戊二酸尿症Ⅰ型基因敲除大鼠模型的构建和鉴定

发布时间：2021-10-27 05:37

　　目的:构建戊二酰辅酶A脱氢酶（GCDH）基因敲除大鼠,为进一步研究戊二酸尿症Ⅰ型发病机制和治疗方法提供动物模型。方法:利用转录激活因子样效应物核酸酶（TALEN）技术制备GCDH基因敲除大鼠,设计GCDH基因打靶位点,构建载体,体外转录mRNA,显微注射入SD大鼠受精卵,鉴定F0代大鼠。经饲养、配种、繁殖后,剪尾、PCR及电泳检测子代大鼠基因型,观察并统计GCDH基因敲除幼鼠出生及存活情况。高赖氨酸饮食诱导GCDH^-/-大鼠发病,HE染色观察大鼠脑组织的病理变化。结果:经基因检测及测序验证,成功制备GCDH^-/-大鼠,子代大鼠基因型符合孟德尔遗传定律并可稳定繁殖。8周龄GCDH^-/-大鼠给予高赖氨酸饲料喂养4周,5只中存活4只;同等条件的5只野生大鼠全部存活率。与野生型相比,高赖氨酸饮食GCDH^-/-大鼠脑出现细胞水肿、排列紊乱和空泡样变性。结论:成功建立GCDH^-/-大鼠模型。 

【文章来源】：郑州大学学报(医学版). 2020,55(06)北大核心

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【部分图文】：

GCDH基因敲除mRNA电泳图

F0代大鼠基因型

GCDH基因敲除杂合子子代基因型分别为纯合子、杂合子、野生型3种,基因鉴定结果见图3。其中1、2、3为GCDH-/-大鼠,4、5、6、9为GCDH-/+大鼠,7、8、10为野生型大鼠。2.3 GA-Ⅰ大鼠模型的死亡率

【参考文献】：
期刊论文
[1]Retake the Center Stage-New Development of Rat Genetics[J]. Kindiya Geghman,Sushila Shenoy.  遗传学报. 2012(06)



本文编号：3460980