RNA干扰hTERT基因对人恶性黑素瘤A375细胞增殖的影响

发布时间：2021-11-09 06:24

　　目的:建立特异性hTERT基因沉默模型并探讨靶向调控hTERT基因对人恶性黑素瘤A375细胞增殖能力的影响。方法:培养人恶性黑素瘤A375细胞且通过细胞STR分型鉴定确认细胞及交叉污染情况,将不同浓度（0、5.0、15.0、35.0nmol/L）的携带绿色荧光标记的特异性siRNA与不同体积（1.5、3.0、4.5μl）的转染试剂Hiperfect转染人恶性黑素瘤A375细胞,细胞的转染效率采用荧光显微镜判定,选出最佳的siRNA浓度和转染试剂体积;合成4条hTERT-siRNA（hTERT-siRNA-203、hTERTsiRNA-210、hTERT-siRNA-217、hTERT-siRNA-224）在最佳转染条件下分别转染人恶性黑素瘤A375细胞,24h后提取总mRNA,通过qPCR筛选干扰效率最佳的hTERT-siRNA,利用MTT法观察靶向沉默hTERT基因对黑素瘤细胞增殖能力的影响。结果:0、5.0、15.0、35.0nmol/L携带绿色荧光标记的特异性siRNA分别与1.5μlHiperfect转染人恶性黑素瘤A375细胞后,各组内转染效率分别为1.44%?0.49%、3... 

【文章来源】：新疆医科大学新疆维吾尔自治区

【文章页数】：51 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

人恶性黑素瘤A375细胞STR基因分型图谱

3分别为1.5、3.0、4.5μl转染试剂组.图2a 5.0nmol/L siRNA与3ulHiperfect转染细胞后的荧光显微镜下图Fig.2a Fluorescence microscopes of 5.0nmol/L siRNA and 3ulHiperfect transfected cells图 2b 5.0nmol/L siRNA 与 3ulHiperfect 转染细胞后的明视野图Fig.2b The visual field of 5.0nmol/L siRNA and 3ulHiperfect transfected cells图 2c 不同浓度 siRNA 组和不同体积 Hiperfect 的转染效率图(%)Fig.2c The tr

（F=57.21，P＜0.05），5.0nmol/L siRNA与3ulHiperfect的转染效率明显高于其他各组（均P＜0.05），转染效率最佳（如图2a，图2b，图2c,表2）。

【参考文献】：
期刊论文
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本文编号：3484796