基于数字PCR的转基因水稻LL62品系精准定量检测方法建立

发布时间：2021-11-22 18:53

　　为了促进转基因产品标识制度的顺利实施,对未获我国农业部批准的转基因水稻LL62品系进行精准定量检测方法研究,以保障我国进出口转基因农产品的检测监管。基于转基因水稻LL62品系外源插入片段和水稻基因组DNA的3’端旁侧序列设计数字PCR检测体系,建立了精准定量检测方法。结果显示,设计的引物探针反应效率高,基于此建立的数字PCR方法高度特异于转基因水稻LL62品系检测;方法可重复性好,生成微滴数相对标准偏差（RSD）值介于0.60%-11.11%;准确度高,3个混合样品（10%、1%和0.1%）测定值与真实值之间的偏差（bias）分别为0.12、0.09和0.10,相对标准偏差（RSD）介于0.09%-10.31%。建立的转基因水稻LL62品系微滴数字PCR定量检测方法简便快捷、特异性强、重复性好、准确度高,可准确有效地对农产品和食品中转基因水稻LL62成分进行精准定量分析。 

【文章来源】：生物技术通报. 2016,32(08)北大核心CSCD

【文章页数】：8 页

【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 材料
    1.2 方法
        1.2.1 DNA提取
        1.2.2 混合样品制备
        1.2.3 引物和探针设计及筛选
        1.2.4 微滴式数字PCR反应体系及条件
        1.2.5 特异性实验
        1.2.6 可重复性实验
        1.2.7 准确度、精确度测定
2 结果
    2.1 核酸提取结果
    2.2 引物探针检测体系比较
    2.3 特异性实验
    2.4 可重复性实验
    2.5 定量的准确度、精确度实验
3 讨论
4 结论


【参考文献】：
期刊论文
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[2]微滴式数字PCR技术用于生物样品种属鉴定和绝对定量[J]. 胡伟,陈荣华,张晨,安志远,王斌,平原.  法医学杂志. 2014(05)
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[9]转基因大豆、玉米、油菜和水稻品系特异性检测质粒标准分子的快速构建及应用[J]. 吴永彬,肖维威,张宝,蔡翠霞,康文杰,周琳华,刘唐书,马文丽.  中国生物化学与分子生物学报. 2011(08)
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本文编号：3512264