MiR-199b-5p过表达在肾小球足细胞中的作用及基因表达特征

发布时间：2022-03-09 13:08

　　目的:研究miR-199b-5p在足细胞凋亡过程中的功能及miR-199b-5p过表达足细胞中的基因表达谱特征,探讨足细胞凋亡的潜在分子机制。方法:体外培养小鼠足细胞,用lipofectamine 2000分别在小鼠足细胞中瞬时转染miR-199b-5p过表达质粒（miR-199b-5p mimics）、miR-199b-5p过表达质粒阴性对照（NC）组。用qRT-PCR检测miR-199b-5p在足细胞中表达水平。用流式细胞仪检测足细胞凋亡的变化。运用高通量测序分析转染miR-199b-5p mimics后足细胞中差异表达基因,并对miR-199b-5p靶基因进行基因功能（GO）富集分析和信号通路（Pathway）富集分析。结果:qRT-PCR结果显示,转染miR-199b-5p mimics足细胞中miR-199b-5p表达水平较对照组升高（P <0. 05）。流式细胞仪检测结果显示,NC组细胞凋亡率（32. 97±1.45）%,转染mimics组细胞凋亡率（25.51±0.94）%较对照组下降（P<0.05）。高通量测序发现,过表达miR-199b-5p足细胞中有10... 

【文章来源】：皖南医学院学报. 2018,37(06)

【文章页数】：4 页

【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 实验材料
    1.2 实验方法
        1.2.1 细胞培养
        1.2.2 细胞转染
        1.2.3 RNA提取及qRT-PCR细胞转染48 h后, 按Trizol试剂盒说明书操作, 每孔加0.5 m L Trizol提取NC组和mimics组细胞的总RNA。
        1.2.4 流式Annexin V-PE/7-AAD检测足细胞凋亡
        1.2.5 RNA高通量测序
    1.3 统计分析
2 结果
    2.1 转染miR-199b-5p mimics后足细胞中miR-199b-5p的表达
    2.2 过表达miR-199b-5p对足细胞凋亡的影响
    2.3 基因表达谱变化
    2.4 基因功能富集分析
3 讨论



本文编号：3645723