pprM/pprI转基因果蝇模型构建及其辐射抗性研究
发布时间：2021-10-27 02:44
研究背景与目的:耐辐射奇球菌（Deinococcus radiodurans,DR）是一种耐受极端电离辐射的微生物。PprI在耐辐射奇球菌中起辐射响应总开关作用,PprM可能是一种PprI依赖的辐射响应的新型调控蛋白。本实验旨在构建稳定遗传表达抗辐射基因pprM/pprI的果蝇模型。研究抗辐射基因pprM/pprI转入果蝇后辐射抗性的影响,为辐射损伤治疗提供新思路。为监测核事故泄漏生物计量以及进一步研究耐辐射奇球菌的辐射防御机制及人类的辐射医学防护提供一定的实验依据。研究方法:1、用pGEX-6p-1-pprM、pDsRed1-N1-flag-pprI为PCR底物模板,扩增pprM、pprI基因,构建pattb-UAST-HA-pprM和pattb-UAST-HA-pprI载体。2、果蝇显微注射技术将pattb-UAST-HA-pprM和pattb-UAST-HA-pprI载体注射入果蝇胚胎中,构建转基因果蝇模型。3、提取辐照前后果蝇的总蛋白,并分别检测转基因果蝇和对照果蝇的总超氧化物歧化酶（SOD）活力、还原型谷胱甘肽（GSH）含量、过氧化氢酶（CAT）活力以及丙二醛（MDA）含量。...
【文章来源】：南华大学湖南省
【文章页数】：75 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
8.4转基因果蝇的平衡与定位Figure2.2.8.4balanceandpositioningoftransgenicfruitflies
图 2.3.1 PCR 扩增目的基因 pprM 电泳图 pprM electrophoresis of the target gene amplified by PM：DNAmarker；1：pGEX-6p-1-pprM PCR 产物ST-pprM 载体的鉴定的抗性 LB 平板上随机挑取单菌落，进行菌落抽提，用 EcoRI 和 XbaI 对提取的质粒载体进ttb-UAST-pprM 酶切产物的大小与目的基因 p对应，2.3.2 右图 1 泳道菌落 PCR 目的基因 pNAmarker 位置接近。图 2.3.3 部分 pattb-UAST 比对结果说明目的基因 pprM 成功插入到 pa证明 pattb-UAST-pprM 载体构建成功。
图 2.3.1 PCR 扩增目的基因 pprM 电泳图.1 The pprM electrophoresis of the target gene amplified by PCRM：DNAmarker；1：pGEX-6p-1-pprM PCR 产物b-UAST-pprM 载体的鉴定克隆的抗性 LB 平板上随机挑取单菌落，进行菌落 PCR，利质粒抽提，用 EcoRI 和 XbaI 对提取的质粒载体进行酶切知，pattb-UAST-pprM 酶切产物的大小与目的基因 pprM 和大小相对应，2.3.2 右图 1 泳道菌落 PCR 目的基因 pprM 的00bpDNAmarker 位置接近。图 2.3.3 部分 pattb-UAST-pprM BLAST 比对结果说明目的基因 pprM 成功插入到 pattb-UAS变，证明 pattb-UAST-pprM 载体构建成功。
【参考文献】：
期刊论文
[1]果蝇在肿瘤学研究中的优势及应用前景[J]. 霍桂桃,吕建军,屈哲,林志,张頔,杨艳伟,李波. 遗传. 2014(01)
[2]PprI和RecX蛋白对耐辐射奇球菌抗氧化作用的影响[J]. 田兵,张韶文,许镇坚,盛多红,华跃进,高冠军. 微生物学报. 2006(02)
[3]联合国原子辐射效应科学委员会及其第49次会议[J]. 潘自强,修炳林. 辐射防护. 2000(05)
本文编号：3460711
【文章来源】：南华大学湖南省
【文章页数】：75 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
8.4转基因果蝇的平衡与定位Figure2.2.8.4balanceandpositioningoftransgenicfruitflies
图 2.3.1 PCR 扩增目的基因 pprM 电泳图 pprM electrophoresis of the target gene amplified by PM：DNAmarker；1：pGEX-6p-1-pprM PCR 产物ST-pprM 载体的鉴定的抗性 LB 平板上随机挑取单菌落，进行菌落抽提，用 EcoRI 和 XbaI 对提取的质粒载体进ttb-UAST-pprM 酶切产物的大小与目的基因 p对应，2.3.2 右图 1 泳道菌落 PCR 目的基因 pNAmarker 位置接近。图 2.3.3 部分 pattb-UAST 比对结果说明目的基因 pprM 成功插入到 pa证明 pattb-UAST-pprM 载体构建成功。
图 2.3.1 PCR 扩增目的基因 pprM 电泳图.1 The pprM electrophoresis of the target gene amplified by PCRM：DNAmarker；1：pGEX-6p-1-pprM PCR 产物b-UAST-pprM 载体的鉴定克隆的抗性 LB 平板上随机挑取单菌落，进行菌落 PCR，利质粒抽提，用 EcoRI 和 XbaI 对提取的质粒载体进行酶切知，pattb-UAST-pprM 酶切产物的大小与目的基因 pprM 和大小相对应，2.3.2 右图 1 泳道菌落 PCR 目的基因 pprM 的00bpDNAmarker 位置接近。图 2.3.3 部分 pattb-UAST-pprM BLAST 比对结果说明目的基因 pprM 成功插入到 pattb-UAS变，证明 pattb-UAST-pprM 载体构建成功。
【参考文献】：
期刊论文
[1]果蝇在肿瘤学研究中的优势及应用前景[J]. 霍桂桃,吕建军,屈哲,林志,张頔,杨艳伟,李波. 遗传. 2014(01)
[2]PprI和RecX蛋白对耐辐射奇球菌抗氧化作用的影响[J]. 田兵,张韶文,许镇坚,盛多红,华跃进,高冠军. 微生物学报. 2006(02)
[3]联合国原子辐射效应科学委员会及其第49次会议[J]. 潘自强,修炳林. 辐射防护. 2000(05)
本文编号：3460711
本文链接：https://www.wllwen.com/kejilunwen/jiyingongcheng/3460711.html
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