVP蛋白的互作研究[D]. 马关鹏.西南大学 2016
[3]芥菜AGL24基因的启动子克隆与其互作因子SOC1遗传转化研究[D]. 陈娇.西南大学 2016
[4]芥菜开花整合子SOC1与开花抑制因子SVP、FLC蛋白相互作用[D]. 谷慧英.西南大学 2015
[5]芥菜开花调控基因SVP和AGL24的克隆及其表达分析[D]. 杨修勤.西南大学 2014
[6]芥菜开花整合子SOC1的克隆和表达分析[D]. 邹晨辉.西南大学 2014
本文编号：3453465
【文章来源】：西南大学重庆市 211工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：82 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
实时荧光定量PCR原理示意图
白质与 DNA 互作有酵母单杂交、双荧光素酶、免疫共沉淀相结合等很多方法验证。本文主要以。系统交技术的原理系统（Yeast one-hybrid system，Y1H）是在酵母双来。与酵母双杂系统不同的是当 cDNA 文库构建质由 GAL4AD 和文库蛋白质组成，这相当于用文L4 BD，如该文库蛋白能与 DNA 之间相互作用，达就能验证其相互作用[102, 103]。本实验的主要步骤粒转入到酵母细胞中，通过挑斑检测筛选出带有表达文库中的重组质粒转化入到酵母细胞中；最
杂交技术的应用可以分为两类：一是发现可能与目的蛋白因，并可进一步鉴定 DNA 作用位点。这是主要应用方面就运用该技术筛选出能与大鼠基因 GPE1 核心序列相互作用生物信息学分析 DNA 的结构域，得到结构信息之后再利用构进行分析。1993 年，Wilson 等[105, 106]用该技术分析了两用结构域。素酶报告基因系统光素酶报告基因检测的原理素酶报告基因系统的基本原理就是将重新编码的测试序列光素酶报道基因之间，随后在同一管中测量两种荧光素酶化比率与核糖体“读取”记录信号的效率成正比，从而使换到下一个阅读框。新鲜制备荧光素酶测定缓冲液和海肾萤火虫荧光素酶与固定量的海肾荧光素酶混合，并测定其判断蛋白与 DNA 是否有相互作用。
【参考文献】：
期刊论文
[1]模式植物拟南芥开花时间分子调控研究进展[J]. 舒黄英,郝园园,蔡庆泽,王振,朱国鹏,成善汉,周媛,汪志伟. 植物科学学报. 2017(04)
[2]芥菜AGL18家族成员与开花整合子SOC1的互作分析[J]. 李朝闯,马关鹏,谢婷,陈娇,王志敏,宋明,汤青林. 园艺学报. 2017(03)
[3]实时荧光定量PCR技术研究进展及其应用[J]. 王玉倩,薛秀花. 生物学通报. 2016(02)
[4]芥菜开花整合子SOC1启动子的克隆及其与FLC、SVP蛋白互作的研究[J]. 陈娇,赵夏云,鲜登宇,马关鹏,谢婷,王志敏,宋明,汤青林. 园艺学报. 2015(10)
[5]芥菜开花整合子SOC1与AGL24蛋白K结构域的互作位点鉴定[J]. 谢婷,谷慧英,江为,马关鹏,陈娇,王志敏,宋明,汤青林. 园艺学报. 2015(03)
[6]芥菜开花相关基因AGL24的表达及与SOC1、SVP和FLC蛋白的互作[J]. 江为,杨修勤,谷慧英,鲜登宇,赵夏云,王志敏,宋明,汤青林. 园艺学报. 2014(10)
[7]开花整合子SOC1花期调控的分子机制[J]. 鲜登宇,江为,赵夏云,汤青林,宋明,王志敏. 中国蔬菜. 2013(06)
[8]芥菜开花调控因子SVP与FLC蛋白互作的结构域筛选与鉴定[J]. 汤青林,李念祖,宋明,丁宁,陈竹睿,刘智宇,王志敏. 园艺学报. 2012(12)
[9]植物开花时间:自然变异与遗传分化[J]. 罗睿,郭建军. 植物学报. 2010(01)
[10]酵母双杂交技术研究与应用进展[J]. 李先昆,聂智毅,曾日中. 安徽农业科学. 2009(07)
硕士论文
[1]甘蓝TT8及WD40转录因子影响花青素合成及开花时间的研究[D]. 周雯.西南大学 2017
[2]芥菜AGL6、AGL15与SOC1、AGL24、SVP蛋白的互作研究[D]. 马关鹏.西南大学 2016
[3]芥菜AGL24基因的启动子克隆与其互作因子SOC1遗传转化研究[D]. 陈娇.西南大学 2016
[4]芥菜开花整合子SOC1与开花抑制因子SVP、FLC蛋白相互作用[D]. 谷慧英.西南大学 2015
[5]芥菜开花调控基因SVP和AGL24的克隆及其表达分析[D]. 杨修勤.西南大学 2014
[6]芥菜开花整合子SOC1的克隆和表达分析[D]. 邹晨辉.西南大学 2014
本文编号：3453465
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