降钙素基因相关肽抑制铜绿假单胞菌外膜囊泡致炎作用

发布时间：2022-05-02 23:41

　　目的探讨降钙素基因相关肽（CGRP）对铜绿假单胞菌外膜囊泡（OMVs）诱导炎症反应的影响。方法培养铜绿假单胞菌并提取OMVs,取1、5、10μg·mL^-1 OMVs刺激鼠巨噬细胞RAW264.7,采用ELISA法检测细胞中促炎性细胞因子[包括白细胞介素-1β（IL-1β）、IL-6、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）]含量,采用CCK-8法及流式细胞术分别检测细胞增殖及凋亡;采用10μg·mL^-1 OMVs与1、5、10 nmol·L^-1 CGRP同时处理RAW264.7细胞,并检测细胞中促炎细胞因子水平;采用20μg·mL^-1 OMVs与10 nmol·L^-1 CGRP同时处理RAW264.7细胞,检测细胞增殖与凋亡;培养人中性粒细胞,采用脱颗粒实验检测CGRP对其分泌中性粒细胞明胶酶脂质运载蛋白（NGAL）及弹性蛋白酶活性的影响。结果不同浓度OMVs均能显著刺激RAW264.7细胞分泌TNF-α、IL-6和IL-1β（P<0.05）,而CGRP则能够抑制RAW264.7细... 

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【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 材料与试剂
    1.2 铜绿假单胞菌培养与OMVs收集
    1.3 RAW264.7细胞培养与处理
    1.4 ELISA检测
    1.5 CCK-8检测
    1.6 流式细胞术
    1.7 中性粒细胞脱颗粒试验
    1.8 统计学方法
2 结果
    2.1 OMVs诱导RAW264.7细胞分泌促炎细胞因子
    2.2 CGRP下调OMVs诱导RAW264.7细胞分泌促炎细胞因子
    2.3 CGRP抑制OMVs所致细胞毒性与凋亡
    2.4 CGRP抑制中性粒细胞脱颗粒
3 讨论



本文编号：3650189