沉默MDR1基因表达逆转肺癌A549/DDP细胞对顺铂的耐药性

发布时间：2021-11-06 06:09

　　本研究以A549/DDP细胞为实验对象,利用shRNA（short hairpin RNA）沉默MDR1基因,逆转人肺癌A549/DDP细胞对顺铂的耐药性。构建3种靶向MDR1基因重组干扰载体,稳定转染A549/DDP细胞,qRT-PCR检测MDR1 mRNA表达水平,Western blotting检测MDR1蛋白表达水平,MTT法检测细胞对顺铂的敏感性。结果显示成功构建了3种靶向MDR1的重组表达载体p2.1-1、p2.1-2和p2.1-3。3种干扰表达载体均能有效沉默A549/DDP细胞MDR1基因表达,其中p2.1-3对MDR1沉默效果最好,对mRNA和蛋白的沉默效率分别为51.47%和53.24%。转染p2.1-3的细胞对顺铂的IC50由（72.08±7.00）μmol/L降至（31.89±3.39）μmol/L,逆转率达到（67.60±5.70）%。这些结果表明靶向MDR1的重组干扰载体均能够有效抑制MDR1表达,其中p2.1-3干扰效果最佳并且能逆转A549/DDP细胞对顺铂的耐药性。 

【文章来源】：基因组学与应用生物学. 2016,35(12)北大核心CSCD

【文章页数】：5 页

【文章目录】：
1 结果与分析
    1.1 靶向MDR1重组干扰载体的构建
    1.2 重组干扰载体对MDR1 m RNA表达的影响
    1.3 重组干扰载体对MDR1蛋白质表达的影响
    1.4 A549/DDP转染细胞对顺铂耐药性
2 讨论
3 材料与方法
    3.1 材料来源
    3.2 靶向MDR1的重组干扰载体的构建
    3.3 重组干扰载体转染A549/DDP细胞
    3.4 q RT-PCR检测MDR1/m RNA的表达水平
    3.5 Western blotting检测MDR1蛋白水平
    3.6 MTT法检测细胞对顺铂的敏感性变化
    3.7 统计学分析
作者贡献


【参考文献】：
期刊论文
[1]与P-糖蛋白及MDR1基因关联的药物转运研究现状[J]. 冯慧玲,熊玉卿.  中国临床药理学杂志. 2014(11)
[2]肺癌的流行病学及治疗现状[J]. 姚晓军,刘伦旭.  现代肿瘤医学. 2014(08)
[3]MDR1调控的信号传导机制研究进展[J]. 王秀梅,彭文兴,文晓柯.  中国医药指南. 2012(30)
[4]肺癌的免疫治疗临床研究进展[J]. 金莎,田建辉.  中国肺癌杂志. 2012(10)
[5]耐顺铂相关基因MDR1、MRP、LRP及GST-π在非小细胞肺癌中的表达及与生存相关的Meta分析[J]. 赵明静,马列,王群,韩冰,王笑歌.  现代肿瘤医学. 2012(08)
[6]RNAi抑制肾癌细胞MDR1基因表达及对顺铂化疗耐药的逆转[J]. 郝怡鑫,贺铮雯,杜楠,鲁琼,肖文华,沈茜.  肿瘤. 2010(02)
[7]靶向MDR1基因的RNAi稳定逆转结肠癌细胞的多药耐药性[J]. 夏忠胜,朱兆华,陈其奎,钟英强,张立勇,刘仲敏,ADAM Bao-ling.  中国病理生理杂志. 2009(05)



本文编号：3479316