TTF-1基因过表达对肺腺癌细胞增殖能力、迁移和侵袭能力的影响

发布时间：2021-10-26 17:47

　　目的体外应用慢病毒载体转染构建TTF-1基因过表达的A549细胞系,然后实验室培养测试肺腺癌A549细胞的增殖能力、迁移和侵袭能力,以明确TTF-1基因对肺腺癌细胞增殖能力、迁移和侵袭能力的影响。方法分析TTF-1基因序列,设计单链Oligo序列,应用PCR法将TTF-1的cDNA的Oligo序列进行拼接,然后连入pCDH-CMV-MCS-EF1-CopGFP-T2A-puro,转化至感受态细胞DH-5α,测序鉴定;将携带TTF-1基因的慢病毒过表达重组载体转染至293T细胞,包装产生慢病毒,测定病毒滴度并应用最佳病毒滴度去感染人肺腺癌A549细胞株,构建过表达的TTF-1基因的肺腺癌细胞系,体外继续培养TTF-1基因过表达的A549细胞系,应用细胞增殖实验、细胞划痕实验及细胞迁移实验了解过表达TTF-1基因对肺腺癌细胞增殖能力、迁移和侵袭能力的影响。结果测序结果显示,TTF-1基因过表达慢病毒载体pCDH-CMV-MCS-EF1-CopGFP-T2A-puro构建成功,基因序列测序结果正确;经慢病毒包装所得病毒上清液经计算病毒滴度为6×10⁷TU/ml;稳定转染... 

【文章来源】：宁夏医科大学宁夏回族自治区

【文章页数】：52 页

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【参考文献】：
期刊论文
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[9]腺病毒对原代枯否细胞转染效率及增殖活性的影响[J]. 朱彤,涂文娟,谈志丽,刘亮明.  实用医学杂志. 2016(06)
[10]TTF-1蛋白在非小细胞肺癌中的表达及临床意义[J]. 毛燕青.  解放军医药杂志. 2015(12)



本文编号：3459932