人结直肠癌LOVO细胞中TCF21调控KISS1基因表达及其下游PI3K/AKT-MMPs通路的研究
发布时间：2021-11-22 22:58
目的:1、研究在人结直肠癌LOVO细胞中,慢病毒转染过表达TCF21对KISS1基因表达水平的影响。2、观察慢病毒转染过表达TCF21后,结直肠癌LOVO细胞增殖、侵袭及迁移能力等生物学变化。3、分析TCF21慢病毒过表达结直肠癌LOVO细胞后,KISS1下游可能的PI3K/AKT-MMPs信号轴中关键分子PI3K、AKT、p-AKT、MMP-2、MMP-9等的表达情况。方法:1、以TCF21低表达的人结直肠癌细胞株LOVO为研究对象,采用慢病毒感染系统构建TCF21基因过表达稳定细胞株,分别通过实时荧光定量PCR和免疫印迹的方法检测细胞株中转染前后TCF21mRNA水平和蛋白水平的表达,鉴定TCF21在各细胞株中表达稳定性从而进行后续的研究。2、实验设置空白对照组、阴性对照组（空载体对照组）、TCF21基因过表达细胞组,通过免疫印迹的方法检测转染前后KISS1的蛋白表达水平的变化。3、用MTT的方法分析不同分组中结直肠癌细胞增殖的能力的变化;采用划痕和Transwell小室等功能学实验检测细胞转移和侵袭的能力的变化。4、应用免疫印迹方法检查转染前后各组中PI3K/AKT-MMP9信号...
【文章来源】：福建医科大学福建省
【文章页数】：52 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
慢病毒感染前后细胞荧光成像图
图 2 TCF21 和 GAPDH 基因熔解曲线 图 3 TCF21 和 GAPDH 基因扩增曲线2.2. 慢病毒转染前后，TCF21 在 mRNA 的表达水平通过统计分析 RQ 值发现，TCF21 过表达组细胞在 mRNA 水平（14.695.463）的相对表达量与空白对照组（1.095±0.082）和阴性对照组（0.929±0.063，差异有统计学意义（P<0.01），而空白对照组和阴性对照组之间无明显统差异（P>0.05），说明 TCF21 慢病毒转染了结直肠癌细胞后在 mRNA 水平稳定过表达（图 4，表 1）。
图 2 TCF21 和 GAPDH 基因熔解曲线 图 3 TCF21 和 GAPDH 基因扩增曲线2.2. 慢病毒转染前后，TCF21 在 mRNA 的表达水平通过统计分析 RQ 值发现，TCF21 过表达组细胞在 mRNA 水平（14.695.463）的相对表达量与空白对照组（1.095±0.082）和阴性对照组（0.929±0.063，差异有统计学意义（P<0.01），而空白对照组和阴性对照组之间无明显统差异（P>0.05），说明 TCF21 慢病毒转染了结直肠癌细胞后在 mRNA 水平稳定过表达（图 4，表 1）。
【参考文献】：
期刊论文
[1]2014年中国分地区恶性肿瘤发病和死亡分析[J]. 陈万青,孙可欣,郑荣寿,张思维,曾红梅,邹小农,赫捷. 中国肿瘤. 2018(01)
[2]2012年中国恶性肿瘤发病和死亡分析[J]. 陈万青,郑荣寿,张思维,曾红梅,左婷婷,贾漫漫,夏昌发,邹小农,赫捷. 中国肿瘤. 2016(01)
[3]Kiss-1基因通过NF-κB信号传导通路抑制人结直肠癌HCT116细胞迁移[J]. 陈绍勤,苏小宝,高骥,韩宏景,陈志华,林素勇. 南方医科大学学报. 2015(11)
[4]KISS-1 inhibits the proliferation and invasion of gastric carcinoma cells[J]. Na Li,Jie Zhang,Ya-Ping Ye,Guo-Yang He,Department of Pathology,Xinxiang Medical University,Xinxiang 453003,Henan Province,China Hong-Xing Wang,Department of Clinical Immunology,Xinxiang Medical University,Xinxiang 453003,Henan Province,China. World Journal of Gastroenterology. 2012(15)
[5]Kiss-1基因启动子甲基化与结直肠癌的关系[J]. 陈志华,戴起宝,陈绍勤,林素勇. 肿瘤基础与临床. 2012(02)
[6]肿瘤转移机制研究中几个值得关注的问题[J]. 周海军,钦伦秀. 复旦学报(医学版). 2011(05)
[7]转染kiss-1基因对人食管癌EC9706细胞裸鼠移植瘤的抑制作用[J]. 李晟磊,赵志华,张岚,陈奎生,高冬玲,张云汉,张蕾. 世界华人消化杂志. 2010(11)
本文编号：3512606
【文章来源】：福建医科大学福建省
【文章页数】：52 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
慢病毒感染前后细胞荧光成像图
图 2 TCF21 和 GAPDH 基因熔解曲线 图 3 TCF21 和 GAPDH 基因扩增曲线2.2. 慢病毒转染前后，TCF21 在 mRNA 的表达水平通过统计分析 RQ 值发现，TCF21 过表达组细胞在 mRNA 水平（14.695.463）的相对表达量与空白对照组（1.095±0.082）和阴性对照组（0.929±0.063，差异有统计学意义（P<0.01），而空白对照组和阴性对照组之间无明显统差异（P>0.05），说明 TCF21 慢病毒转染了结直肠癌细胞后在 mRNA 水平稳定过表达（图 4，表 1）。
图 2 TCF21 和 GAPDH 基因熔解曲线 图 3 TCF21 和 GAPDH 基因扩增曲线2.2. 慢病毒转染前后，TCF21 在 mRNA 的表达水平通过统计分析 RQ 值发现，TCF21 过表达组细胞在 mRNA 水平（14.695.463）的相对表达量与空白对照组（1.095±0.082）和阴性对照组（0.929±0.063，差异有统计学意义（P<0.01），而空白对照组和阴性对照组之间无明显统差异（P>0.05），说明 TCF21 慢病毒转染了结直肠癌细胞后在 mRNA 水平稳定过表达（图 4，表 1）。
【参考文献】：
期刊论文
[1]2014年中国分地区恶性肿瘤发病和死亡分析[J]. 陈万青,孙可欣,郑荣寿,张思维,曾红梅,邹小农,赫捷. 中国肿瘤. 2018(01)
[2]2012年中国恶性肿瘤发病和死亡分析[J]. 陈万青,郑荣寿,张思维,曾红梅,左婷婷,贾漫漫,夏昌发,邹小农,赫捷. 中国肿瘤. 2016(01)
[3]Kiss-1基因通过NF-κB信号传导通路抑制人结直肠癌HCT116细胞迁移[J]. 陈绍勤,苏小宝,高骥,韩宏景,陈志华,林素勇. 南方医科大学学报. 2015(11)
[4]KISS-1 inhibits the proliferation and invasion of gastric carcinoma cells[J]. Na Li,Jie Zhang,Ya-Ping Ye,Guo-Yang He,Department of Pathology,Xinxiang Medical University,Xinxiang 453003,Henan Province,China Hong-Xing Wang,Department of Clinical Immunology,Xinxiang Medical University,Xinxiang 453003,Henan Province,China. World Journal of Gastroenterology. 2012(15)
[5]Kiss-1基因启动子甲基化与结直肠癌的关系[J]. 陈志华,戴起宝,陈绍勤,林素勇. 肿瘤基础与临床. 2012(02)
[6]肿瘤转移机制研究中几个值得关注的问题[J]. 周海军,钦伦秀. 复旦学报(医学版). 2011(05)
[7]转染kiss-1基因对人食管癌EC9706细胞裸鼠移植瘤的抑制作用[J]. 李晟磊,赵志华,张岚,陈奎生,高冬玲,张云汉,张蕾. 世界华人消化杂志. 2010(11)
本文编号：3512606
本文链接：https://www.wllwen.com/kejilunwen/jiyingongcheng/3512606.html
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