杨树SHMT基因家族分析及PtrSHMT9突变体创制
发布时间:2022-06-28 09:05
丝氨酸羟甲基转移酶(SHMT)在植物细胞一碳代谢途径上起着重要作用。我们识别毛果杨PtrSHMT家族有9个基因成员,eFP数据显示7个PtrSHMTs基因在多个组织内有转录表达,其中PtrSHMT9在木质部表达水平最高。进一步定量PCR和Aspwood检测显示,PtrSHMT9表达量在茎木质组织次生壁加厚阶段呈现高水平,这表明它可能参与杨树木材形成。用Cas9/gRNA基因编辑技术,制备PtrSHMT9被编辑产生的突变体,获得4个不同株系ptrshmt9敲除突变体。这些研究结果为深入探究树木SHMT及PtrSHMT9功能,提供了基础信息和遗传材料。
【文章页数】:7 页
【文章目录】:
1 材料与方法
1.1 材料
1.2 实验方法
1.2.1 毛果杨SHMT家族成员识别
1.2.2 植物总RNA分离、总c DNA合成和基因组DNA提取
1.2.3 Ptr SHMT基因e FP表达热图、在Aspwood转录组数据库检测和定量PCR
1.2.4 植物基因编辑载体构构建
1.2.5 毛果杨遗传转化及转基因植株鉴定
1.2.6 转基因植株体内Ptr SHMT9基因靶位点编辑鉴定
2 结果与分析
2.1 杨树SHMT基因家族识别
2.2 Ptr SHMT基因家族表达分析
2.3 p HSE401-Ptr SHMT9基因编辑载体构建
2.4 p HSE401-Ptr SHMT9遗传转化毛果杨及其分子鉴定
2.5 Ptr SHMT9基因位点编辑突变分析
3 讨论
【参考文献】:
期刊论文
[1]Targeted Mutagenesis in Zea mays Using TALENs and the CRISPR/Cas System[J]. Zhen Liang,Kang Zhang,Kunling Chen,Caixia Gao. Journal of Genetics and Genomics. 2014(02)
本文编号:3653932
【文章页数】:7 页
【文章目录】:
1 材料与方法
1.1 材料
1.2 实验方法
1.2.1 毛果杨SHMT家族成员识别
1.2.2 植物总RNA分离、总c DNA合成和基因组DNA提取
1.2.3 Ptr SHMT基因e FP表达热图、在Aspwood转录组数据库检测和定量PCR
1.2.4 植物基因编辑载体构构建
1.2.5 毛果杨遗传转化及转基因植株鉴定
1.2.6 转基因植株体内Ptr SHMT9基因靶位点编辑鉴定
2 结果与分析
2.1 杨树SHMT基因家族识别
2.2 Ptr SHMT基因家族表达分析
2.3 p HSE401-Ptr SHMT9基因编辑载体构建
2.4 p HSE401-Ptr SHMT9遗传转化毛果杨及其分子鉴定
2.5 Ptr SHMT9基因位点编辑突变分析
3 讨论
【参考文献】:
期刊论文
[1]Targeted Mutagenesis in Zea mays Using TALENs and the CRISPR/Cas System[J]. Zhen Liang,Kang Zhang,Kunling Chen,Caixia Gao. Journal of Genetics and Genomics. 2014(02)
本文编号:3653932
本文链接:https://www.wllwen.com/kejilunwen/jiyingongcheng/3653932.html
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