沉默MK基因增强肝癌Bel/Fu细胞对5-氟尿嘧啶的敏感性及可能的机制
发布时间:2022-07-03 15:08
目的:研究沉默中期因子(midkine,MK)基因表达后人肝癌氟尿嘧啶(uorouracil,Fu)耐药细胞株Bel/Fu对5-Fu敏感性的变化,并初步探讨可能的作用机制。方法:采用脂质体瞬时转染法将MK-siRNA转入Bel/Fu细胞,分别应用实时荧光定量PCR及蛋白质印迹法检测MK mRNA及蛋白的表达水平。MKsiRNA联合5-Fu处理后,分别采用MTT及FCM法检测肝癌Bel/Fu细胞的增殖抑制率及凋亡情况,采用蛋白质印迹法检测磷脂酰肌醇3-激酶(phosphoinositide 3-kinase,PI3K)/蛋白激酶B(protein kinase B,PKB,Akt)信号通路中相关蛋白磷酸化PI3K、磷酸化Akt和核因子-κB(nuclear factorkappa B,NF-κB)及凋亡相关蛋白Bcl-2、survivin和caspase-3的表达水平。结果:MK-siRNA转入Bel/Fu细胞后,MK mRNA和蛋白的表达水平均明显下调(P值均<0.05)。MK-siRNA转染组5-Fu对Bel/Fu细胞的半数抑制浓度(half inhibitory concen...
【文章页数】:8 页
【文章目录】:
1 材料与方法
1.1 细胞、试剂及仪器
1.2 方法
1.2.1 细胞培养及转染
1.2.2 MTT法检测细胞的增殖抑制率
1.2.3 FCM法检测细胞凋亡率
1.2.4 实时荧光定量PCR检测MK m RNA的表达水平
1.2.5 蛋白质印迹法检测MK蛋白、PI3K/Akt信号通路中相关蛋白p-PI3K、p-Akt和NF-κB以及凋亡相关蛋白Bcl-2、survivin和caspase-3的表达
1.3 统计学方法
2 结果
2.1 M K-s i RNA对肝癌B e l/Fu细胞中M K m RNA和蛋白表达的影响
2.2 沉默MK基因表达增强肝癌Bel/Fu细胞对5-Fu的敏感性
2.3 沉默MK基因表达后5-Fu对Bel/Fu细胞凋亡的影响
2.4 沉默MK基因表达后5-Fu对PI3K/Akt信号通路中相关蛋白表达的影响
3 讨论
【参考文献】:
期刊论文
[1]In vitro and in vivo suppression of hepatocellular carcinoma growth by midkine-antisense oligonucleotide-loaded nanoparticles[J]. Li-Cheng Dai, Xiang Wang, Shu-Qiong Niu, Shui-Xin Yang, Huzhou Key Laboratory of Molecular Medicine, Huzhou Central Hospital, Huzhou 313000, Zhejiang Province, China Xing Yao, Department of General Surgery, Huzhou Central Hospital, Huzhou 313000, Zhejiang Province, China Lin-Fu Zhou, Fang-Fang Fu, Zhejiang University School of Medicine, Hangzhou 310016, Zhejiang Province, China Jin-Liang Ping, Department of Pathology, Huzhou Central Hospital, Huzhou 313000, Zhejiang Province, China. World Journal of Gastroenterology. 2009(16)
本文编号:3655105
【文章页数】:8 页
【文章目录】:
1 材料与方法
1.1 细胞、试剂及仪器
1.2 方法
1.2.1 细胞培养及转染
1.2.2 MTT法检测细胞的增殖抑制率
1.2.3 FCM法检测细胞凋亡率
1.2.4 实时荧光定量PCR检测MK m RNA的表达水平
1.2.5 蛋白质印迹法检测MK蛋白、PI3K/Akt信号通路中相关蛋白p-PI3K、p-Akt和NF-κB以及凋亡相关蛋白Bcl-2、survivin和caspase-3的表达
1.3 统计学方法
2 结果
2.1 M K-s i RNA对肝癌B e l/Fu细胞中M K m RNA和蛋白表达的影响
2.2 沉默MK基因表达增强肝癌Bel/Fu细胞对5-Fu的敏感性
2.3 沉默MK基因表达后5-Fu对Bel/Fu细胞凋亡的影响
2.4 沉默MK基因表达后5-Fu对PI3K/Akt信号通路中相关蛋白表达的影响
3 讨论
【参考文献】:
期刊论文
[1]In vitro and in vivo suppression of hepatocellular carcinoma growth by midkine-antisense oligonucleotide-loaded nanoparticles[J]. Li-Cheng Dai, Xiang Wang, Shu-Qiong Niu, Shui-Xin Yang, Huzhou Key Laboratory of Molecular Medicine, Huzhou Central Hospital, Huzhou 313000, Zhejiang Province, China Xing Yao, Department of General Surgery, Huzhou Central Hospital, Huzhou 313000, Zhejiang Province, China Lin-Fu Zhou, Fang-Fang Fu, Zhejiang University School of Medicine, Hangzhou 310016, Zhejiang Province, China Jin-Liang Ping, Department of Pathology, Huzhou Central Hospital, Huzhou 313000, Zhejiang Province, China. World Journal of Gastroenterology. 2009(16)
本文编号:3655105
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