大口黑鲈cpt1基因cDNA克隆及饲料脂肪水平对肠道微生物和cpt1表达的影响
发布时间：2021-11-16 06:35
当代水产养殖业可持续发展的必要保证是优质高能的饲料。适宜的饲料脂肪水平能够促进养殖鱼类的生长,但目前鱼类对脂肪的适应能力以及适应机制尚不明确。本研究以大口黑鲈（Micropterus salmoides）为研究对象,从高脂饲料饲喂大口黑鲈后肝脏转录组学的分析找出重点研究对象——脂肪酸氧化关键调节酶——肉碱棕榈酰转移酶I（carnitine palmitoyl transferase I,cpt1）。进一步探究cpt1基因在大口黑鲈组织中的表达差异及对脂肪水平和生长阶段的应答情况。研究结果可以从分子层面分析大口黑鲈对高脂饲料的营养生理适应机制,为开发最适脂肪水平的优质高能饲料提供理论依据。主要研究结果和结论如下:1、高脂饲料饲喂后大口黑鲈肝脏转录组、肠道微生物分析及cpt1基因克隆本实验旨在通过高通量测序找到脂肪因子重要的调控基因,探讨大口黑鲈对高脂饲料的营养生理适应机制。实验共设置3个处理组,每组3个重复,每个重复25尾鱼,分别配制低脂（6%）、中脂（12%）和高脂（18%）三种脂肪水平梯度的等氮试验饲料,饲养的大口黑鲈初始质量为（23.6±1.0）g,实验周期为10周。提取大口黑鲈肝...
【文章来源】：西南大学重庆市 211工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：77 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
草鱼摄食高脂饲料的脂肪肝发生过程[7]
1文献综述9图1-2线粒体CPT系统及与脂代谢的联系（引自Collinset,al.2010）[93]Fig.1-2ThemitochondrialCPTsystemanditsrelationshipwithlipidmetabolism目前关于脂肪代谢稳态的调控研究大多集中在营养素方面，深入到分子层面的研究较少，关于水产动物中cpt1基因性质及功能的研究则更少，水产动物中仅有虹鳟、斑马鱼、鲑鱼、金头鲷、虾虎鱼、黄颡鱼、鲤鱼的cpt1基因全序列或部分序列被报道[94-96]。在多数鱼类中cpt1能起到促进脂肪分解，降低体脂的作用。有研究表明外源性脂肪酸的摄入能上调cpt1基因的表达[71]；当机体对脂肪酸的需求增加时，cpt1基因的表达也会显著增强[97]，以此促进脂肪酸的氧化，加快脂肪酸分解代谢；对虎龙斑（Epinepheluslanceolatus♂×Epinephelusfuscoguttatus♀）[98]的研究也发现饥饿状态下鱼体能够通过提高肝脏中cpt1的表达量来更多地分解肝脏脂肪,以产生能量维持机体正常的基础代谢活动，而复投喂又会显著降低cpt1的表达水平。在对金头鲷禁食的研究中发现，禁食12h后，心脏和肌肉中cpt1的表达量均下降，这证明cpt1参与脂肪酸代谢的调节[99]；高脂饲料能显著增加虹鳟红饥肝脏和脂肪组织中cpt1基因的表达量[100]。1.3.2cpt1基因的代谢通路在敲除acc基因的小鼠[101]和人HepG2细胞[102]中的研究均发现，ampk-acc-cpt1信号通路通过激活cpt1的表达来调控细胞脂肪酸氧化。众所周知，ampk已被证实广泛存在于鱼体组织中[103-104]，被称为细胞能量状态的传感器，在机体的能量稳态中起着至关重要的作用[105]。ampk能够调控脂肪酸的合成与分解，当机体的能量供应不足时，胞内AMP/ATP的比值升高，ampk被激活[106]，而激活的ampk一个直接效应就是引起乙酰辅酶A羧化酶（acc）
unigene 比对到大黄鱼（Larimichthys crocea），占比对总 unigene 数目的 36.7%；有5492 个 unigene 比对到直眶锯雀鲷（Stegastes partitus），占比对总 unigene 数目的13.9%；有 1610 个 unigene 比对到革首南极鱼（Notothenia coriiceps），占比对总unigene 数目的 4.1%； 而 1579 个 unigene 比对到了尼罗罗非鱼（Oreochromis niloticus）上，占比为 4.0%；在人类（Homo sapiens）基因组上比对到了 1039 个unigene，占比为 2.6%；其他还有 876 个 unigene 比对到斑马拟丽鱼（Maylandia zebra）上；有 789 个 unigene 比对到虹鳟（Oncorhynchus mykiss）上；有 691 个 unigene比对到底鳉（Fundulus heteroclitus）上；有 665 个比对到伯氏朴丽鱼（Haplochromis burtoni）；还有 656 个 unigene 比对到欧洲海鲈（Dicentrarchus labrax）；637 个 unigene比对到青鳉（Oryzias latipes）上等。
【参考文献】：
期刊论文
[1]中国水产动物营养研究与饲料工业的发展历程与展望[J]. 麦康森. 饲料工业. 2020(01)
[2]饲料脂肪水平对大口黑鲈CPT1表达的影响[J]. 宋铭琪,钟云飞,郭佳玲,陈拥军,罗莉,林仕梅. 水产学报. 2019(10)
[3]饲料脂肪源对大菱鲆生长、体组成及血清生化指标的影响[J]. 赵曼茜,张斐然,吴立新,李思萌,李笑迎. 中国饲料. 2019(13)
[4]饥饿—复投喂对虎龙斑FAS及CPT-1A表达的影响[J]. 马细兰,黄文俞,刘炎丰. 惠州学院学报. 2018(06)
[5]饲料脂肪水平对匙吻鲟生长、体组成、消化酶活性、血清生化及抗氧化性能的影响[J]. 刘阳洋,于海波,武文一,钟明智,邢君霞,周继术,吉红,薛敏. 水产学报. 2018(12)
[6]饲料中不同水平脂肪对泥鳅幼鱼生长性能的影响[J]. 林建华,陈学豪. 当代水产. 2018(09)
[7]饲料中脂肪水平对团头鲂幼鱼生长性能、血清生化指标及黏蛋白基因表达的影响[J]. 习丙文,陆春云,任鸣春,米海峰,谢骏. 动物营养学报. 2018(09)
[8]饲料中脂肪成分对海水鱼生长发育的影响研究[J]. 谭星君. 河南农业. 2018(14)
[9]外源性脂肪酸对罗非鱼脂肪细胞增殖与分化的影响[J]. 王雅文,乔芳,张美玲,贾永义,杜震宇. 水生生物学报. 2018(03)
[10]饲料脂肪水平对俄罗斯鲟幼鱼生长、血液生化指标及抗氧化性能的影响[J]. 朱婷婷,李琦,朱浩拥,王和伟,李二超,陈立侨. 海洋渔业. 2017(01)
博士论文
[1]饲料脂肪水平和脂肪酸种类对大黄鱼脂肪沉积的影响[D]. 严晶.中国海洋大学 2015
[2]饲料中非蛋白能量源对草鱼脂肪蓄积及脂肪代谢的影响研究[D]. 郭小泽.华中农业大学 2013
[3]CPT1基因对猪脂肪沉积的影响及其调控机制的研究[D]. 张艳芳.浙江大学 2010
硕士论文
[1]大口黑鲈对高脂饲料的生理适应机制[D]. 彭祥和.西南大学 2017
[2]饲料脂肪水平对吉富罗非鱼生长、体脂沉积、脂肪酸组成及脂肪酸合成酶的影响[D]. 韩光明.南京农业大学 2009
本文编号：3498342
【文章来源】：西南大学重庆市 211工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：77 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
草鱼摄食高脂饲料的脂肪肝发生过程[7]
1文献综述9图1-2线粒体CPT系统及与脂代谢的联系（引自Collinset,al.2010）[93]Fig.1-2ThemitochondrialCPTsystemanditsrelationshipwithlipidmetabolism目前关于脂肪代谢稳态的调控研究大多集中在营养素方面，深入到分子层面的研究较少，关于水产动物中cpt1基因性质及功能的研究则更少，水产动物中仅有虹鳟、斑马鱼、鲑鱼、金头鲷、虾虎鱼、黄颡鱼、鲤鱼的cpt1基因全序列或部分序列被报道[94-96]。在多数鱼类中cpt1能起到促进脂肪分解，降低体脂的作用。有研究表明外源性脂肪酸的摄入能上调cpt1基因的表达[71]；当机体对脂肪酸的需求增加时，cpt1基因的表达也会显著增强[97]，以此促进脂肪酸的氧化，加快脂肪酸分解代谢；对虎龙斑（Epinepheluslanceolatus♂×Epinephelusfuscoguttatus♀）[98]的研究也发现饥饿状态下鱼体能够通过提高肝脏中cpt1的表达量来更多地分解肝脏脂肪,以产生能量维持机体正常的基础代谢活动，而复投喂又会显著降低cpt1的表达水平。在对金头鲷禁食的研究中发现，禁食12h后，心脏和肌肉中cpt1的表达量均下降，这证明cpt1参与脂肪酸代谢的调节[99]；高脂饲料能显著增加虹鳟红饥肝脏和脂肪组织中cpt1基因的表达量[100]。1.3.2cpt1基因的代谢通路在敲除acc基因的小鼠[101]和人HepG2细胞[102]中的研究均发现，ampk-acc-cpt1信号通路通过激活cpt1的表达来调控细胞脂肪酸氧化。众所周知，ampk已被证实广泛存在于鱼体组织中[103-104]，被称为细胞能量状态的传感器，在机体的能量稳态中起着至关重要的作用[105]。ampk能够调控脂肪酸的合成与分解，当机体的能量供应不足时，胞内AMP/ATP的比值升高，ampk被激活[106]，而激活的ampk一个直接效应就是引起乙酰辅酶A羧化酶（acc）
unigene 比对到大黄鱼（Larimichthys crocea），占比对总 unigene 数目的 36.7%；有5492 个 unigene 比对到直眶锯雀鲷（Stegastes partitus），占比对总 unigene 数目的13.9%；有 1610 个 unigene 比对到革首南极鱼（Notothenia coriiceps），占比对总unigene 数目的 4.1%； 而 1579 个 unigene 比对到了尼罗罗非鱼（Oreochromis niloticus）上，占比为 4.0%；在人类（Homo sapiens）基因组上比对到了 1039 个unigene，占比为 2.6%；其他还有 876 个 unigene 比对到斑马拟丽鱼（Maylandia zebra）上；有 789 个 unigene 比对到虹鳟（Oncorhynchus mykiss）上；有 691 个 unigene比对到底鳉（Fundulus heteroclitus）上；有 665 个比对到伯氏朴丽鱼（Haplochromis burtoni）；还有 656 个 unigene 比对到欧洲海鲈（Dicentrarchus labrax）；637 个 unigene比对到青鳉（Oryzias latipes）上等。
【参考文献】：
期刊论文
[1]中国水产动物营养研究与饲料工业的发展历程与展望[J]. 麦康森. 饲料工业. 2020(01)
[2]饲料脂肪水平对大口黑鲈CPT1表达的影响[J]. 宋铭琪,钟云飞,郭佳玲,陈拥军,罗莉,林仕梅. 水产学报. 2019(10)
[3]饲料脂肪源对大菱鲆生长、体组成及血清生化指标的影响[J]. 赵曼茜,张斐然,吴立新,李思萌,李笑迎. 中国饲料. 2019(13)
[4]饥饿—复投喂对虎龙斑FAS及CPT-1A表达的影响[J]. 马细兰,黄文俞,刘炎丰. 惠州学院学报. 2018(06)
[5]饲料脂肪水平对匙吻鲟生长、体组成、消化酶活性、血清生化及抗氧化性能的影响[J]. 刘阳洋,于海波,武文一,钟明智,邢君霞,周继术,吉红,薛敏. 水产学报. 2018(12)
[6]饲料中不同水平脂肪对泥鳅幼鱼生长性能的影响[J]. 林建华,陈学豪. 当代水产. 2018(09)
[7]饲料中脂肪水平对团头鲂幼鱼生长性能、血清生化指标及黏蛋白基因表达的影响[J]. 习丙文,陆春云,任鸣春,米海峰,谢骏. 动物营养学报. 2018(09)
[8]饲料中脂肪成分对海水鱼生长发育的影响研究[J]. 谭星君. 河南农业. 2018(14)
[9]外源性脂肪酸对罗非鱼脂肪细胞增殖与分化的影响[J]. 王雅文,乔芳,张美玲,贾永义,杜震宇. 水生生物学报. 2018(03)
[10]饲料脂肪水平对俄罗斯鲟幼鱼生长、血液生化指标及抗氧化性能的影响[J]. 朱婷婷,李琦,朱浩拥,王和伟,李二超,陈立侨. 海洋渔业. 2017(01)
博士论文
[1]饲料脂肪水平和脂肪酸种类对大黄鱼脂肪沉积的影响[D]. 严晶.中国海洋大学 2015
[2]饲料中非蛋白能量源对草鱼脂肪蓄积及脂肪代谢的影响研究[D]. 郭小泽.华中农业大学 2013
[3]CPT1基因对猪脂肪沉积的影响及其调控机制的研究[D]. 张艳芳.浙江大学 2010
硕士论文
[1]大口黑鲈对高脂饲料的生理适应机制[D]. 彭祥和.西南大学 2017
[2]饲料脂肪水平对吉富罗非鱼生长、体脂沉积、脂肪酸组成及脂肪酸合成酶的影响[D]. 韩光明.南京农业大学 2009
本文编号：3498342
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