聚合物修饰的硅纳米线阵列辅助基因传递体系的构建

发布时间：2021-11-04 08:57

　　基因治疗是指将外源性基因传递进病变细胞从而达到治疗效果的一种基因水平的治疗方法,它为克服难治愈性疾病带来了新的希望。基因治疗的关键在于如何安全有效地将外源基因传递进靶细胞中。传统的转染方法大多是依赖于溶液介导的基因传递途径,基因通过胞吞作用进入细胞的效率较低且易被降解,这极大地限制了转染的效率。基于材料表面介导的转染方法具有原位定域性和长效稳定性等特点,为有效解决基因传递效率低下的问题提供了可行的策略。在众多的生物材料中,硅纳米线阵列（SiNWAs,SN）由于其良好的生物相容性而受到了关注,研究发现适当长度的SN能够刺穿细胞膜而不影响细胞的活性。利用SN的这一特性可以将外源生物分子如多肽、DNA和RNA等传递进细胞发挥其作用。但SN表面存在氧化层,无法有效负载DNA。为了提高硅纳米线阵列的转染效率我们对SN表面进行了化学修饰,并辅之以提高DNA负载量和促进基因表达的手段,具体研究如下:1.我们在硅纳米线阵列表面接枝了具有优良生物相容性的6-O-磺化壳聚糖,同时结合能与DNA相互作用形成纳米复合物的Ca2+来提高DNA的负载效率从而提高体系的转染效率。在这一转染体系中,我们充分利用SN穿... 

【文章来源】：苏州大学江苏省 211工程院校

【文章页数】：112 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图１－３非病毒型基因载体转染机理ｎ７］

ｏｏＱＯｘｘｘｘｘ＾＾＾Ｊｌ＾＾＾ｏｏｏａｘｘ＾ＪＱｏｏｏｏｏｏｏｏ??Ｃａ２＋?Ｃａ２＜２＾?〇?Ｃａ２＋??ｃａ－?ｃａ２＋??ｏｏｏｏｏｏｏｏｏｏｏｏｏｏｏｏａ＾＾＾＾＾＾＾Ｂ＾－＾＾３０００００００００００００００００００??Ｃａ２＋??Ｂ?“??ｏｏｏｏｏｏｏｏｏｆ?Ｔ?］ＸＸＸＸＸ）Ｃ＾３＾＾＾＾＾＾＾｜Ｂ＾Ｘ＞〇〇ＯＯＯｃ／?］〇〇〇〇〇〇〇〇??ｏｏｏｏｏｏｏｏｏｏｏｏｏｏｏｏ〇〇ｃ＾＾＾＿＾＾ｊ＾＾Ｊ＾＾＿＿＾＾＾ｏｏ〇ｏ〇〇〇〇〇ｏｏｏｏｏｏｏｏｏｏ??图１－４钙离子调控的核孔复合物示意图（Ａ：?Ｃａ２＋存在条件下；Ｂ：?Ｃａ２＋从核池??中释放出去后）［２７］。??尽管磷酸钙转染体系有着上述种种优点，但该体系的转染效率难以达到一致，??温度、ｐＨ值以及溶液中的离子浓度等因素都会对形成的复合粒子的粒径产生重??要影响。同时在磷酸钙颗粒的形成过程中，纳米粒子将大量聚集导致粒子难以进??入细胞，降低了转染效率。为了解决这一问题，提高磷酸钙转染的效率和稳定性，??许多研究者通过调整磷酸钙粒子的制备方法或是添加助剂来控制形成的磷酸钙??粒子的粒径。如在磷酸钙转染体系中加入适量浓度的Ｍｇ２＇?Ｃｕ２＋、Ｍｎ２＋等二价??４??

…?（Ｌ－ＰＥＩ）??—?ｈ２ｎ＇ｎＺ?＇ｎｖ＾ｈ２－－－??＾?）?：??ｎｈ２?Ａ??？?丨?．．?ｈ２ｎ?ｍｎ?３￣ｋ，ｈ??ｐｏｌｙ（ｐｒｏｐｙｌｅｎｉｍｉｎｅ）?Ｓ?ｏｆＨ?？Ｈ＾＊?？??（ｐｐ｜）??…ｉ。ＨＮ？Ｎｖ??Ｈ?Ｃ?ｉ〇??Ｈ?９?Ｈ＼??十?４?。、＇Ｎ?？ｗ??…１ＨｆＡ??Ｓ?６?ｓ?％??ＮＨ２?Ｙ?：??ｐｏｌｙ（ｌｙｓｉｎｅ）?ｐｏｌｙ（ａｍｉｄｏａｍｉｎｅ）??（ＰＬＬ）?（ＰＡＭＡＭ）??图１－５常用的阳离子聚合物［３１］。??１．２．２．１聚乙烯亚胺（ＰＥＩ）??作为最常用的阳离子聚合物，聚乙烯二胺（ＰＥＩ）聚合物链上含有大量的氨??基，因此具有较高的电荷密度，容易和带负电荷的基因作用形成复合物。同时，??ＰＥＩ具有所谓的“质子海绵效应”，能够保护目标ＤＮＡ从内涵体／溶酶体中逃逸??出来，这是因为ＰＥＩ本身含有大量的氨基，在进入细胞溶酶体后能够迅速被质子??６??


本文编号：3475415