辣椒抗疮痂病基因Bs2和Bs3双重PCR体系的建立及应用

发布时间：2022-07-13 22:15

　　以栽培辣椒和野生型辣椒为试验材料,采用双重PCR体系构建的方法,建立了辣椒抗疮痂病基因Bs2和Bs3的双重PCR反应体系,以期利用该反应体系提高辣椒抗疮痂病种质资源鉴定和育种分离世代材料分子标记辅助筛选的效率。结果表明:抗疮痂病基因Bs2和Bs3的双重PCR反应体系,以Bs2-For/Bs2-Rev和Bs3-For/Bs3-Rev为特异引物,在退火温度为52℃时,具有很好的多态性和稳定性。此外,用该体系对不同辣椒种材料进行抗病性鉴定,与接种鉴定的结果一致,进一步验证了该体系的可靠性。该双重PCR反应体系可用于辣椒抗疮痂病品种选育。 

【文章页数】：7 页

【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 试验材料
    1.2 试验方法
        1.2.1 基因组DNA (gDNA)的提取与标记引物设计
        1.2.2 单组PCR反应条件
        1.2.3 双重引物PCR反应条件
        1.2.4 聚丙烯酰胺凝胶电泳检测
        1.2.5 双重PCR反应特异性与稳定性验证
        1.2.6 双重PCR反应体系的广适性验证
        1.2.7 辣椒材料抗病性接种鉴定
2 结果与分析
    2.1 单一PCR引物验证
    2.2 双重PCR最佳反应条件
    2.3 双重PCR检测Bs2和Bs3的特异性
    2.4 双重PCR适用性验证
    2.5 辣椒抗疮痂病接种鉴定
3 讨论
    3.1 双重PCR标记开发方法的应用
    3.2 双重PCR的影响因素
    3.3 辣椒抗疮痂病鉴定


【参考文献】：
期刊论文
[1]抗虫耐除草剂转基因玉米SW-1目标性状测试及多重PCR检测[J]. 张欣,董玉凤,王旭静,王志兴.  生物技术进展. 2017(04)
[2]辣椒疮痂病抗性研究进展[J]. 姚明华,李宁,王飞.  辣椒杂志. 2013(03)
[3]116个小麦品种（系）抗叶锈基因Lr9-Lr26、Lr19-Lr20的复合PCR检测[J]. 任晓利,刘太国,刘博,高利,陈万权.  植物保护. 2012(02)
[4]多重PCR技术在植物生物学研究中的应用[J]. 刘正斌,高庆荣,王瑞霞,乔晓琳,邱新民.  分子植物育种. 2005(02)
[5]辣椒和甜椒品种抗细菌性疮痂病鉴定[J]. 孙福在,赵廷昌,张宝玺.  植物保护. 2004(03)

博士论文
[1]辣椒抗CMV的遗传分析及相关QTL定位[D]. 姚明华.华中农业大学 2013

硕士论文
[1]同时检测抗病基因Mi、Tm-2~2和Cf-9的多重PCR体系的建立[D]. 任素贤.河北科技大学 2015
[2]同时检测抗病基因Ty-1、Ty-2和Ty-3的多重PCR体系的建立[D]. 宋层孝.河北科技大学 2015



本文编号：3660861