BRAF V600E 基因突变与原发性甲状腺功能亢进合并甲状腺乳头状癌的相关性研究

发布时间：2021-11-20 06:27

　　目的探讨原发性甲状腺机能亢进合并甲状腺乳头状癌患者的临床及病理特征及其与BRAF ^V600E基因突变的关系。方法（1）选取2011年1月—2016年12月于青岛大学附属医院行手术治疗且病理证实为甲状腺乳头状癌（PTC）的原发性甲状腺机能亢进（甲亢）患者。（1）收集患者的性别、年龄,术前超声特征:结节个数、回声、钙化、边界、形态、纵横比、颈部淋巴结转移,以及血清TPOAb、TGAb水平。（2）记录术后病理特征:包括癌灶最长直径、单双侧、侵犯被膜、颈部淋巴结转移及分布区域、数量,是否合并桥本氏甲状腺炎、结节性甲状腺肿。（3）评估复发危险度分层、TNM分期。（4）分析甲亢合并甲癌患者的临床及病理特征。（2）收集以上患者的术后病理蜡块,提取DNA,行普通PCR扩增后,用单纯测序法测BRAF ^V600E突变,计算甲亢合并甲癌患者中BRAF ^V600E基因的突变率,比较BRAF^V600E基因突变与甲亢合并甲癌患者临床、病理特征的相关性。结果（1）甲亢合并甲癌患者80例,男性5例（6.25%）,女性75例（93.... 

【文章来源】：青岛大学山东省

【文章页数】：49 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

病理蜡块

第一章 研究对象与方法1.3.5 实验方法1.3.5.1 标本采集于青大附院病理科获取纳入研究患者的病理蜡块，将获取的石蜡包埋组织使切片机连续切片，每张白片厚度约 8μ m，每个蜡块切取 2-3 片（癌灶直径大于于 1cm 者取 2 片，直径小于 2cm 者取 3 片），借取每个患者常规 HE 染色 1 张，病理科医师鉴定和评估肿瘤细胞含量最多区域，手动刮取石蜡白片上相对应该区的组织于离心管中，并按照相应病理号标记。见图 1、2。

电泳：将 Marker 5ul 与每个标本的 PCR 扩增产物 5ul 分别于胶孔内加样，设置电泳条件（110v 20min），电泳结束后取出凝胶，置于凝胶成像系统上显色。见图 3。选择目的条带显色清晰的 PCR 产物送于北京六合华大基因科技有限公司纯化测序。根据测序结果找到相应基因序列，筛选存在点突变者，并记录。见图 4、5。注：左侧箭头表示无目的条带；右侧箭头表示有目的条带。图 3 显色凝胶


本文编号：3506758