镉在克氏原鳌虾中的蓄积及对其p38 MAPK基因表达的影响研究

发布时间：2022-02-23 19:53

　　镉（Cadmium,Cd）是常见的重金属污染物,其在环境中不能被生物降解,当环境受到镉污染,镉会在生物体内富集,通过食物链进入人体,产生潜在危害,影响人类健康。克氏原螯虾俗称小龙虾,其对镉等重金属有较强的富集能力,能够在重金属污染的环境下生存和繁衍,而有机体能在不利条件下生存的关键就是尽可能将有害污染物排除在某些关键组织之外,由先前文献可知p38 MAPK基因可能在生物应对环境胁迫过程中起重要作用,那么可推断克氏原螯虾面对镉胁迫,其p38 MAPK基因很可能参与调节了镉在其体内不同组织中的积累分布,以此维持虾的正常生命活动。因此对克氏原螯虾镉蓄积及p38基因表达进行研究,有一定的价值和意义。在本文中,先研究了克氏原螯虾三个重要组织鳃,肝胰腺,肌肉在不同浓度镉环境下对镉的蓄积量,结果发现鳃和肝胰腺组织对镉的蓄积量远大于肌肉组织。而为了验证克氏原螯虾p38 MAPK基因能调节镉在其不同组织中的积累分布这一假设,本文进行了克氏原鳌虾p38 MAPK基因克隆及序列分析,检测了克氏原螯虾p38基因和镉含量在组织中的分布情况,分析比较了镉暴露下各组织在不同时间的p38基因表达量和镉含量。结果表明:... 

【文章来源】：武汉纺织大学湖北省

【文章页数】：64 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
abstract
1 绪论
    1.1 镉污染及其危害
        1.1.1 镉的特性及对水环境的污染
        1.1.2 镉在水生动物中的蓄积及危害
        1.1.3 镉对人类健康的危害
    1.2 克氏原螯虾概况
    1.3 p38MAPK基因
        1.3.1 p38MAPK概述
        1.3.2 p38MAPK在水生动物中的研究进展
        1.3.3 p38MAPK与镉毒性作用的研究进展
    1.4 本课题研究意义与主要研究内容
    1.5 技术路线
2 镉在克氏原螯虾组织中的蓄积
    2.1 实验材料
        2.1.1 实验生物
        2.1.2 实验试剂与仪器
    2.2 实验方法
        2.2.1 镉蓄积实验
        2.2.2 样品处理与镉的测定
        2.2.3 数据处理
    2.3 结果与讨论
    2.4 本章小结
3 克氏原螯虾p38MAPK基因克隆及序列分析
    3.1 实验材料
        3.1.1 实验生物
        3.1.2 实验试剂与仪器
    3.2 实验方法
        3.2.1 克氏原螯虾的总RNA提取
        3.2.2 第一链cDNA的合成
        3.2.3 5'-RACE c DNA和3'-RACE c DNA的合成
        3.2.4 引物设计和PCR扩增
        3.2.5 PCR产物的纯化
        3.2.6 目的片段与 pMD-19T 的连接及转化
        3.2.7 克氏原螯虾p38基因序列分析方法
    3.3 结果与讨论
        3.3.1 克氏原螯虾p38基因序列分析
        3.3.2 克氏原螯虾p38基因同源性及系统进化分析
    3.4 本章小结
4 克氏原螯虾p38在不同组织中的表达及镉对其表达量的影响
    4.1 实验材料
        4.1.1 实验生物
        4.1.2 实验试剂与仪器
    4.2 实验方法
        4.2.1 克氏原螯虾p38基因表达量的测定
        4.2.2 克氏原螯虾组织镉含量的测定
    4.3 结果与讨论
        4.3.1 克氏原螯虾p38基因和镉含量在组织中的分布情况研究
        4.3.2 镉胁迫下鳌虾组织中p38基因表达量及镉含量分析
    4.4 本章小结
5 注射特异si RNA抑制螯虾p38 基因表达后对其镉蓄积的影响
    5.1 实验材料
        5.1.1 实验生物
        5.1.2 实验试剂与仪器
    5.2 实验方法
        5.2.1 siRNA的设计合成
        5.2.2 克氏原鳌虾siRNA的注射
        5.2.3 siRNA作用效果检测
        5.2.4 RNA干扰后镉胁迫下p38基因表达和镉蓄积的检测
    5.3 结果与讨论
        5.3.1 siRNA作用效果
        5.3.2 RNA干扰后镉胁迫下p38基因表达和镉蓄积
    5.4 本章小结
6 结论
致谢
参考文献
附录 研究生期间成果


【参考文献】：
期刊论文
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[2]南通市水产品中铅、镉含量分析与评价[J]. 殷小琴,徐汇宏,季寅星.  食品工业. 2018(09)
[3]基于p38MAPK通路研究丹参注射液对糖尿病大鼠心肌纤维化的影响[J]. 陈飞,步青云,包晓燕,金铁峰,应帅兵,储利胜.  浙江临床医学. 2018 (08)
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硕士论文
[1]凡纳滨对虾对水体和饲料中Pb、Cd富集及释放的特性研究[D]. 卢元玲.南京师范大学 2016
[2]克氏原螯虾、日本沼虾对饲料中Cd、Pb富集与释放特性及其安全性分析[D]. 江晨洁.南京师范大学 2015
[3]镉在虾夷扇贝体内的时空分布规律及对抗氧化防御系统的影响[D]. 王丽丽.中国海洋大学 2011



本文编号：3641240