多重PCR技术结合基因芯片检测致泻性大肠杆菌的研究

发布时间：2021-11-08 09:48

　　目的:建立一种多重PCR技术结合基因芯片检测的方式,对致泻性大肠杆菌的结果进行研究和必要分析。方法:本研究选取2019年3月-2020年3月本院进行致泻性大肠杆菌的病例,对多种致泻性大肠杆菌进行比较快速和准确的检测。对其中的肠致病性大肠杆菌、肠出血性大肠杆菌、侵袭性大肠杆菌和肠聚集性大肠杆菌及大肠杆菌O157的特异基因作为本次检验的主要目的基因内容。进行相关的引物和探针设计,并且需要对多重PCR扩增处理,使得寡核苷酸芯片加以制备。将多重PCR的最终扩增产物和其中具有特异特点的探针芯片进行有效杂交处理。在进行检验的时候,需要使用扫描仪对患者加以必要扫描,从而对患者细菌的种类及型别加以判断和确认。结果:在进行肠致病性大肠杆菌（EPEC）、肠出血性大肠杆菌（EHEC）、产肠毒素大肠杆菌（ETEC）、肠聚集性大肠杆菌（EAEC）和大肠杆菌O157检测的时候,特异性比较良好,在进行致病菌检测的时候,其检测的灵敏度能够达到104cfu/m L。结论:所建立的多重PCR技术结合基因芯片检测方法在进行致泻性大肠杆菌检验的过程中,具有特异性好和灵敏度高以及比较实用等特点。 

【文章来源】：名医. 2020,(12)

【文章页数】：2 页

【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 材料
    1.2 方法
        1.2.1 引物的设计和探针的合成
        1.2.2 菌株的培养
        1.2.3 DNA的提取
        1.2.4 多重PCR扩增
        1.2.5 基因芯片的杂交
        1.2.6 基因芯片的灵敏度检测
2 结果
3 讨论


【参考文献】：
期刊论文
[1]6类致泻大肠埃希氏菌多重PCR检测体系的建立[J]. 张明明,梁美丹,黄志深,劳嘉倩,肖剑.  食品安全质量检测学报. 2019(14)
[2]食品中致泻性大肠杆菌的毒力基因与血清型研究[J]. 付宇,吴晓敏,赵婧,孟庆敏,王彬,包名家.  中国卫生检验杂志. 2018(02)
[3]福建省延平区及永安市致泻性大肠埃希菌监测分析[J]. 杨劲松,郑恩惠,林杰,罗朝晨,陈爱平.  中国人兽共患病学报. 2017(04)
[4]多重PCR试剂盒在检测致泻性大肠埃希菌中的应用[J]. 林杰,郑恩惠,杨劲松,陈爱平.  中国卫生检验杂志. 2017(06)
[5]2015年洛阳市食品加工从业人员致泻性大肠埃希氏菌带菌状况调查[J]. 仝志琴,李克伟,徐礼扬,李会,杨晓燕,王玲玲.  现代预防医学. 2017(05)
[6]146株致泻性大肠埃希菌多重PCR结果分析[J]. 郑恩惠,李曲文,林杰,杨劲松,陈爱平.  预防医学论坛. 2017(03)
[7]2011年-2013年杭州地区致泻性大肠埃希菌的流行特征及耐药性分析[J]. 周芳美,陈晓,余斐,程东庆,陈瑜.  中国卫生检验杂志. 2016(11)
[8]多重PCR方法鉴定六类致泻性大肠埃希菌和志贺菌[J]. 张网,白向宁,赵爱兰,许彦梅,熊衍文.  疾病监测. 2016(05)
[9]沈阳地区致泻性大肠埃希菌的多重PCR检测及流行特征分析[J]. 于淼,薛惠昌,王卓,冯立,王立强,吴益民.  中国病原生物学杂志. 2015(11)
[10]河南省5种致泻性大肠埃希菌病原学监测[J]. 赵嘉咏,朱敏,谢志强,黄丽莉,穆玉姣,夏胜利,冉陆.  中国病原生物学杂志. 2015(10)

硕士论文
[1]腹泻标本中病原体快速检测流程的建立与评价[D]. 管红霞.中国疾病预防控制中心 2014
[2]2011-2013年杭州地区致泻性大肠埃希菌的流行特征与耐药性分析[D]. 周芳美.浙江大学 2014
[3]致泻大肠埃希菌的分子分型和流行病学研究[D]. 孔海深.浙江大学 2011



本文编号：3483494