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甘蓝型油菜BnaWRKY30-like基因cDNA序列克隆及生物信息学分析

发布时间:2021-12-29 22:37
  WRKY转录因子是植物所特有的一个超级基因家族,能调控植物生长发育过程及逆境反应。根据转录组测序获得的EST序列设计引物,利用RT-PCR及RACE技术克隆了甘蓝型油菜WRKY30基因cDNA全长序列,并运用生物信息学手段对序列进行了分析及预测。结果表明:BnaWRKY30-like基因全长cDNA序列中包含102 bp的5′-UTR序列,188 bp的3′-UTR序列以及942 bp的完整ORF,编码313个氨基酸。该转录因子蛋白相对分子量为35 319.85D,等电点为6.22,基本氨基酸中含量最高的丝氨酸(Ser),313个氨基酸中含有41个酸性氨基酸,34个碱性氨基酸,在121~182区域含有一个典型的WRKY结构域。亚细胞定位预测发现该转录因子定位于细胞核的可能性最高。蛋白质的二级结构预测表明共有α-螺旋占26.20%,延伸链占10.54%,β-转角占4.47%,无规则卷曲占58.79%。BnaWRKY30-like基因编码的蛋白具有典型的WRKY转录因子特征,与拟南芥WRKY30基因亲缘关系近,可能在油菜早期生长发育过程及盐胁迫中的发挥调控作用。 

【文章来源】:安徽农业大学学报. 2020,47(05)CSCD

【文章页数】:7 页

【部分图文】:

甘蓝型油菜BnaWRKY30-like基因cDNA序列克隆及生物信息学分析


油菜BnaWRKY30-like基因的RACE扩增结果

氨基酸序列,氨基酸序列,核苷酸序列,基因


利用NCBI blast程序比对分析发现其与Brassica napus WRKY30(Accession:XP_013643451.1)、Brassica oleracea WRKY30(Accession:XP_013596670.1)和Brassica rapa WRKY30(Accession:NP_001288989.1)转录因子的氨基酸序列相似性最高,即命名为BnaWRKY30-like。利用DNAMAN8.0软件将BnaWRKY30-like与Brassica napus WRKY30、Brassica oleraceaWRKY30、Brassica rapaWRKY30进行多序列比对结果如图2所示。这4个转录因子氨基酸序列高度相似,但均在不同的位置存在少数氨基酸差异。图3 BnaWRKY30-like蛋白氨基酸序列保守结构域检索

甘蓝型油菜BnaWRKY30-like基因cDNA序列克隆及生物信息学分析


BnaWRKY30-like蛋白氨基酸序列保守结构域检索

【参考文献】:
期刊论文
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[9]TcLr35小麦β(1,3;1,4)葡聚糖苷酶基因cDNA全长的克隆及分析[J]. 王海燕,刘大群,杨文香,李在峰,张立荣,李星.  华北农学报. 2010(04)

硕士论文
[1]油菜转录因子BnWRKY75基因的遗传转化及转化子的抗病性鉴定[D]. 王亚婷.浙江大学 2013
[2]拟南芥microRNA启动子甲基化的分析以及AtWRKY30转录因子的生物学功能研究[D]. 段丽君.山东农业大学 2012



本文编号:3556973

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