金银花蛀干害虫咖啡脊虎天牛嗅觉相关基因鉴定及表达谱分析

发布时间：2022-02-26 14:26

　　金银花Lonicera japonicaThunb为忍冬科Caprifoliaceae多年生常绿藤本植物,其花是我国传统常用中药。咖啡脊虎天牛（Xylotrechus grayii White）是金银花的蛀干害虫,隐蔽危害,利用化学农药对其防治效果不明显且严重影响药材安全性,急需开发无公害的防治手段。在长期进化过程中,昆虫形成高度灵敏和复杂的嗅觉系统,用其感受并识别外界环境中的化学信息物质,完成寄主植物、配偶的搜寻和定位。昆虫嗅觉信号的形成涉及气味结合蛋白（odorant-binding proteins,OBPs）和化学感受蛋白（chemosensory protein,CSPs）等一系列相关蛋白的互作,阐明昆虫对环境中挥发性化合物的感受机制,为利用化学信息素对害虫进行迷向、引诱等可持续控制提供理论依据。本文通过测定咖啡脊虎天牛成虫触角转录组,利用生物信息学方法鉴定嗅觉相关蛋白基因,并分析化学感受蛋白基因CSPs在不同组织的表达差异,初步揭示咖啡脊虎天牛的嗅觉感受机制,为该天牛科学防治提供理论依据。主要取得如下研究结果:1、咖啡脊虎天牛触角转录组测序及生物信息学分析:（1）咖啡脊虎天... 

【文章来源】：贵州师范大学贵州省

【文章页数】：73 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
ABSTRACT
1 文献综述
    1.1 金银花药用价值
    1.2 金银花常见害虫
    1.3 咖啡脊虎天牛研究现状
        1.3.1 形态特征
        1.3.2 生物学习性
        1.3.3 危害及发生规律
        1.3.4 防治措施
    1.4 昆虫嗅觉感受机制
        1.4.1 昆虫嗅觉感器
        1.4.2 昆虫对信息化学物质的识别
    1.5 嗅觉相关蛋白研究概况
        1.5.1 昆虫气味结合蛋白研究进展
        1.5.2 昆虫化学感受蛋白研究进展
        1.5.3 昆虫气味受体研究进展
        1.5.4 昆虫感觉神经元膜蛋白研究进展
    1.6 研究目的与意义
    1.7 研究内容
    1.8 技术路线
2 咖啡脊虎天牛触角转录组分析
    2.1 材料与方法
        2.1.1 供试昆虫
        2.1.2 实验仪器与试剂
        2.1.3 咖啡脊虎天牛总RNA的提取
    2.2 转录组测序
    2.3 生物信息分析流程
        2.3.1 测序数据过滤
        2.3.2 Unigene的功能注释
    2.4 结果与分析
        2.4.1 咖啡脊虎天牛总RNA提取质量
        2.4.2 测序及组装结果
        2.4.3 Unigene功能注释与KOG分类
        2.4.4 Nr注释
        2.4.5 GO注释
        2.4.6 KOG注释
        2.4.7 KEGG注释
    2.5 讨论
3 咖啡脊虎天牛嗅觉相关基因鉴定
    3.1 实验方法
        3.1.1 咖啡脊虎天牛嗅觉相关基因鉴定
        3.1.2 OBP基因鉴定
        3.1.3 CSP基因鉴定
        3.1.4 ORs、SNMPs基因鉴定
    3.2 序列分析
    3.3 构建系统发育树
    3.4 结果与分析
        3.4.1 咖啡脊虎天牛嗅觉相关蛋白序列分析
        3.4.2 构建咖啡脊虎天牛嗅觉相关蛋白系统发育树
    3.5 讨论
4 咖啡脊虎天牛化学感受基因组织表达模式研究
    4.1 材料与方法
        4.1.1 实验材料
        4.1.2 主要仪器
        4.1.3 主要试剂
        4.1.4 总RNA提取
        4.1.5 cDNA第一链合成
        4.1.6 qRT-PCR引物设计
        4.1.7 实时荧光定量PCR(qRT-PCR)反应
    4.2 结果分析
        4.2.1 qRT-PCR结果
    4.3 讨论
5 结论与展望
参考文献
攻读硕士研究生期间发表的学术论文
致谢


【参考文献】：
期刊论文
[1]金银花病虫害发生规律与防治技术[J]. 翟爱勇,周凌云.  河南农业. 2018(04)
[2]光肩星天牛气味结合蛋白AglaOBP12的基因克隆、表达及配体结合特征[J]. 李广伟,陈秀琳,尚天翠.  昆虫学报. 2017(10)
[3]中华蜜蜂气味受体基因AcerOR113的克隆与时空表达分析[J]. 杜亚丽,王树杰,赵慧婷,潘建芳,杨爽,郭丽娜,徐凯,姜玉锁.  昆虫学报. 2017(05)
[4]黄斑星天牛雌虫触角气味结合蛋白基因的鉴定及组织分布[J]. 李广伟,陈秀琳,尚天翠.  生态学杂志. 2017(06)
[5]管氏肿腿蜂对咖啡灭字脊虎天牛寄生作用的研究[J]. 杨文波,吴国星,徐志强,吴道慧,何霞红,秦小萍.  环境昆虫学报. 2017(02)
[6]释放天敌防治松褐天牛技术研究[J]. 吴东生,高尚坤,唐艳龙.  中国森林病虫. 2017(02)
[7]中华蜜蜂气味受体基因AcOr170的克隆与序列分析[J]. 杨乐,曾志将,张丽珍.  环境昆虫学报. 2017(01)
[8]山华李天牛的生活习性、危害症状及防控技术分析——以湖南省江华县为例[J]. 刘祖斌,蓝华中.  江西农业. 2017(03)
[9]茶尺蠖信息素结合蛋白PBP2的基因克隆、原核表达及其结合功能[J]. 冯一璐,傅晓斌,吴帆,崔宏春,李红亮.  中国农业科学. 2017(03)
[10]烟粉虱MED隐种气味结合蛋白基因BtabOBP2和BtabOBP4的cDNA克隆及原核表达[J]. 谢红艳,万鲁长,黄春燕,刘国霞,Jean-Fran?ois Picimbon,宫志远.  环境昆虫学报. 2017(04)

博士论文
[1]桃蛀螟性信息素结合蛋白的功能研究[D]. 葛星.中国农业科学院 2017
[2]梨小食心虫识别寄主植物挥发物的分子机制[D]. 李广伟.西北农林科技大学 2016
[3]斜纹夜蛾与棉铃虫化感基因鉴定及受体功能分析[D]. 张进.南京农业大学 2015
[4]中华蜜蜂气味受体基因Or1、Or2、Or3的鉴定、表达及定位分析[D]. 赵慧婷.山西农业大学 2013
[5]麦长管蚜气味结合蛋白的结合特性及组织定位[D]. 钟涛.中国农业科学院 2012
[6]云斑天牛触角cDNA文库的构建及相关嗅觉蛋白的表达及功能分析[D]. 李慧.华中农业大学 2012
[7]金银花黄酮活性成分分离纯化与生物学效应研究[D]. 唐敏.第三军医大学 2008

硕士论文
[1]云斑天牛Minus-C OBPs与配基的结合与释放机制[D]. 郑志川.华中农业大学 2017
[2]松褐天牛气味结合蛋白基因克隆与分析[D]. 李娜.华中农业大学 2016
[3]中黑盲蝽嗅觉相关蛋白鉴定及非典型嗅觉受体基因分析[D]. 崔欢欢.中国农业科学院 2016
[4]基于触角转录组的麦长管蚜OBPs和CSPs基因鉴定及表达谱研究[D]. 薛文鑫.中国农业科学院 2016
[5]金银花农药残留状况与膳食暴露风险研究[D]. 顾炎.北京协和医学院 2016
[6]松褐天牛气味结合蛋白基因的克隆与功能分析[D]. 王娟.华中农业大学 2015
[7]噻虫嗪对金银花药材质量安全性评价研究[D]. 刘亚南.北京协和医学院 2015
[8]金银花中两种除虫菊酯类农药的残留动态研究[D]. 刘璐.北京协和医学院 2015
[9]黄曲条跳甲化学感受基因的鉴定与表达分析[D]. 王正兵.仲恺农业工程学院 2015
[10]云斑天牛性信息素分离鉴定及气味结合蛋白结合特性分析[D]. 潘翔宇.华中农业大学 2014



本文编号：3644657