Shh基因在NIPBL基因剔除小鼠模型肢芽内表达规律的研究
发布时间:2021-11-16 13:29
背景和目的:德朗热综合征(Cornelia de Lange Syndrome,CdLS)是一个由基因突变造成的罕见的伴有严重的生长发育缺陷和累及多器官系统的先天性遗传性疾病。这些基因的突变会引起基因表达的失调,并伴有多种严重的骨发育异常,主要表现为生长智能迟滞、认知障碍、上肢畸形、多毛症、特殊面容、心脏瓣膜缺陷等多器官功能异常,严重影响了新生儿及儿童的健康成长,给家庭和社会造成了沉重的负担。其中,该病65%的患儿是由NIPBL、Smc1和Smc3这三个基因突变所导致,NIPBL基因突变是引起常染色体显性遗传性疾病德朗热综合征的主要病因,约60%的患儿由NIPBL基因突变引起。在胎鼠的肢芽发育阶段中,NIPBL基因对位于肢芽ZPA(Zone of Polarizing Activity)区域的Shh(Sonic Hedgehog)基因具有调控作用,影响Shh基因的表达,但具体两个基因之间的交互作用如何以及规律如何,还未可知。本实验,我们利用NIPBL-Loxp小鼠与Cre小鼠建立NIPBL+/-基因剔除小鼠模型,在此模型的基础上,探讨Shh基因在胎鼠发育的不同时期...
【文章来源】:石河子大学新疆维吾尔自治区 211工程院校
【文章页数】:49 页
【学位级别】:硕士
【部分图文】:
NIPBL基因剔除小鼠打靶载体构建策略图
图 2 NIPBL 基因剔除小鼠打靶载体质粒图I 是酶切位点,质粒复制起始位点是 ori,NIPBL-CKO 是条除小鼠打靶载体构建策略图中 P1、P2、P3、P4 的引表 1 P1、P2、P3、P4 的引物信息Sequence 5'-GCTGCCTCTCCCATCTCCTTTACC-3' 5'-CTGAGCCCAGAAAGCGAAGGA-3'5'-CCTCCCCCGTGCCTTCCTTGAC-3'5'-AGAGGCCAGCTGAATGTGGTAATG-3' Loxp 小鼠模型
Shh 基因在 NIPBL+/-胎鼠肢芽内的表达结 果(Results)1.NIPBL 基因剔除小鼠模型的建立及鉴定结果将 NIPBL 条件性基因剔除载体质粒电转染到 ES 细胞中,经过培养挑选出 96 个药物抗性 ES 细胞克隆,然后提取它的基因组 DNA 进行 PCR 鉴定,其中有 13 个 ES 克隆发生了双臂同源重组,分别是:D10、E8、D2、H7、B3、F3、F6、A1、C12、D4、E7、E11 和 C2,详见图 4 和图 5。
本文编号:3498984
【文章来源】:石河子大学新疆维吾尔自治区 211工程院校
【文章页数】:49 页
【学位级别】:硕士
【部分图文】:
NIPBL基因剔除小鼠打靶载体构建策略图
图 2 NIPBL 基因剔除小鼠打靶载体质粒图I 是酶切位点,质粒复制起始位点是 ori,NIPBL-CKO 是条除小鼠打靶载体构建策略图中 P1、P2、P3、P4 的引表 1 P1、P2、P3、P4 的引物信息Sequence 5'-GCTGCCTCTCCCATCTCCTTTACC-3' 5'-CTGAGCCCAGAAAGCGAAGGA-3'5'-CCTCCCCCGTGCCTTCCTTGAC-3'5'-AGAGGCCAGCTGAATGTGGTAATG-3' Loxp 小鼠模型
Shh 基因在 NIPBL+/-胎鼠肢芽内的表达结 果(Results)1.NIPBL 基因剔除小鼠模型的建立及鉴定结果将 NIPBL 条件性基因剔除载体质粒电转染到 ES 细胞中,经过培养挑选出 96 个药物抗性 ES 细胞克隆,然后提取它的基因组 DNA 进行 PCR 鉴定,其中有 13 个 ES 克隆发生了双臂同源重组,分别是:D10、E8、D2、H7、B3、F3、F6、A1、C12、D4、E7、E11 和 C2,详见图 4 和图 5。
本文编号:3498984
本文链接:https://www.wllwen.com/kejilunwen/jiyingongcheng/3498984.html
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