核糖核酸还原酶基因对虫草素的转录调控作用

发布时间：2021-10-25 13:46

　　检测和分析核糖核酸还原酶大亚基（RNR-LC）基因、小亚基（RNR-M2）基因在不同蛹虫草菌株中m RNA的相对表达量与虫草素含量的变化关系,探究核糖核酸还原酶在虫草素合成途径中的转录调控作用。检测不同蛹虫草菌株虫草素含量,采用荧光PCR技术对蛹虫草RNR-LC基因、RNR-M2基因表达的m RNA进行定量分析,并应用双内参基因对试验数据进行校正。以虫草素含量最低的野生蛹虫草组为对照,米基虫草组RNR-LC、RNR-M2基因的m RNA表达量分别是野生蛹虫草组的1.28倍和1.47倍,蚕蛹虫草组分别是其2.35倍和3.84倍。与对照组相比,RNR-M2 mRNA表达随虫草素的增加总体呈现升高的变化规律。两种基因在不同蛹虫草菌株中的相对表达量存在显著性差异（p<0.05）。RNR-M2基因在高虫草素菌株中存在明显的表达优势,而RNR-LC基因表达量与虫草素含量无明显变化关系,二者不存在协同调控作用。推测RNR-M2基因在虫草素合成途径中起着重要的正向调控作用。 

【文章来源】：现代食品科技. 2020,36(09)北大核心

【文章页数】：6 页

【部分图文】：

虫草素高效液相色谱图

样本分为3组不同来源蛹虫草菌株，每组样本设置3个平行，每个样品设置3个重复。以各样品的RNR-M2基因对RNR-LC基因进行归一化处理，比较各样品之间二者m RNA的相对表达量差异。不同内参基因标准化m RNA的相对表达量见图2。结果表明，β-Actin与18S r RNA单独作为内参基因计算RNR-M2基因相对RNR-LC基因m RNA的相对表达量总体趋势较一致，但有极值出现，如β-Actin组在YY1处出现极大值，M1处出现极小值；18S r RNA组在M1处出现极大值，YY1处出现极小值。β-Actin和18S r RNA同时作为内参基因，计算结果与单内参基因基本一致，但相对表达量介于二者之间。2.2.2 检测结果变异程度比较

变异系数（coefficient of variation,CV）是用来描述不同测量值均数相差较大时的离散程度，统计学中用SD与?x之比表示。计算β-Actin、18S r RNA双内参基因和单内参基因时不同蛹虫草样品RNR-M2基因相对RNR-LC基因表达量的变异系数，结果见图3。结果显示，双内参基因计算标准化m RNA相对表达量在大多数样品中变异系数较小，且未出现极值；而单内参基因计算，样品TY2、M5、J3离散程度较大，结果不可靠。2.2.3 双内参基因2-ΔΔCt法检测目的基因相对表达量

【参考文献】：
期刊论文
[1]虫草素的药理作用及其应用前景[J]. 孙恩江,刘琪,黄志毅,孙凤刚.  广东饲料. 2018(05)
[2]野生与人工栽培蛹虫草主要成分对比分析[J]. 康丽娜.  新农业. 2013(03)

硕士论文
[1]虫草素生物合成相关基因RNR的克隆及功能验证研究[D]. 王玉贤.成都中医药大学 2018



本文编号：3457523