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调控叉头盒转录基因F1表达对非小细胞肺癌细胞上皮间质转化、迁移和侵袭的作用

发布时间:2021-11-15 15:27
  目的通过慢病毒介导的shRNA敲低人非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)细胞株PC9中叉头盒转录基因F1(forkhead box-F1,FOXF1)的表达,研究FOXF1对细胞生长及侵袭迁移等能力的影响及可能的分子机制。方法慢病毒介导的shRNA敲低FOXF1的表达,采用实时荧光定量qRTPCR实验及Western Blot技术检测细胞中FOXF1 mRNA和蛋白的表达变化,平板克隆实验及CCK-8法检测细胞增殖情况,Transwell实验检测FOXF1基因表达对迁移及侵袭的影响,Western Blot检测上皮间充质转化相关蛋白的表达。结果慢病毒介导的shRNA感染PC9细胞后,有效下调了PC9细胞中FOXF1 mRNA和蛋白的表达水平(P <0.05),细胞的增殖能力受到抑制,细胞体外迁移及侵袭能力明显降低;Western Blot结果显示,抑制FOXF1表达后β-Catenin、N-cadherin、Vimentin、Snail表达下调,E-cadherin、ZO-1表达上调。结论下调FOXF1表达可抑制非小细胞肺癌PC9细胞的... 

【文章来源】:实用医学杂志. 2020,36(14)北大核心

【文章页数】:6 页

【文章目录】:
1 材料与方法
    1.1 细胞及主要试剂
    1.2 方法
        1.2.1 细胞培养
        1.2.2 细胞转染和稳定株的构建
        1.2.3 实时荧光定量Real-time RT-PCR
        1.2.4 CCK-8法检测细胞增殖
        1.2.5 平板克隆形成实验检测细胞增殖
        1.2.6 Transwell实验检测细胞迁移
        1.2.7 Transwell实验检测细胞侵袭
        1.2.8 Western Blot法检测细胞FOXF1蛋白的表达
    1.3 统计学方法
2 结果
    2.1 shRNA-FOXF1对PC9细胞的沉默效果
    2.2 FOXF1沉默对细胞增殖的影响
    2.3 FOXF1沉默对PC9细胞迁移、侵袭能力的影响
    2.4 FOXF1沉默处理对细胞EMT相关基因表达的影响
3 讨论


【参考文献】:
期刊论文
[1]循环肿瘤细胞在非小细胞肺癌中的研究进展[J]. 田程,许新华.  实用医学杂志. 2019(11)
[2]Risk factors for gastroesophageal reflux disease and analysis of genetic contributors[J]. Alexandra Argyrou,Evangelia Legaki,Christos Koutserimpas,Maria Gazouli,Ioannis Papaconstantinou,George Gkiokas,George Karamanolis.  World Journal of Clinical Cases. 2018(08)
[3]上皮-间质转化与非小细胞肺癌放疗敏感性相关的研究进展[J]. 张志浩,张为民.  实用医学杂志. 2017(13)



本文编号:3497039

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