敲低STOML2基因对前列腺癌细胞PC3增殖和迁移以及线粒体膜电位的影响

发布时间：2022-02-22 23:04

　　目的研究发现头颈鳞癌、甲状腺乳头状癌、胃癌、结肠癌等多种恶性肿瘤中Stomatin样蛋白2（STOML2）基因高表达。通过慢病毒技术敲低PC3细胞STOML2基因,观测其对列腺癌细胞增殖、迁移和线粒体膜电位及Erk和Akt通路的影响。方法用PEI法转染HEK293T细胞制作能敲低STOML2基因（shDNA-STOML2）及其随机序列对照（SHCON）的慢病毒,将其分别感染前列腺癌细胞PC3。以未转染前列腺癌细胞PC3为空白对照组,以转染随机序列为阴性对照组,以转染shDNA-STOML2慢病毒载体为敲低组。用免疫荧光显微镜和Western blot检测感染效率和STOML2蛋白表达水平。MTT实验、细胞划痕愈合实验检测对PC3细胞增殖和迁移的影响。流式细胞术及Western blot检测敲低STOML2基因后对PC3细胞线粒体膜电位以及Erk、Akt通路的影响。结果成功构建了shDNA-STOML2和随机序列SHCON两种慢病毒质粒。包装的慢病毒感染PC3细胞感染效率约100%,阴性对照组较敲低组的STOML2/β-actin相对表达水平明显升高（P<0.01）,提示模型制作成... 

【文章来源】：医学研究生学报. 2020,33(10)北大核心

【文章页数】：7 页

【文章目录】：
0 引 言
1 材料与方法
    1.1 主要试剂和仪器
    1.2 细胞系及细胞培养
    1.3 慢病毒载体构建及鉴定
    1.4 质粒提取和慢病毒包装
    1.5 PC3细胞感染及分组
    1.6 MTT实验检测PC3细胞的增殖能力
    1.7 细胞划痕愈合实验检测PC3细胞的体外迁移能力
    1.8 流式细胞仪检测PC3细胞线粒体膜电位水平
    1.9 Western blot检测前列腺癌PC3细胞中STOML2、p-erk、Erk和p-akt、Akt蛋白的表达
    1.10 统计学分析
2 结 果
    2.1 敲低STOML2基因在人前列腺癌PC3细胞株的建立和鉴定
    2.2 敲低STOML2基因组STOML2蛋白的表达
    2.3 敲低STOML2基因对人前列腺癌PC3细胞增殖能力增强
    2.4 敲低STOML2基因后人前列腺癌PC3细胞体外迁移能力降低
    2.5 敲低STOML2基因后人前列腺癌PC3线粒体膜电位的水平升高
    2.6 Western blot检测各组p-erk、Erk、p-akt和Akt结果
3 讨 论


【参考文献】：
期刊论文
[1]G蛋白耦联受体C家族6组A亚型在前列腺癌细胞增殖和凋亡中的作用[J]. 孙心旖,盛彬,陈瑶,李莉,杨建一,杜圣家,刘铭.  医学研究生学报. 2019(02)
[2]长链非编码RNA在前列腺癌中的作用及研究进展[J]. 郭倚天,许斌,陈明.  医学研究生学报. 2017(02)
[3]ATP柠檬酸裂解酶表达下调对前列腺癌细胞生长及凋亡影响的研究[J]. 孔海瑞,耿申,杨杰,曾方银.  医学研究生学报. 2017(01)

硕士论文
[1]STOML2蛋白在前列腺癌与前列腺增生中的差异表达及意义[D]. 陈宁.华北理工大学 2016



本文编号：3640360