罗伯茨绿僵菌WD40重复蛋白CreC基因的功能研究
发布时间：2021-10-27 11:02
罗伯茨绿僵菌（Metarhizium robertsii）属于害虫生防真菌,在农林害虫防治中起着非常重要的作用。因其作为真菌杀虫剂具备安全、环保、易生产、货架期长等优点,多年来被广泛研究。然而却因杀虫效率低、致死时间长、防效不稳定等问题限制了它的大规模应用。因此,系统深入了解罗伯茨绿僵菌的致病和抗逆机制,并对其进行基因遗传改良成为了当下迫切需要的途径。WD40重复蛋白CreC基因是碳分解代谢抑制途径（CCR）中一个非常重要的调节因子,研究发现碳分解代谢抑制与昆虫病原真菌的生长和致病性有密切的关系。本实验以罗伯茨绿僵菌作为研究对象,通过基因敲除技术获得CreC敲除株,进一步分析CreC基因对罗伯茨绿僵菌的生长发育和致病性的影响。研究结果表明:与野生型（Mr23）相比,敲除株（△MrCreC）在SDAY、1/4SDAY和PDA上菌落直径明显减小,在几种碳源培养基上的生长速度减慢;产孢量相比野生型下降了 65%,同时RT-PCR结果显示与产孢量相关的基因大部分转录水平显著降低;敲除株在含刚果红、双氧水、氯化钠和氯化钾培养基上抑制生长更明显,相比野生型相对抑制率分别增加了 14%,8%,7%,...
【文章来源】：安徽农业大学安徽省
【文章页数】：60 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图１?Ｇ蛋白Ｐ亚基三维结构１３９１??Ｆｉ１?Ｔｈｒｅｅ－ｄｉｍｅｎｓｉｏｎａｌ?ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ?ｏｆＧｒｏｔｅｉｎ?ｂｅｔａ?ｓｕｂｕｎｉｔ??
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４结果与分析??４．１?ＣｒｅＣ基因序列分析??４．１．１?Ｃ／ｒＣ基因生物信息学分析??ＣｒｅＣ基因全长有２４１４ｂｐ，ｍＲＮＡ长度为１９２０ｂｐ，编码含有６３９个氨基酸的蛋白??质。用ＥｘＰＡＳｙ在线检测软件对ＣｒＫ基因进行预测，分子量为６９．８ｋＤａ，理论等电点??为６．００。在ＮＣＢＩ网站对其编码的蛋白进行分析可知，该基因含有ＷＤ４０家族保守功能??域，含有４个ＷＤ４０重复基元（图３，?ｂ蓝色划线部分）。对其三维结构进行模拟（图??３，?ｃ），可观察到Ｐ－螺旋桨结构，该结构的ＷＤ重复基元可参与蛋白与蛋白的相互作用。??（ａ）?！一?卜今卜卜??＂＾３００?＊４００?＇?ＳＯＯ??ＭＦＶＬＰＰＰＰＲＹＰＩＧＯＰＹＧＡＴＣＴＴＧＩＶＰＭＩＥＴＮＮＴ１ＳＮＰＴＧＰＥＷＱＦＬＶＧＥＧＴＹＶＬＫＥＤ??ＬＨＬＡＴＰＰＰＨＰＳＥＡＰＩＶＮＰＮＰＬＡＴＮｎＰＱＰＡＳＶＧＴＫＭＴＬＶＲＩＱＳＲＰＰＰＦＦＹＲＧＰＳＡＴＴＬＳＬＧ??ＧＡＳ?Ｓ?ＱＤＱ?Ｓ?ＧＯ?ＡＲＹＳＴＥ?ＧＧＭＳ?ＳＥＤ?ＧＲＯＴＳ?ＴＳＤＡＰＮＳＡＴＬＧＦ?ＴＰＡＦ?ＧＥＧＮＳＬＬＶＰＳ?ＱＴ??ＫＤＶＮＫＲＫＫＰＫＮＮＶＴＫＳＮＳＳＦＩＳＲＶＩＶＮＥＳＬＳＲＲＭＴＤＲＰＧＤＧＩＦＡＦＡＮｒＮｒＲＡＦＱＷＬＤ??Ｌ?Ｓ?ＳＰＮＫＱＤ?ＹＦＴＫＩＬＦＴＫＡＨＣＬ?ＳＨＤ?ＶＮＭＶＴＫＧＡＳＨＩＤ?ＶＬＭＧＦＳＴＧＥＩＩＷＷＥＰＩＳＱＲＹＴ??ＲＭＸＫＺＶＧＶＩＸＮＴＰ＇＾ＴｍＫＷＩＰＧＳＥＮＬＦＬＡＡＨＡｒＰＧＳＩＡ＾ＨＫＥＫＤＤＳＯＦＴＰＥＤＤＥ??ＴＳＶＨＧＳＥＳＧＨＧＯＮＧＶＫＰＧＴＫＭＨＩＡＫＳＶＨＳＯＮＯＫＴＮＰＶＡＡＷＫＬＳＮＯＲＩＸＳＦＡＦＳＰ?
本文编号：3461468
【文章来源】：安徽农业大学安徽省
【文章页数】：60 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图１?Ｇ蛋白Ｐ亚基三维结构１３９１??Ｆｉ１?Ｔｈｒｅｅ－ｄｉｍｅｎｓｉｏｎａｌ?ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ?ｏｆＧｒｏｔｅｉｎ?ｂｅｔａ?ｓｕｂｕｎｉｔ??
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４结果与分析??４．１?ＣｒｅＣ基因序列分析??４．１．１?Ｃ／ｒＣ基因生物信息学分析??ＣｒｅＣ基因全长有２４１４ｂｐ，ｍＲＮＡ长度为１９２０ｂｐ，编码含有６３９个氨基酸的蛋白??质。用ＥｘＰＡＳｙ在线检测软件对ＣｒＫ基因进行预测，分子量为６９．８ｋＤａ，理论等电点??为６．００。在ＮＣＢＩ网站对其编码的蛋白进行分析可知，该基因含有ＷＤ４０家族保守功能??域，含有４个ＷＤ４０重复基元（图３，?ｂ蓝色划线部分）。对其三维结构进行模拟（图??３，?ｃ），可观察到Ｐ－螺旋桨结构，该结构的ＷＤ重复基元可参与蛋白与蛋白的相互作用。??（ａ）?！一?卜今卜卜??＂＾３００?＊４００?＇?ＳＯＯ??ＭＦＶＬＰＰＰＰＲＹＰＩＧＯＰＹＧＡＴＣＴＴＧＩＶＰＭＩＥＴＮＮＴ１ＳＮＰＴＧＰＥＷＱＦＬＶＧＥＧＴＹＶＬＫＥＤ??ＬＨＬＡＴＰＰＰＨＰＳＥＡＰＩＶＮＰＮＰＬＡＴＮｎＰＱＰＡＳＶＧＴＫＭＴＬＶＲＩＱＳＲＰＰＰＦＦＹＲＧＰＳＡＴＴＬＳＬＧ??ＧＡＳ?Ｓ?ＱＤＱ?Ｓ?ＧＯ?ＡＲＹＳＴＥ?ＧＧＭＳ?ＳＥＤ?ＧＲＯＴＳ?ＴＳＤＡＰＮＳＡＴＬＧＦ?ＴＰＡＦ?ＧＥＧＮＳＬＬＶＰＳ?ＱＴ??ＫＤＶＮＫＲＫＫＰＫＮＮＶＴＫＳＮＳＳＦＩＳＲＶＩＶＮＥＳＬＳＲＲＭＴＤＲＰＧＤＧＩＦＡＦＡＮｒＮｒＲＡＦＱＷＬＤ??Ｌ?Ｓ?ＳＰＮＫＱＤ?ＹＦＴＫＩＬＦＴＫＡＨＣＬ?ＳＨＤ?ＶＮＭＶＴＫＧＡＳＨＩＤ?ＶＬＭＧＦＳＴＧＥＩＩＷＷＥＰＩＳＱＲＹＴ??ＲＭＸＫＺＶＧＶＩＸＮＴＰ＇＾ＴｍＫＷＩＰＧＳＥＮＬＦＬＡＡＨＡｒＰＧＳＩＡ＾ＨＫＥＫＤＤＳＯＦＴＰＥＤＤＥ??ＴＳＶＨＧＳＥＳＧＨＧＯＮＧＶＫＰＧＴＫＭＨＩＡＫＳＶＨＳＯＮＯＫＴＮＰＶＡＡＷＫＬＳＮＯＲＩＸＳＦＡＦＳＰ?
本文编号：3461468
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