转SoSUT5基因甘蔗T 1 代的功能验证及生理生化特性分析
发布时间：2021-11-06 09:45
甘蔗是最重要的糖料作物。在世界食糖总产量中,75%来自甘蔗,而在我国则占90%以上。甘蔗生产对中国的食糖安全至关重要。甘蔗通过光合作用产生的蔗糖,从源组织运输到库组织的跨膜运输需要蔗糖转运蛋白（SUT）的介导。SUT在蔗糖的贮藏、转运、代谢等生理过程中发挥着重要作用。本试验以6个T1代转基因甘蔗品系（T1、T2、T3、T6、T9、T11）和对照（WT）为材料,采用温室大棚种植,旨在探究甘蔗在苗期、分蘖期、伸长期、工艺成熟期的农艺性状、蔗糖代谢相关酶活性以及甘蔗在工艺成熟期的节间糖分和SoSUT5表达量,为探究SoSUT5的功能提供研究参考依据。主要研究结果如下:（1）利用多重PCR和除草剂抗性筛选验证了转基因材料。通过PCR扩增标记基因bar植物表达载体与外源基因SoSUT5构成的重组片段,并对bar基因测序,结果表明,6个甘蔗品系均为转基因甘蔗。经过除草剂抗性筛选,6个甘蔗品系均具有一定的除草剂抗性,进一步从表现型上证明了它们是转基因甘蔗。（2）对甘蔗的农艺性状调查的结果表明,除品系T6外,转基因甘蔗的株高增高,茎径增粗,二者都随着生长而不断增加,品系T1、T2的株高与WT的差异达显...
【文章来源】：广西大学广西壮族自治区 211工程院校
【文章页数】：72 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
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【参考文献】：
期刊论文
[1]龙眼中性转化酶基因（DlNI）的克隆及分析[J]. 帅良,廖玲燕,韩冬梅,吴振先. 西南农业学报. 2017(10)
[2]喷施沼液对苹果产量品质及蔗糖代谢相关酶活性的影响[J]. 陈建伟,贾亮亮,赵京奇,王彦博,任广鑫,杨改河. 北方园艺. 2017(18)
[3]甘蔗蔗糖转运蛋白SoSUT2基因克隆和表达分析[J]. 牛俊奇,王震,杨丽涛,李杨瑞. 中国农业大学学报. 2017(06)
[4]植物蔗糖转运蛋白及其生理功能的研究进展[J]. 涂文睿,蔡昱萌,颜婧,卢江,张雅丽. 生物技术通报. 2017(04)
[5]牡丹蔗糖转运蛋白基因PsSUT2的克隆及表达分析[J]. 栗燕,杨旭升,杨秋生,崔洋,常毅洪,高梦媛,宋佳. 农业生物技术学报. 2017(04)
[6]不同甜高粱品种蔗糖合成酶、蔗糖磷酸合成酶活性与糖分积累的关系[J]. 李春阳,胡瑞芳,张馨月,杨阳,逄洪波,李玥莹. 江苏农业科学. 2016(11)
[7]木薯碱性/中性转化酶MeNINV1基因启动子的克隆及激素应答表达分析[J]. 王运林,姚远,耿梦婷,孙冲,尚璐,李瑞梅,符少萍,胡新文,郭建春. 分子植物育种. 2017(02)
[8]植物蔗糖转运蛋白研究进展[J]. 张清,胡伟长,张积森. 热带作物学报. 2016(01)
[9]茶树中性/碱性转化酶基因CsINV10的克隆与表达分析[J]. 钱文俊,岳川,曹红利,郝心愿,王璐,王玉春,黄玉婷,王博,王新超,肖斌,杨亚军. 作物学报. 2016(03)
[10]不同成熟期甘蔗品质性状分析[J]. 方志存,高欣欣,李美蓉,旗尔,邓军,刘少春,刀静梅,樊仙,李复琴,郭家文. 中国糖料. 2015(06)
博士论文
[1]甘蔗蔗糖转化和转运相关基因的克隆、表达及其与蔗糖积累相关性的研究[D]. 牛俊奇.广西大学 2015
[2]铜胁迫下不同种群鸡眼草的生理响应及酸性转化酶分子机制研究[D]. 张峦.武汉大学 2014
[3]甘蔗不同类型蔗糖转运蛋白基因克隆及功能分析[D]. 赵婷婷.海南大学 2012
[4]甜瓜蔗糖磷酸合成酶基因的功能鉴定与分析[D]. 田红梅.山东农业大学 2011
[5]番茄光合运转糖—蔗糖的运转、代谢及其相关影响因素的研究[D]. 齐红岩.沈阳农业大学 2004
[6]甘蔗节间生长与相关的生理生化研究[D]. 潘有强.福建农林大学 2003
硕士论文
[1]马铃薯StSUT2基因干扰载体的构建及遗传转化[D]. 徐进.兰州理工大学 2017
[2]木薯碱性/中性转化酶nINV1基因功能的初步研究[D]. 孙冲.黑龙江八一农垦大学 2017
[3]枳碱性/中性转化酶基因PtrA/NINV功能分析[D]. 巴沙尔（BACHAR DAHRO）.华中农业大学 2016
[4]甘蔗蔗糖转运蛋白基因SoSUT5的遗传转化[D]. 赵文慧.广西大学 2016
[5]甘蔗宿根矮化病病原菌膜蛋白Lxx18460基因的特性研究[D]. 邵敏.广西大学 2015
[6]转popW基因烟草的鉴定及其抗病抗氧化分析[D]. 王翠.南京农业大学 2014
[7]桃蔗糖转运蛋白基因的克隆与原核表达[D]. 丁宁.河南农业大学 2014
[8]番茄细胞壁蔗糖转化酶抑制蛋白（Le-INVINH1）在植株抵抗低温胁迫中的功能研究[D]. 徐晓霞.华中师范大学 2013
[9]甘蔗ShSUT4基因RNAi表达载体的构建及其遗传转化研究[D]. 郭婷.海南大学 2013
[10]转基因大豆分子检测技术方法的建立与应用[D]. 杨文明.南京农业大学 2013
本文编号：3479610
【文章来源】：广西大学广西壮族自治区 211工程院校
【文章页数】：72 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图２－１甘蔗总ＤＮＡ电泳检测图??Ｆｉｇ．?２－１?Ａｇａｒｏｓｅ?ｇｅｌ?ｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｓｉｓ?ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ?ｏｆ?ｓｕｇａｒｃａｎｅ?ＤＮＡ??
２．４．１甘薦总ＤＮＡ提取??按照ＤＮＡ提取试剂盒说明书提取甘蔗总ＤＮＡ，经１％的琼脂糖凝胶电泳检??测（图２－１），结果显示电泳条带清晰，说明提取的ＤＮＡ无杂带和降解。??ｌｉｉｉｉｌＭ??图２－１甘蔗总ＤＮＡ电泳检测图??Ｆｉｇ．?２－１?Ａｇａｒｏｓｅ?ｇｅｌ?ｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｓｉｓ?ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ?ｏｆ?ｓｕｇａｒｃａｎｅ?ＤＮＡ??１＊６：转細ｉｉｉｔｒ蔗品系（Ｔｌ、Ｔ２、Ｔ３、Ｔ６、Ｔ９、Ｔｉｌ）：?７：野生?１廿蔗（ＷＴ）??１－６：?ＳｏＳＵＴ５?ｔｒａｎｓｇｅｎｉｃ?ｓｕｇａｒｃａｎｅ?ｌｉｎｅｓ?（Ｔｌ，?Ｔ２．?Ｔ３，?Ｔ６，?Ｔ９，?Ｔ１１）；?７：?ｗｉｄｅ?ｔｙｐｅ?ｓｕｇａｒｃａｎｅ?（ＷＴ）??２．４．２转化甘蔗的ＰＣＲ检测??由ｈｒ引物扩增出的ＰＣＲ产物，经０．８％的琼脂糖凝胶电泳检测，结果（图??２－２）显示，６个品系扩增出的条带均与正对照的条带一致，且负对照的条带弥散，??水的条带不与正对照一致，可能是引物二聚体。将６个品系扩增出的产物经胶回??收纯化后送测序，并将得到的测序结果在ＮＣＢＩ上进行序列比对，结果显示扩增??片段的序列与目的基因序列一致
广西大学领士学位论文?转基因甘廉Ｔ！代的生理生化特性分析??由ｐＵＢＴＣ－ＳｏＳＵＴ５引物扩增出的ＰＣＲ产物，经０．８％的琼脂糖凝胶电泳检??测，结果（图２－３）显示，６个品系扩增出的条带均与正对照的条带一致，且负对??照的条带与正对照条带不一致。由ｐＵＢＴＣ?－?ＳｏＳＵＴ５引物扩增出的ＰＣＲ产物包??含了质粒ｐＵＢＴＣ片段和外源基因乃片段，证明６个品系均为转基因甘蔗。??
【参考文献】：
期刊论文
[1]龙眼中性转化酶基因（DlNI）的克隆及分析[J]. 帅良,廖玲燕,韩冬梅,吴振先. 西南农业学报. 2017(10)
[2]喷施沼液对苹果产量品质及蔗糖代谢相关酶活性的影响[J]. 陈建伟,贾亮亮,赵京奇,王彦博,任广鑫,杨改河. 北方园艺. 2017(18)
[3]甘蔗蔗糖转运蛋白SoSUT2基因克隆和表达分析[J]. 牛俊奇,王震,杨丽涛,李杨瑞. 中国农业大学学报. 2017(06)
[4]植物蔗糖转运蛋白及其生理功能的研究进展[J]. 涂文睿,蔡昱萌,颜婧,卢江,张雅丽. 生物技术通报. 2017(04)
[5]牡丹蔗糖转运蛋白基因PsSUT2的克隆及表达分析[J]. 栗燕,杨旭升,杨秋生,崔洋,常毅洪,高梦媛,宋佳. 农业生物技术学报. 2017(04)
[6]不同甜高粱品种蔗糖合成酶、蔗糖磷酸合成酶活性与糖分积累的关系[J]. 李春阳,胡瑞芳,张馨月,杨阳,逄洪波,李玥莹. 江苏农业科学. 2016(11)
[7]木薯碱性/中性转化酶MeNINV1基因启动子的克隆及激素应答表达分析[J]. 王运林,姚远,耿梦婷,孙冲,尚璐,李瑞梅,符少萍,胡新文,郭建春. 分子植物育种. 2017(02)
[8]植物蔗糖转运蛋白研究进展[J]. 张清,胡伟长,张积森. 热带作物学报. 2016(01)
[9]茶树中性/碱性转化酶基因CsINV10的克隆与表达分析[J]. 钱文俊,岳川,曹红利,郝心愿,王璐,王玉春,黄玉婷,王博,王新超,肖斌,杨亚军. 作物学报. 2016(03)
[10]不同成熟期甘蔗品质性状分析[J]. 方志存,高欣欣,李美蓉,旗尔,邓军,刘少春,刀静梅,樊仙,李复琴,郭家文. 中国糖料. 2015(06)
博士论文
[1]甘蔗蔗糖转化和转运相关基因的克隆、表达及其与蔗糖积累相关性的研究[D]. 牛俊奇.广西大学 2015
[2]铜胁迫下不同种群鸡眼草的生理响应及酸性转化酶分子机制研究[D]. 张峦.武汉大学 2014
[3]甘蔗不同类型蔗糖转运蛋白基因克隆及功能分析[D]. 赵婷婷.海南大学 2012
[4]甜瓜蔗糖磷酸合成酶基因的功能鉴定与分析[D]. 田红梅.山东农业大学 2011
[5]番茄光合运转糖—蔗糖的运转、代谢及其相关影响因素的研究[D]. 齐红岩.沈阳农业大学 2004
[6]甘蔗节间生长与相关的生理生化研究[D]. 潘有强.福建农林大学 2003
硕士论文
[1]马铃薯StSUT2基因干扰载体的构建及遗传转化[D]. 徐进.兰州理工大学 2017
[2]木薯碱性/中性转化酶nINV1基因功能的初步研究[D]. 孙冲.黑龙江八一农垦大学 2017
[3]枳碱性/中性转化酶基因PtrA/NINV功能分析[D]. 巴沙尔（BACHAR DAHRO）.华中农业大学 2016
[4]甘蔗蔗糖转运蛋白基因SoSUT5的遗传转化[D]. 赵文慧.广西大学 2016
[5]甘蔗宿根矮化病病原菌膜蛋白Lxx18460基因的特性研究[D]. 邵敏.广西大学 2015
[6]转popW基因烟草的鉴定及其抗病抗氧化分析[D]. 王翠.南京农业大学 2014
[7]桃蔗糖转运蛋白基因的克隆与原核表达[D]. 丁宁.河南农业大学 2014
[8]番茄细胞壁蔗糖转化酶抑制蛋白（Le-INVINH1）在植株抵抗低温胁迫中的功能研究[D]. 徐晓霞.华中师范大学 2013
[9]甘蔗ShSUT4基因RNAi表达载体的构建及其遗传转化研究[D]. 郭婷.海南大学 2013
[10]转基因大豆分子检测技术方法的建立与应用[D]. 杨文明.南京农业大学 2013
本文编号：3479610
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