CNOT7基因敲减通过JAK/STAT通路减少GM-CSF分泌对肝癌肿瘤免疫微环境影响的相关研究

发布时间：2021-11-06 12:29

　　目的:研究人CCR4-NOT转录复合体亚基7（human CCR4-NOT transcription complex subunit 7,CNOT7）敲减通过JAK/STAT通路减少肿瘤来源的GM-CSF分泌,进而干预髓源性抑制细胞（Myeloid-derived suppressor cells,MDSCs）在局部肿瘤免疫微环境的作用及相关机制。方法:1.ELISA法检测肝癌、肝炎、健康志愿者外周血GM-CSF分泌水平及TTCS和NTCS中GM-CSF分泌水平,并进行比较;2.流式细胞术检测肿瘤组织、瘤缘、非肿瘤正常肝组织中MDSCs数量;3.筛选合适肝癌细胞系;使用RNA干扰（RNAi）技术,将CNOT7重组质粒及相应对照空载体质粒转染HepG2细胞;4.Western blot方法检测敲减组、空质粒组和对照组CNOT7及信号传导过程中STAT1、STAT3、GM-CSF的蛋白表达水平。结果:1.肝癌组、肝炎组、对照组外周血GM-CSF水平无明显差异（P>0.05）。2.与肿瘤组（9.66±2.73 pg/ml）和正常肝组织组（11.61±2.89pg/ml）相比,瘤缘组（... 

【文章来源】：山西医科大学山西省

【文章页数】：43 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

外周血GM-CSF水平

图 2-1 外周血 GM-CSF 水平2.1.2 肿瘤局部 GM-CSF 分泌水平检测肿瘤组织培养上清液（TTCS）和非肿瘤组织培养上清液（NTCS），ELISA TTCS 和 NTCS 中 GM-CSF 分泌（图 2-2）：可以观察到瘤缘组（GM-CSF=32.8.90pg/ml），与肿瘤组（GM-CSF=9.66±2.73 pg/ml）相比，有统计学差异；瘤缘正常肝组织组（GM-CSF=11.61±2.89pg/ml）相比，有统计学差异（P＜0.05）。

山西医科大学硕士学位论文2.2 检测肝癌免疫微环境 DMSCs 数量2.2.1 流式细胞术检测结果取确诊为肝细胞癌患者组织病理标本（n=10），流式细胞术检测肝癌组织、癌肿边缘组织、正常肝组织匀浆单细胞悬液，检测各组 DMSCs（CD33＋CD11b＋）细胞比率，与肝癌组织组（4.16±2.22%）、正常肝组织组（6.22±2.29%）相比，瘤缘组（11.90±3.96%）中 CD33＋CD11b＋细胞比率明显增多，具有统计学差异（P<0.05）。（图 2-3）

【参考文献】：
期刊论文
[1]CNOT7基因敲减通过减少HepG2细胞TGF-β1分泌影响免疫微环境[J]. 郭舜,赵海潮,任晓静,任崇仁,贺杰峰,赵浩亮.  中国医科大学学报. 2019(03)



本文编号：3479835