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小黑杨转录因子PsnMYB108基因耐盐胁迫功能分析

发布时间:2021-10-27 10:47
  MYB转录因子家族作为植物最大的转录因子家族之一,参与植物的整个生长发育过程,在植物应答外界逆境胁迫中非常重要。本研究以小黑杨(Populus simsonii×Pnigra)为材料,从本实验室前期筛选出的耐盐基因中,选择PsnMYB108基因作为研究对象进行基因功能分析。结果如下:从小黑杨叶片中克隆出954bp的PsnMYB108基因的cDNA片段,其编码的蛋白含有317个氨基酸,属于不稳定的亲水蛋白,不存在信号肽,不具跨膜能力,含两个MYB家族保守结构域。系统进化树表明,小黑杨PsnMYB108蛋白与毛果杨MYB108蛋白及胡杨、榴莲、茶花、银白杨、向日葵的MYB108-like蛋白具有较近的遗传距离。PsnMYB108启动子中含有与植物抗逆相关的顺式作用元件。亚细胞定位结果表明,PsnMYB108蛋白定位于细胞核中。PsnMYB108基因表达具有组织特异性,并受胁迫诱导表达。PsnMYB108基因在根中的相对表达水平明显比在茎和叶中表达水平高。在盐胁迫下,PsnMYB108基因表现上调表达。表明PsnMYB108基因可能与植物应答高盐胁迫相关。将PsnMYB108基因 ORF 分... 

【文章来源】:东北林业大学黑龙江省 211工程院校 教育部直属院校

【文章页数】:70 页

【学位级别】:硕士

【部分图文】:

小黑杨转录因子PsnMYB108基因耐盐胁迫功能分析


图2-2小黑杨PwMZWfW基因的全长??Fig.2-2?Full?length?oiPsnMYB108?gene??

琼脂糖,凝胶电泳,叶片,基因


2小黑杨PsnMVTWJOS基因的克隆及表达分析??谓??图2-1小黑杨叶片总RNA琼脂糖凝胶电泳检测??Fig.2-1?Total?RNA?agarose?electrophoresis?detection?of?Populus?simonii^RnigJ-a?leave??2.?3.?2小黑杨Psa?/WKS:ZOS基因的克隆??将小黑杨RNA反转录得到的cDNA稀释10倍后作为模板,以PotMFB/似-F、??乃《从757仰-R为引物进行PCR扩增,扩增出一条长度为954bp的DNA片段(图??2-2)。??tvterker?PsnMYB108??1000bp???750bp?——?^4bP??5〇〇bp?—??250bp?????bp?1??H??图2-2小黑杨PwMZWfW基因的全长??Fig.2-2?Full?length?oiPsnMYB108?gene??将小黑杨彻基因与pMD19-T载体相连接,并导入大肠杆菌,挑取??5个白色斑点,摇菌后进行PCR反应,电泳检测后仍能在凝胶成像仪下观察到??954bp长度片段,选择目的条带正确菌液送至生工测序,结果比对正确,表明??尸MM7570S基因与pMD19-T载体连接成功(图2-3)。保留测序成功菌液备用。??20??

氨基酸序列,基因,载体,蛋白


东北林业大学硕士论文??M?1?2?3?4?5??2000hp???10OObp???7s〇bp??????250bp?一??1〇〇bp?-??图2-3小黑杨/^?Mra7似基因与pMD19-T载体连接菌液PCR??Fig.2-3?PCR?of?PsnMYB108?gene?linked?to?T?vector??2.?3.?3小黑杨PS/7/WY8彳OS基因生物信息学分析??2.?3.?3.?1小黑杨PsnMYB108蛋白基本理化性质分析及二级结构预测??从小黑杨cDNA模板中克隆获得954bp的基因cDNA片段,编??码317个氨基酸,含20种氨基酸(图2-4),具完整的开放阅读框。PsnMYB108??蛋白的化学式SC1569H24mN4550?496S16,等电点(PI)为5.93,不稳定系数为49.31,??属于不稳定蛋白。??121?10.1??艺?1〇-?6.2??W?3-5.6?6.3?s?5'9?5.3??4fl?,?_?57?5?5??菡?I?I?a?■?^4-1?3?24'1?44??3.S44??5?llllldllmH.illiii??尝11^550!!兰3昱111沒f兰兰5??图2-4?PsnMYB108蛋白编码氨基酸含量??Fig.2-4?Secondary?structure?of?PsnMYB108?protein??利用在线软件SOPMA对小黑杨PsnMYB108蛋白的氨基酸序列进行二级结??构预测,结果表明该蛋白主要由无规则卷曲(53.77%)、a-螺旋(39.62%)、??延伸链(4.40%)、B-折叠(2.20%)组成(图?2-5,表?2-

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本文编号:3461447

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