梨火疫病菌两个Sec依赖的外泌纤维素酶鉴定及在侵染梨幼果过程中的基因表达分析

发布时间：2022-07-03 14:25

　　利用生物信息学技术结合基于大肠杆菌的碱性磷酸酯酶（PhoA）检测体系,在梨火疫病菌（Erwinia amylovora）全基因组序列中筛选鉴定了2个依赖Sec途径分泌的纤维素酶:内切葡聚糖酶EAMY₃602和β-葡萄糖苷酶EAMY₁236。将梨火疫病菌DSM17948接种酥梨幼果,分别于接种后0、8和24 h定量检测基因表达,结果显示EAMY₃602编码基因（Ea3602）在接种后8和24 h的mRNA表达量逐渐降低,但与0 h相比无显著差异;EAMY₁236编码基因（Ea1236）在接种后8和24 h的mRNA表达量逐步提高,较0 h分别提高了2.43和3.26倍,差异具有统计学意义（P<0.01）。由研究结果推测Sec依赖分泌的内切葡聚糖酶EAMY₃602可能与梨火疫病菌侵染无关,而β-葡萄糖苷酶EAMY₁236可能是梨火疫病菌的毒力因子,在侵染寄主植物过程中发挥作用。 

【文章页数】：7 页

【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 材料与试剂
    1.2 方法
        1.2.1 生物信息学分析
        1.2.2 基因克隆
        1.2.3 PhoA检测
        1.2.4 接种梨幼果
        1.2.5 总RNA提取与RT-qPCR分析
2 结果与分析
    2.1 筛选梨火疫病菌Sec依赖分泌纤维素酶
    2.2 克隆Ea3602和Ea1236基因
    2.3 验证EAMY_3602和EAMY_1236的分泌特性
    2.4 Ea3602和Ea1236在梨火疫病菌侵染幼梨过程中的表达分析
3 讨论


【参考文献】：
期刊论文
[1]梨火疫菌Sec依赖分泌蛋白酶的全基因组鉴定及其在侵染幼梨过程中的基因表达分析（英文）[J]. Wang-bin ZHANG,Hai-lin YAN,Zong-cai ZHU,Chao ZHANG,Pei-xiu DU,Wen-jun ZHAO,Wei-min LI.  Journal of Zhejiang University-Science B（Biomedicine ＆ Biotechnology）. 2020(09)
[2]梨火疫病菌Sec依赖分泌蛋白EAMY＿3046的鉴定及其原核表达[J]. 严海璘,朱宗财,张王斌,杜培秀,张超,赵文军,李为民.  植物检疫. 2020(04)
[3]Fire blight disease, a fast-approaching threat to apple and pear production in China[J]. ZHAO Yu-qiang,TIAN Yan-li,WANG Li-min,GENG Guo-min,ZHAO Wen-jun,HU Bai-shi,ZHAO You-fu.  Journal of Integrative Agriculture. 2019(04)
[4]细菌蛋白分泌途径的研究进展[J]. 訾祯祯,杨志伟.  生物技术通报. 2011(08)
[5]黄瓜黑星病菌致病机理的研究 Ⅱ细胞壁降解酶及其在致病中的作用[J]. 李宝聚,周长力,赵奎华,李凤云,陈红漫.  植物病理学报. 2000(01)

博士论文
[1]梨火疫病菌的风险分析及检测技术研究[D]. 胡白石.南京农业大学 2000

硕士论文
[1]柑桔溃疡病菌（Xanthomonas axonopodis pv.citri）纤维素酶的分析[D]. 李永胜.西南大学 2011



本文编号：3655038