鲤鱼转录因子blimp-1基因克隆及其功能的初步研究

发布时间：2022-02-15 13:15

　　B淋巴细胞诱导成熟蛋白1（Blimp-1）是脊椎动物中参与B细胞分化的重要的转录因子,B淋巴细胞分化的不同阶段受到不同的转录因子的调控。其中在B细胞分化过程中,Blimp-1表达于浆细胞、幼B细胞中以及生发中心部分B细胞中。Blimp-1参与调节多种类型组织的发育,调控细胞分化过程。此外,在正常浆细胞发生恶性转化时也可检测到较高水平的Blimp-1的β同种型的表达。Blimp-1属于PR基因家族成员,该家族以数量不等的Zn F-C2H2结构域为特征。该基因的DNA结合结构域在脊椎动物中高度保守,斑马鱼、非洲爪蟾、东方红鳍鲀和小鼠之间的同源性超过93%。blimp-1在鱼类中的研究较少,本研究通过分析不同物种中blimp-1序列保守区设计引物克隆鲤鱼blimp-1基因序列,分析其序列特征并构建进化树。实验构建了嗜水气单胞菌浸泡和注射两种方式进行免疫刺激的鲤鱼模型,同时取材了从受精后第一天到孵化期21天共8个不同发育时期的组织材料,通过Real-time PCR检测上述组织中blimp-1基因在mRNA水平的表达变化。此外,构建了鲤鱼blimp-1原核表达载体,诱导表达部分片段,纯化蛋白,... 

【文章来源】：山东师范大学山东省

【文章页数】：62 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

Blimp-1的结构域(引自ShinuA.John，2008)

图 1-2 Blimp-1 调节基因表达的机制(引自 ShinuA. John，2008)Fig.1-2 Mechanisms of Blimp-1-mediated gene repression.序列含有 2 个富含脯氨酸的片段，并且显示与 Groucho 家族剂包括：hGrg、TLE1 和 TLE2，导致转录抑制[5]。此外，在 通过前两个锌指蛋白招募 G9a 甲基转移酶，导致组蛋白 H3 沉默[2]。为了完全抑制活性，赖氨酸的脱乙酰化是必需的。这酸甲基化在靶启动子上积累的先决条件。因此，在 IFNβ 启动修饰酶相互作用可以诱导目的基因的转录抑制。胞中，Blimp-1 的作用是通过直接抑制基因和成熟 B 细胞程序分化。Blimp-1（N 末端的酸性结构域、PR 结构域、富含脯）的多个结构域对 c-myc 启动子的抑制似乎是必要的。研究结构域招募 HDACs，导致组蛋白 H3 脱乙酰化和转录抑制，92（在 Blimp-1 的富含脯氨酸的区域中），另一个是氨基酸位于

图 2-1 鲤鱼不同组织 blimp-1 的凝胶电泳检测000，1：14D 后肠，2：28D 后肠，3：14D 中肠，4：28D 中肠，528D 前肠。Fig.2-1 Del electrophoresis detection of blimp-1in tissues..00，1：14D hindgut，2：28D hindgut，3：14D midgut，4：28D midgut，6：28D foregut.

【参考文献】：
期刊论文
[1]B淋巴细胞分化相关的基因调控[J]. 吕晓涛,张继新,李保玉.  临床与实验病理学杂志. 2009(03)



本文编号：3626696