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斑节对虾MKK7基因的克隆及在不同胁迫条件下的表达分析

发布时间:2022-07-15 12:53
  丝裂原活化蛋白激酶激酶7 (MKK7)是JNK (c-Jun N-terminal kinase)信号通路的关键调控因子,参与调节细胞对各种胞外刺激的反应。本研究利用RACE技术克隆获得了斑节对虾(Penaeus monodon) MKK7基因(PmMKK7),其全长为2710 bp,包括14 bp的5’ 非编码区(UTR)、1295 bp的3’ UTR和1401 bp的开放阅读框(open reading frame,ORF),编码466个氨基酸。多重序列比对和系统进化树分析结果表明,PmMKK7与凡纳滨对虾(Litopenaeusvannamei) MKK7基因聚为一支并且具有最高的同源性(99.14%)。定量表达结果表明, PmMKK7基因在斑节对虾的各个组织中都有表达,其中在肌肉中表达最高,在胃中表达最低。菌注射实验后,感染金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)组和鳗弧菌(Vibrioanguillarum)组在肝胰腺和鳃组织中均显著高于对照组(P<0.05);感染哈维氏弧菌(Vibrio harveyi)组,这两种组织中的表达量均显著低于对照组。两... 

【文章页数】:11 页

【文章目录】:
1 材料与方法
    1.1 实验材料
    1.2 总RNA的提取及cDNA的合成
    1.3 斑节对虾MKK7的cDNA克隆
    1.4 生物信息学分析
    1.5 PmMKK7的表达分析
    1.6 病原体感染实验
    1.7 盐度胁迫实验
    1.8 RNA干扰实验
2 结果与分析
    2.1 PmMKK7的序列分析
    2.2 PmMKK7在不同组织中的表达
    2.3 PmMKK7在菌刺激下的表达变化
    2.4 PmMKK7在盐度胁迫下的表达变化
    2.5 PmMKK7基因敲降后的相关表达分析
3 讨论


【参考文献】:
期刊论文
[1]斑节对虾GLUT1基因cDNA的克隆与表达分析[J]. 何鹏,江世贵,李运东,杨其彬,姜松,杨丽诗,黄建华,周发林.  南方水产科学. 2019(02)
[2]JNK1基因在金鱼性腺不同发育时期的表达分析[J]. 邹立军,黄文,庄远红,廖海艳,吉璐.  生物学杂志. 2017(04)
[3]盐度对斑节对虾蜕壳、存活、生长和饲料转化率的影响[J]. 杨其彬,叶乐,温为庚,王雨,江世贵.  南方水产. 2008(01)



本文编号:3662084

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